中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-20页 |
序言 | 第20-22页 |
第一部分 Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大作用的研究 | 第22-36页 |
1 前言 | 第22页 |
2 实验材料 | 第22-24页 |
·实验细胞 | 第22页 |
·主要仪器及耗材 | 第22-23页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第23-24页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要溶液配制 | 第23-24页 |
3 实验方法 | 第24-30页 |
·心肌细胞的分离、纯化、培养 | 第24-25页 |
·心肌细胞的鉴定 | 第25-26页 |
·心态学观察 | 第25页 |
·免疫荧光鉴定 | 第25-26页 |
·[~3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率 | 第26页 |
·心肌细胞面积的测定 | 第26-27页 |
·心肌细胞肥大分子标志物的检测 | 第27-30页 |
·心肌细胞总RNA 的提取 | 第27页 |
·RNA 反转率成cDNA | 第27-28页 |
·Real-Time PCR 相对定量分析 | 第28-30页 |
4 统计学分析 | 第30页 |
5 实验结果 | 第30-33页 |
·心肌细胞心态学及免疫学观察 | 第30-31页 |
·心肌细胞心态学观察 | 第30-31页 |
·免疫荧光鉴定 | 第31页 |
·Berberine 对PE 诱导的大鼠[3H]-亮氨酸掺入量的影响 | 第31页 |
·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞面积的影响 | 第31-32页 |
·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大分子标志物的影响 | 第32-33页 |
6 结论 | 第33页 |
7 讨论 | 第33-36页 |
·大鼠心肌细胞肥大模型的建立 | 第33-34页 |
·Berberine 对PE 诱导的大鼠心肌细胞肥大的作用 | 第34-36页 |
第二部分 Berberine 对主动脉缩窄诱导的野生型小鼠心肌肥厚及纤维化的作用研究 | 第36-55页 |
1 前言 | 第36页 |
2 实验材料 | 第36-38页 |
·实验动物 | 第36-37页 |
·主要仪器及耗材 | 第37-38页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要溶液配制 | 第38页 |
3 实验方法 | 第38-43页 |
·动物模型的建立 | 第38-39页 |
·造模 | 第38-39页 |
·术后观察 | 第39页 |
·心功能检测 | 第39-40页 |
·心脏超声检测 | 第39-40页 |
·心脏血流多普勒检测 | 第40页 |
·心脏血流动力学PV 检测 | 第40页 |
·心脏取材及HW/BW、LW/BW 测定 | 第40页 |
·病理学检测 | 第40-42页 |
·心脏脱水、石蜡包埋、切片 | 第40-41页 |
·HE 染色步骤 | 第41页 |
·WGA 染色步骤 | 第41-42页 |
·天狼猩红染色步骤 | 第42页 |
·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测 | 第42-43页 |
·组织样本RNA 的提取 | 第42-43页 |
·RNA 反转成cDNA | 第43页 |
·Real-Time PCR 相对定量分析 | 第43页 |
4 统计学分析 | 第43-44页 |
5 实验结果 | 第44-50页 |
·心功能检测结果 | 第44-46页 |
·心脏WB/BW、LW/BW 检测结果 | 第46-47页 |
·病理学检测结果 | 第47-50页 |
·HE 染色结果 | 第47-48页 |
·WGA 染色结果 | 第48-49页 |
·天狼星红染色结果 | 第49-50页 |
·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测结果 | 第50页 |
6 结论 | 第50-51页 |
7 讨论 | 第51-55页 |
·动物模型的建立 | 第51-52页 |
·berberine 对AB 诱导的心肌肥厚及纤维化的影响 | 第52-55页 |
