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禾谷镰刀菌支链氨基酸合成基因FgILV5的生物学功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 小麦赤霉病第11-14页
   ·小麦赤霉病的发生情况第11页
   ·小麦赤霉病菌的基本生物学特性第11-12页
   ·影响小麦赤霉病发生的条件第12页
   ·小麦赤霉病的发生规律与危害第12-13页
   ·小麦赤霉病的防控第13-14页
 2 禾谷镰刀菌毒素第14-17页
   ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的特性第14-15页
   ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性机理第15-16页
   ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人类的影响第16-17页
 3. 支链氨基酸(BCAAs)合成途径的研究概况第17-20页
   ·支链氨基酸的种类和特性第17页
   ·支链氨基酸的作用第17-18页
   ·支链氨基酸的代谢第18-20页
   ·支链氨基酸合成相关基因的生物学功能研究第20页
 4 本研究的意义、研究目标及研究内容第20-23页
   ·本研究的意义第20页
   ·研究目标第20-21页
   ·研究内容第21-23页
第二章 FgILV5基因的生物学功能研究第23-63页
 1. 材料与方法第23-45页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌种来源第23页
     ·常用细菌菌株和质粒第23页
     ·实验植物第23页
     ·培养基第23-25页
     ·相关试剂第25-26页
     ·实验仪器第26页
   ·试验方法第26-45页
     ·小麦赤霉菌种的保存、培养、产孢第26-27页
     ·PCR技术第27页
     ·DNA琼脂糖电泳第27-28页
     ·PCR产物纯化第28-29页
     ·基因组DNA的提取第29-30页
     ·大肠杆菌E.ColiDH5α菌株感受态细胞的制备第30-31页
     ·DNA克隆技术第31-32页
     ·热击反应(感受态细胞的转化)第32页
     ·重组质粒的鉴定与提取第32-33页
     ·质粒酶切第33-34页
     ·小麦赤霉病菌的遗传转化第34-35页
     ·小麦赤霉病菌总RNA的提取与基因表达量分析第35-37页
     ·小麦赤霉病菌基因组DNA Southern blot分析第37-40页
     ·禾谷镰刀菌中FgILV5基因的内含子验证和表达分析第40-41页
     ·FgILV5基因缺失突变体的构建第41页
     ·FgILV5基因互补转化子的获得及验证第41-42页
     ·氨基酸的测定第42页
     ·FgILV5缺失突变体菌丝生长和菌落特征的测定第42页
     ·FgILV5缺失突变体分生孢子产生和萌发率测定第42-43页
     ·FgILV5缺失突变体对细胞胁迫和磺脲类除草剂的敏感性测定第43页
     ·植物致病性的测定第43页
     ·FgILV5缺失突变体DON毒素产量的测定第43-44页
     ·FgILV5缺失突变体的基因表达水平的分析第44-45页
 2. 实验结果第45-60页
   ·禾谷镰刀菌基因组中FgILV5基因的鉴定和测定分析第45-47页
   ·禾谷镰刀菌中FgILV5基因敲除和互补突变体的获得与鉴定第47-50页
   ·禾谷镰刀菌FgILV5基因是BCAAs生物合成过程中的重要组分第50-52页
   ·FgILV5基因缺失体气生菌丝生长量和色素产生量减少第52-55页
   ·禾谷镰刀菌中FgILV5基因的缺失影响分生孢子的产生和萌发第55页
   ·禾谷镰刀菌中FgILV5基因的缺失将会增加其对渗透胁迫、氧化胁迫以及对AHAS抑制剂的忍耐性第55-57页
   ·禾谷镰刀菌的FgILV5基因缺失突变体致病性降低第57-58页
   ·禾谷镰刀菌FgILV5基因的缺失使得DON毒素积累量减少第58-60页
 3 讨论第60-63页
参考文献第63-71页
致谢第71页

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