摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-22页 |
1.1 植物胁迫信号的传导途径 | 第10页 |
1.2 植物应对胁迫的方式 | 第10页 |
1.3 胁迫感受器 | 第10-11页 |
1.4 CBL蛋白 | 第11-14页 |
1.5 CIPK蛋白 | 第14-16页 |
1.6 CBL-CIPK网络研究进展 | 第16-20页 |
1.7 本研究目的和意义 | 第20-21页 |
1.8 技术路线 | 第21-22页 |
2 实验方法与材料 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株 | 第22页 |
2.1.3 载体 | 第22页 |
2.1.4 工具酶和试剂 | 第22页 |
2.1.5 仪器设备 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-38页 |
2.2.1 小麦RNA提取 | 第22-23页 |
2.2.2 反转录成cDNA | 第23页 |
2.2.3 TaCBL1基因在不同胁迫下小麦的表达模式分析 | 第23-24页 |
2.2.4 TaCBL1基因植物定位载体的构建 | 第24-29页 |
2.2.5 pCAMBIA1300-TaCBL1质粒的大量提取 | 第29-30页 |
2.2.6 烟草原生质体制备 | 第30页 |
2.2.7 烟草原生质体的转化 | 第30-31页 |
2.2.8 TaCBL1基因转化烟草 | 第31-32页 |
2.2.9 T2代转基因烟草在培养皿中的耐盐功能分析 | 第32-36页 |
2.2.10 T2代转基因烟草在土壤中的功能分析 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-53页 |
3.1 小麦TaCBL1蛋白的生物信息学分析 | 第38-39页 |
3.2 小麦总RNA的提取及反转录cDNA | 第39页 |
3.3 TaCBL1基因的表达模式分析 | 第39-41页 |
3.4 定位载体及表达载体的构建 | 第41-43页 |
3.4.1 TaCBL1目的基因的克隆 | 第41页 |
3.4.2 克隆载体的构建及鉴定 | 第41-42页 |
3.4.3 表达载体的构建及鉴定 | 第42-43页 |
3.4.4 重组质粒转化农杆菌的菌液PCR检测 | 第43页 |
3.5 TC7CBL1在烟草原生质体的定位 | 第43-44页 |
3.6 转TaCBL1基因烟草的分子鉴定 | 第44-46页 |
3.6.1 转基因烟草的验证 | 第44-45页 |
3.6.2 转基因烟草TaCBL1基因的半定量分析 | 第45-46页 |
3.7 转TaCBL1基因烟草在培养皿中对盐胁迫敏感 | 第46-49页 |
3.7.1 转TaCBL1基因烟草的表型分析 | 第46-48页 |
3.7.2 转基因烟草生理指标测定 | 第48-49页 |
3.8 转TaCBL1基因烟草在土壤中的表型分析 | 第49-51页 |
3.9 盐处理对转基因和野生烟草中 Na~+、K~+离子含量的影响 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
附录 | 第65页 |