符号说明 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-30页 |
·COP9信号复合体 | 第13-20页 |
·COP9信号复合体的由来 | 第13-14页 |
·CSN结构 | 第14-15页 |
·与CSN通用分子结构的另外两个复合体:蛋白酶盖子和e IF3复合体 | 第15页 |
·CSN功能 | 第15-20页 |
·CSN通过泛素/26S蛋白酶系统发挥功能 | 第15-17页 |
·CSN调控CRLs | 第17-19页 |
·CSN和CAND1调控CRL循环 | 第19-20页 |
·CSN完整复合体和亚复合体 | 第20页 |
·CSN在植物发育中的作用 | 第20-26页 |
·CSN在光形态建成和其他光诱导过程 | 第20-21页 |
·CSN在花发育中 | 第21页 |
·CSN在激素信号转导途径中 | 第21-23页 |
·生长素信号 | 第22页 |
·茉莉酸信号 | 第22页 |
·赤霉素信号 | 第22-23页 |
·CSN在植物病原体中的响应 | 第23-24页 |
·R调节的抗性 | 第23页 |
·JA介导的防卫 | 第23-24页 |
·水杨酸介导的防卫 | 第24页 |
·劫持CSN作为成功防卫细菌治病性一种策略 | 第24页 |
·在植物和其他生物中CSN和其他细胞过程 | 第24-26页 |
·细胞循环 | 第25页 |
·DNA修复 | 第25-26页 |
·基因表达 | 第26页 |
·CSN7 | 第26-27页 |
·CSN7与各亚基间的互作关系 | 第27页 |
·生物信息学 | 第27-28页 |
·本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-43页 |
·材料 | 第30-32页 |
·植物材料 | 第30页 |
·菌株与载体 | 第30页 |
·酶、抗生素、各种化学药品及生化试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器及设备 | 第31页 |
·PCR引物 | 第31页 |
·培养基 | 第31页 |
·抗生素 | 第31-32页 |
·溶液和缓冲液 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-41页 |
·模板DNA的制备 | 第32页 |
·RNA的提取 | 第32页 |
·RNA含量与纯度检测 | 第32页 |
·RNA的纯化(除DNA) | 第32-33页 |
·c DNA链的合成 | 第33-34页 |
·目的基因片段的扩增 | 第34页 |
·PCR扩增产物的回收 | 第34页 |
·PCR回收产物连接到载体: | 第34页 |
·连接产物的转化: | 第34-35页 |
·质粒DNA的提取 | 第35页 |
·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第35-36页 |
·质粒DNA的酶切 | 第36页 |
·CSN7基因表达载体的构建 | 第36-37页 |
·CSN7基因正义表达载体的构建 | 第36-37页 |
·CSN7基因反义表达载体的构建 | 第37页 |
·实时定量RT-PCR | 第37-38页 |
·引物设计合成 | 第37-38页 |
·反转录具体方法见 2.1.7.4 | 第38页 |
·q RT-PCR扩增 | 第38页 |
·植物总蛋白的提取 | 第38-39页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第39-40页 |
·转膜 | 第40页 |
·Western Blot | 第40-41页 |
·生物信息学分析 | 第41-43页 |
·苹果Md CSNs基因家族成员的确定 | 第41页 |
·蛋白质结构分析 | 第41-42页 |
·一级结构理化性质分析 | 第41页 |
·苹果Md CSNs家族蛋白二级结构分析 | 第41页 |
·苹果Md CSNs保守域结构分析 | 第41-42页 |
·苹果Md CSNs家族蛋白三级结构分析 | 第42页 |
·构建苹果Md CSNs系统发育树 | 第42页 |
·Md CSNs基因结构及染色体定位分析 | 第42页 |
·亚细胞定位预测 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-59页 |
·苹果Md CSNs家族生物信息学分析 | 第43-54页 |
·苹果Md CSNs家族基因的确定 | 第43-44页 |
·苹果Md CSNs家族基因进化分析 | 第44页 |
·苹果Md CSNs家族基因的基本特征及理化性质分析 | 第44-45页 |
·苹果Md CSNs家族蛋白二级结构分析 | 第45-47页 |
·苹果Md CSNs蛋白结构域分析 | 第47-51页 |
·苹果Md CSNs家族蛋白三级结构预测 | 第51页 |
·苹果Md CSNs家族染色体定位分析 | 第51页 |
·苹果Md CSNs基因结构分析 | 第51-53页 |
·亚细胞定位预测 | 第53-54页 |
·苹果Md CSNs基因时空表达分析 | 第54-56页 |
·苹果Md CSN7-1 转基因材料的获得 | 第56-59页 |
·苹果Md CSN7-1 基因的克隆及序列分析 | 第56页 |
·苹果Md CSN7-1 基因遗传转化苹果愈伤 | 第56-59页 |
·Md CSN7-1 转基因表达载体的构建 | 第56-57页 |
·苹果转基因愈伤的获得 | 第57页 |
·Md CSN7-1 转基因表达王林愈伤组织的定量检测 | 第57页 |
·Md CSN7-1 转基因表达王林愈伤组织的Western检测 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
·苹果Md CSNs家族基因生物信息学方面 | 第59-60页 |
·苹果Md CSN7-1 转基因愈伤方面 | 第60-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
6 参考文献 | 第62-70页 |
7 附录 | 第70-76页 |
致谢 | 第76页 |