| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 土地盐碱化概况 | 第12页 |
| 2 植物的耐盐机理 | 第12-16页 |
| ·植物对盐胁迫的应答 | 第12-14页 |
| ·根器官中的基因调节 | 第14页 |
| ·渗透作用 | 第14-15页 |
| ·K~+和Na~+的转运 | 第15-16页 |
| 3 HD-Zip类转录因子研究进展 | 第16-23页 |
| ·HB的发现 | 第16-17页 |
| ·HD的分类 | 第17页 |
| ·HD-Zip的结构特征 | 第17-20页 |
| ·HD-Zip亚类的生物调控功能 | 第20-23页 |
| ·HD-ZipⅠ类 | 第20-21页 |
| ·HD-ZipⅡ类 | 第21页 |
| ·HD-ZipⅢ类 | 第21-22页 |
| ·HD-ZipⅣ类 | 第22-23页 |
| 4 紫花苜蓿耐盐品种的选育 | 第23-25页 |
| ·选育意义 | 第23页 |
| ·传统方法选育概况 | 第23-25页 |
| ·国外的选育概况 | 第23-24页 |
| ·我国的选育概况 | 第24-25页 |
| ·生物技术的应用 | 第25页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第25-28页 |
| 第二章 紫花苜蓿MsHB2基因的克隆 | 第28-42页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·克隆载体与菌株 | 第28页 |
| ·生化试剂及工具酶 | 第28页 |
| ·溶液与培养基 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·引物合成与测序 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-36页 |
| ·植物材料的培养 | 第30页 |
| ·植物总RNA提取纯化及检测 | 第30-31页 |
| ·MsHB2 3'-RACE | 第31-32页 |
| ·3'RACE原理 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·MsHB2 5'-RACE | 第32-34页 |
| ·5'RACE原理 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·PCR产物的回收 | 第34页 |
| ·目的片段的连接与转化 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆的鉴定与测序 | 第35-36页 |
| ·序列分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-40页 |
| ·紫花苜蓿总RNA的检测 | 第36-37页 |
| ·目的基因全长序列的获得 | 第37-38页 |
| ·MsHB2基因编码蛋白序列分析 | 第38-40页 |
| 4 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 紫花苜蓿MsHB2基因的亚细胞定位 | 第42-48页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·克隆载体与菌株 | 第42页 |
| ·生化试剂及工具酶 | 第42页 |
| ·溶液及培养基 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·引物合成与测序 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-46页 |
| ·植物材料的培养 | 第43页 |
| ·构建克隆载体pEASAY-MsHB2 | 第43页 |
| ·提取质粒 | 第43-44页 |
| ·构建融合表达载体pA7-GFP-MsHB2 | 第44-45页 |
| ·制备金粉悬液 | 第45页 |
| ·基因枪子弹的制备 | 第45页 |
| ·洋葱表皮预培养 | 第45-46页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮 | 第46页 |
| ·瞬时表达检测 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-47页 |
| ·融合表达载体pA7-GFP-MsHB2的构建及鉴定 | 第46页 |
| ·MsHB2蛋白在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位 | 第46-47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 MsHB2基因的表达分析 | 第48-54页 |
| 1 材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·酶与化学试剂 | 第48页 |
| ·溶液 | 第48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·引物设计与合成 | 第48-49页 |
| 2 方法 | 第49-50页 |
| ·植物材料的培养 | 第49页 |
| ·胁迫处理 | 第49页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第49页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-51页 |
| ·MsHB2基因在不同组织中的表达特性 | 第50-51页 |
| ·MsHB2基因在NaCl胁迫条件下的表达特性 | 第51页 |
| ·MsHB2基因在ABA胁迫条件下的表达特性 | 第51页 |
| 4 小结 | 第51-54页 |
| 第五章 MsHB2基因对拟南芥的遗传转化及初步鉴定 | 第54-64页 |
| 1 材料 | 第54-56页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·克隆载体与菌株 | 第54页 |
| ·生化试剂及工具酶 | 第54页 |
| ·溶液与培养基 | 第54-55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55页 |
| ·引物合成与测序 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-61页 |
| ·拟南芥的培养 | 第56页 |
| ·超表达载体pBI121-MsHB2的构建 | 第56-58页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第58页 |
| ·拟南芥的转化 | 第58-59页 |
| ·基因组DNA的提取及检测 | 第59-60页 |
| ·转基因拟南芥T_2代植株的PCR检测 | 第60页 |
| ·总RNA的提取及检测 | 第60页 |
| ·转基因拟南芥T_2代植株的RT-PCR检测 | 第60-61页 |
| ·NaCl与ABA胁迫下T_3代种子的生长试验 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·转基因拟南芥T_2代植株的获得 | 第61-62页 |
| ·转基因拟南芥T_2代植株PCR检测结果 | 第62页 |
| ·转基因拟南芥T_2代植株RT-PCR检测结果 | 第62页 |
| ·NaCl与ABA胁迫下T_3代种子的生长情况 | 第62-63页 |
| 4 小结 | 第63-64页 |
| 第六章 结论、讨论与展望 | 第64-68页 |
| 1 结论 | 第64页 |
| 2 讨论 | 第64-65页 |
| 3 工作展望 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-82页 |
| 致谢 | 第82页 |