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小檗碱对心肌肥厚及纤维化的作用及其机制研究

中文摘要第1-15页
英文摘要第15-20页
序言第20-22页
第一部分 Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大作用的研究第22-36页
 1 前言第22页
 2 实验材料第22-24页
   ·实验细胞第22页
   ·主要仪器及耗材第22-23页
   ·主要试剂及溶液配制第23-24页
     ·主要试剂第23页
     ·主要溶液配制第23-24页
 3 实验方法第24-30页
   ·心肌细胞的分离、纯化、培养第24-25页
   ·心肌细胞的鉴定第25-26页
     ·心态学观察第25页
     ·免疫荧光鉴定第25-26页
   ·[~3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率第26页
   ·心肌细胞面积的测定第26-27页
   ·心肌细胞肥大分子标志物的检测第27-30页
     ·心肌细胞总RNA 的提取第27页
     ·RNA 反转率成cDNA第27-28页
     ·Real-Time PCR 相对定量分析第28-30页
 4 统计学分析第30页
 5 实验结果第30-33页
   ·心肌细胞心态学及免疫学观察第30-31页
     ·心肌细胞心态学观察第30-31页
     ·免疫荧光鉴定第31页
   ·Berberine 对PE 诱导的大鼠[3H]-亮氨酸掺入量的影响第31页
   ·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞面积的影响第31-32页
   ·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大分子标志物的影响第32-33页
 6 结论第33页
 7 讨论第33-36页
   ·大鼠心肌细胞肥大模型的建立第33-34页
   ·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大的作用第34-36页
第二部分 Berberine 对主动脉缩窄诱导的野生型小鼠心肌肥厚及纤维化的作用研究第36-55页
 1 前言第36页
 2 实验材料第36-38页
   ·实验动物第36-37页
   ·主要仪器及耗材第37-38页
   ·主要试剂及溶液配制第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要溶液配制第38页
 3 实验方法第38-43页
   ·动物模型的建立第38-39页
     ·造模第38-39页
     ·术后观察第39页
   ·心功能检测第39-40页
     ·心脏超声检测第39-40页
     ·心脏血流多普勒检测第40页
     ·心脏血流动力学PV 检测第40页
   ·心脏取材及HW/BW、LW/BW 测定第40页
   ·病理学检测第40-42页
     ·心脏脱水、石蜡包埋、切片第40-41页
     ·HE 染色步骤第41页
     ·WGA 染色步骤第41-42页
     ·天狼猩红染色步骤第42页
   ·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测第42-43页
     ·组织样本RNA 的提取第42-43页
     ·RNA 反转成cDNA第43页
     ·Real-Time PCR 相对定量分析第43页
 4 统计学分析第43-44页
 5 实验结果第44-50页
   ·心功能检测结果第44-46页
   ·心脏WB/BW、LW/BW 检测结果第46-47页
   ·病理学检测结果第47-50页
     ·HE 染色结果第47-48页
     ·WGA 染色结果第48-49页
     ·天狼星红染色结果第49-50页
   ·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测结果第50页
 6 结论第50-51页
 7 讨论第51-55页
   ·动物模型的建立第51-52页
   ·berberine 对AB 诱导的心肌肥厚及纤维化的影响第52-55页
     ·心肌肥厚病理学基础第52-53页
     ·心肌肥厚及纤维化的分子标志物第53-54页
     ·berberine 对AB 诱导的心肌肥厚及纤维化的影响第54-55页
第三部分 Berberine抑制心肌肥厚的分子机制探讨第55-67页
 1 前言第55页
 2 实验材料第55-59页
   ·实验细胞及动物第55-56页
     ·实验细胞及分组第55-56页
     ·实验动物及分组第56页
   ·主要仪器及耗材第56页
   ·主要试剂及溶液配制第56-59页
     ·主要试剂第56-57页
     ·主要溶液配制第57-59页
 3 实验方法第59-61页
   ·心肌细胞的分离、纯化、培养、给药处理第59页
   ·动物模型的建立、给药第59页
   ·Wetern-blot 检测第59-61页
 4 统计学分析第61页
 5 实验结果第61-63页
   ·细胞实验信号通路检测结果第61-62页
   ·动物实验信号通路检测结果第62-63页
 6 结论第63页
 7 讨论第63-67页
   ·病理性心肌肥厚的信号转导通路途径第63-65页
     ·机械信号诱导心肌肥厚的信号转导途径第63-64页
     ·神经体液因子介导的心肌肥厚信号转导途径第64页
     ·蛋白激酶在心肌肥厚中的作用第64-65页
   ·Berberine 抑制心肌肥厚的分子机制及信号转导通路第65-67页
     ·AMPK 与心肌肥厚第65页
     ·Berberine 的心血管药理作用第65页
     ·Berberine 抑制心肌肥厚的分子机制及信号转导通路第65-67页
第四部分 Berberine 对主动脉缩窄诱导的AMPKα2 Ko 小鼠心肌肥厚及纤维化的作用研究第67-85页
 1 前言第67页
 2 实验材料第67-69页
   ·实验动物第67页
   ·主要仪器及耗材第67-68页
   ·主要试剂及溶液配制第68-69页
     ·主要试剂第68页
     ·主要溶液配制第68-69页
 3 实验方法第69-72页
   ·基因型鉴定第69-70页
     ·剪取小鼠尾巴第69页
     ·鼠尾消化第69页
     ·PCR、电泳第69-70页
   ·动物模型的建立第70页
   ·心功能检测第70-71页
     ·心脏超声检测第70-71页
     ·心脏血流多普勒检测第71页
     ·心脏血流动力学PV 检测第71页
   ·心脏取材及HW/BW、LW/BW、HW/IL 测定第71页
   ·病理学检测第71页
     ·心脏脱水、石蜡包埋、切片第71页
     ·HE 染色第71页
     ·WGA 染色第71页
     ·天狼星红染色.第71页
   ·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测第71-72页
 4 统计学分析第72-73页
 5 实验结果第73-83页
   ·基因型鉴定结果第73页
   ·心功能检测结果第73-77页
     ·心脏超声检测结果第73-76页
     ·心脏血流动力学检测结果第76-77页
   ·心脏WB/BW、LW/BW、HW/IL 检测结果第77-78页
   ·病理学检测结果第78-81页
     ·HE 染色结果第78-79页
     ·WGA 染色结果第79-80页
     ·天狼星红染色结果第80-81页
   ·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测结果第81-83页
     ·心肌肥厚分子标志物检测结果第81-82页
     ·心肌纤维化分子标志物检测结果第82-83页
 6 结论第83页
 7 讨论第83-85页
总结第85-87页
讨论第87-89页
参考文献第89-98页
综述第98-106页
 参考文献第101-106页
攻读学位期间发表的论文第106-108页
附录一 附图第108-109页
附录二 缩写词中英文对照表第109-112页
致谢第112页

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