TGF-β1/Smad7信号通路在食管鳞癌上皮间质转化中的作用

【摘要】：目的:探索TGF-β1/Smad7信号通路在哈萨克族食管鳞癌上皮间质转化(EMT)中的作用及其具体机制。方法:运用免疫组织化学方法检测72例哈萨克族食管鳞癌组织及远端对应癌旁组织中TGF-β1及Smad7蛋白的表达。进一步在细胞水平,针对食管鳞癌细胞系Ec9706,基于RNA干扰技术,使用LipofectamineTM2000试剂转染TGF-β1 siRNA。采用qRT-PCR技术检测TGF-β1及Smad7 m RNA表达水平;Western blot技术检测转染后各组TGF-β1、Smad7以及EMT相关蛋白表达水平;MTT、划痕及流式细胞术等方法检测各组细胞转染后的增殖、迁移、凋亡及周期的变化。结果:免疫组织化学检测结果显示,哈萨克族食管鳞癌组织中TGF-β1蛋白表达明显高于远端对应癌旁组织(P0.05);Smad7蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显低于远端对应癌旁组织(P0.05);TGF-β1与Smad7的表达呈负相关关系(P0.05,r=-0.253)。转染TGF-β1 siRNA后,Ec9706细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白表达量均降低,Smad7 mRNA和蛋白表达量均增加;上皮标志物E-cadherin表达量增加,间质标志物Vimentin表达量降低,同时Ec9706细胞增殖、迁移受到抑制,细胞凋亡增加,细胞周期发生G0/G1期阻滞。结论:哈萨克族食管鳞癌中存在TGF-β1/Smad7信号通路的激活,食管癌中TGF-β1高表达,抑制了Smad7的表达,从而促进了上皮间质转化过程,进一步促进了食管癌细胞的增殖和迁移,并抑制细胞凋亡,影响细胞周期中的G0/G1期。
【关键词】：食管鳞癌 上皮间质转化 TGF-β1 Smad7 RNA干扰
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1