| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-23页 |
| 1 细菌鞭毛 | 第8-14页 |
| ·细菌鞭毛的组装及表达调控 | 第9-12页 |
| ·flhDC的基因结构及表达调捏 | 第12-14页 |
| 2 Red同源重组 | 第14-18页 |
| ·Red同源重组的作用机制 | 第15页 |
| ·Red同源重组应用于大肠杆菌基因组的修饰 | 第15-17页 |
| ·反向筛选标记 | 第17-18页 |
| 3 T-载体 | 第18-23页 |
| ·T载体的应用 | 第18-19页 |
| ·T载体的构建方法 | 第19-23页 |
| 第二章 不同长度5'-UTR对flhDC基因表达的影响 | 第23-38页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| ·质粒与菌株 | 第23-24页 |
| ·生化试剂和分子生物学试剂 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·抗生素 | 第24页 |
| ·主要溶液 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-33页 |
| ·实验中所用的引物和设计 | 第25-26页 |
| ·不同长度5'-UTR的flhDC全长基因的扩增 | 第26-28页 |
| ·制备大肠杆菌TOP10的感受态细胞及其效率的检测 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌TOP10的感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·大肠杆苗TOP10的感受态细胞的效率检测 | 第29页 |
| ·不同长度5'-UTR的flhDC全长基因的克隆与转化 | 第29-31页 |
| ·克隆的筛选 | 第31页 |
| ·pBAD_flhDC986、1201、1572、1752、1938质粒提取 | 第31-32页 |
| ·含pBAD_flhDC986、1201、1572、1752、1938 质粒 STM542菌株的构建 | 第32-33页 |
| ·含pBAD_flhDC986、1201、1572、1752、1938 质粒的STM542动力的测定 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-36页 |
| ·不同长度5'-UTR序列的flhDC全长基因的扩增 | 第33-34页 |
| ·含pBAD_flhDC986、1201、1572、1752、1938 重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·含pBAD_flhDC986、1201、1572、1752、19% 质粒的 STM542动力的测定 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 一种lacZ报告子T载体的构建 | 第38-50页 |
| 1 材料 | 第38-40页 |
| ·质粒与菌株 | 第38页 |
| ·生化试剂和分子生物学试剂 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·抗生素 | 第39页 |
| ·主要溶液 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-45页 |
| ·实验中所用的引物和设计 | 第40-41页 |
| ·pMD-dXlacZ-T载体的构建 | 第41-44页 |
| ·可以示踪T载体的构建 | 第44页 |
| ·可以示踪T载体克隆flhDC不同长度5'-UTR启动子(Promoter) | 第44页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| ·pMD-dXlacZ-T载体的构建结果 | 第45-46页 |
| ·可以示踪T载体的鉴定结果 | 第46页 |
| ·flhDC不同长度5'-UTR启动子(Promoter)扩增的结果 | 第46-47页 |
| ·T栽体克隆含不同长度5’-UTR flhDC启动子的正反向鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·β-半乳糖苷酶的测定结果 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 Para_SK的构建及大肠杆菌TOP10 flgK基因的敲除 | 第50-60页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| ·质粒与菌株 | 第50页 |
| ·生化试剂和分子生物学试剂 | 第50-51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·抗生素 | 第51页 |
| ·主要溶液 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-56页 |
| ·实验中所用的引物和设计 | 第52页 |
| ·Para_SK的扩增 | 第52-54页 |
| ·T载体制备及质量检测 | 第54-55页 |
| ·Para_SK基因片段克隆 | 第55页 |
| 2 5 测定重组菌链霉素最小抑茵浓度 | 第55-56页 |
| ·TOP10△flgK菌株动力的测定 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-58页 |
| ·带有同源臂的Para_SK片段的扩增 | 第56-57页 |
| ·插入鉴定的结果 | 第57页 |
| ·链霉素最小抑菌浓度的测定结果 | 第57-58页 |
| ·TOP10△flgK菌株动力的测定结果 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