·心肌肥厚病理学基础 | 第52-53页 |
·心肌肥厚及纤维化的分子标志物 | 第53-54页 |
·berberine 对AB 诱导的心肌肥厚及纤维化的影响 | 第54-55页 |
第三部分 Berberine抑制心肌肥厚的分子机制探讨 | 第55-67页 |
1 前言 | 第55页 |
2 实验材料 | 第55-59页 |
·实验细胞及动物 | 第55-56页 |
·实验细胞及分组 | 第55-56页 |
·实验动物及分组 | 第56页 |
·主要仪器及耗材 | 第56页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第56-59页 |
·主要试剂 | 第56-57页 |
·主要溶液配制 | 第57-59页 |
3 实验方法 | 第59-61页 |
·心肌细胞的分离、纯化、培养、给药处理 | 第59页 |
·动物模型的建立、给药 | 第59页 |
·Wetern-blot 检测 | 第59-61页 |
4 统计学分析 | 第61页 |
5 实验结果 | 第61-63页 |
·细胞实验信号通路检测结果 | 第61-62页 |
·动物实验信号通路检测结果 | 第62-63页 |
6 结论 | 第63页 |
7 讨论 | 第63-67页 |
·病理性心肌肥厚的信号转导通路途径 | 第63-65页 |
·机械信号诱导心肌肥厚的信号转导途径 | 第63-64页 |
·神经体液因子介导的心肌肥厚信号转导途径 | 第64页 |
·蛋白激酶在心肌肥厚中的作用 | 第64-65页 |
·Berberine 抑制心肌肥厚的分子机制及信号转导通路 | 第65-67页 |
·AMPK 与心肌肥厚 | 第65页 |
·Berberine 的心血管药理作用 | 第65页 |
·Berberine 抑制心肌肥厚的分子机制及信号转导通路 | 第65-67页 |
第四部分 Berberine 对主动脉缩窄诱导的AMPKα2 Ko 小鼠心肌肥厚及纤维化的作用研究 | 第67-85页 |
1 前言 | 第67页 |
2 实验材料 | 第67-69页 |
·实验动物 | 第67页 |
·主要仪器及耗材 | 第67-68页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第68-69页 |
·主要试剂 | 第68页 |
·主要溶液配制 | 第68-69页 |
3 实验方法 | 第69-72页 |
·基因型鉴定 | 第69-70页 |
·剪取小鼠尾巴 | 第69页 |
·鼠尾消化 | 第69页 |
·PCR、电泳 | 第69-70页 |
·动物模型的建立 | 第70页 |
·心功能检测 | 第70-71页 |
·心脏超声检测 | 第70-71页 |
·心脏血流多普勒检测 | 第71页 |
·心脏血流动力学PV 检测 | 第71页 |
·心脏取材及HW/BW、LW/BW、HW/IL 测定 | 第71页 |
·病理学检测 | 第71页 |
·心脏脱水、石蜡包埋、切片 | 第71页 |
·HE 染色 | 第71页 |
·WGA 染色 | 第71页 |
·天狼星红染色. | 第71页 |
·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测 | 第71-72页 |
4 统计学分析 | 第72-73页 |
5 实验结果 | 第73-83页 |
·基因型鉴定结果 | 第73页 |
·心功能检测结果 | 第73-77页 |
·心脏超声检测结果 | 第73-76页 |
·心脏血流动力学检测结果 | 第76-77页 |
·心脏WB/BW、LW/BW、HW/IL 检测结果 | 第77-78页 |
·病理学检测结果 | 第78-81页 |
·HE 染色结果 | 第78-79页 |
·WGA 染色结果 | 第79-80页 |
·天狼星红染色结果 | 第80-81页 |
·心肌肥厚及纤维化分子标志物检测结果 | 第81-83页 |
·心肌肥厚分子标志物检测结果 | 第81-82页 |
·心肌纤维化分子标志物检测结果 | 第82-83页 |
6 结论 | 第83页 |
7 讨论 | 第83-85页 |
总结 | 第85-87页 |
讨论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
综述 | 第98-106页 |
参考文献 | 第101-106页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第106-108页 |
附录一 附图 | 第108-109页 |
附录二 缩写词中英文对照表 | 第109-112页 |
致谢 | 第112页 |