| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 综述一 牛病毒性腹泻病毒的研究现状 | 第15-22页 |
| 1 BVDV的生物学特性 | 第15页 |
| 2 BVDV的分型 | 第15页 |
| 3 BVDV的基因组结构及其编码蛋白的研究 | 第15-18页 |
| ·结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·非结构蛋白 | 第17-18页 |
| 4 BVDV的临床类型及其发生机理 | 第18-19页 |
| ·持续性感染与繁殖能力低下 | 第18页 |
| ·急性BVD | 第18页 |
| ·粘膜病 | 第18页 |
| ·出血综合征和血小板减少症 | 第18-19页 |
| 5 BVDV防制的研究 | 第19-22页 |
| ·常规疫苗 | 第19-20页 |
| ·新型疫苗 | 第20-22页 |
| 综述二 纳米抗体的研究进展 | 第22-27页 |
| 1 抗体的发展简史 | 第22-23页 |
| 2 纳米抗体的概述 | 第23-27页 |
| ·纳米抗体结构 | 第23-24页 |
| ·纳米抗体的特性 | 第24-25页 |
| ·VHH抗体在医疗领域的研究进展 | 第25-27页 |
| 第二章 试验研究 | 第27-63页 |
| 试验一 抗BVDV纳米抗体库的鉴定 | 第27-33页 |
| 摘要 | 第27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-31页 |
| ·初始文库库容的鉴定 | 第28-29页 |
| ·抗体库阳性率检测 | 第29页 |
| ·抗体库多样性分析 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 试验二 抗BVDV纳米抗体噬菌体文库的扩增和筛选 | 第33-47页 |
| 摘要 | 第33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-40页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-40页 |
| 2 结果 | 第40-45页 |
| ·BVDV-NADL株病毒增殖及TCID50的测定 | 第40-41页 |
| ·包被BVDV抗原最适工作浓度的筛选 | 第41-42页 |
| ·辅助性噬菌体M13KO7的扩增及滴度的测定 | 第42页 |
| ·抗BVDV噬菌体展示文库的大规模扩增及滴度的测定 | 第42-43页 |
| ·抗BVDV特异性VHH纳米抗体的筛选 | 第43-45页 |
| ·ELISA阳性VHH抗体噬菌体单克隆的序列测定 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 试验三 BVDV纳米抗体的表达、纯化及抗病毒的初步观察 | 第47-63页 |
| 摘要 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-57页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-57页 |
| 2 结果 | 第57-61页 |
| ·VHH-A6目的基因的扩增 | 第57页 |
| ·重组质粒PMD19-T-VHH-A6的鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组表达载体PET-28A-VHH-A6的构建及鉴定 | 第58-59页 |
| ·原核产物的表达 | 第59页 |
| ·细胞水平验证VHH-A6纳米抗体对病毒复制的抑制效果 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63页 |
| 创新点 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录：主要试剂的配制 | 第72-76页 |
| 一、分子克隆所需试剂的配制 | 第72页 |
| 二、蛋白表达与纯化所需试剂的配制 | 第72-73页 |
| 三、细胞培养所需试剂的配制 | 第73页 |
| 四、试剂盒操作说明书 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 导师评阅表 | 第78页 |
