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果蝇Rgn蛋白多克隆抗体制备及其在天然免疫中的作用

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 绪论第8-16页
   ·果蝇及其在生物研究中的作用第8-9页
     ·模式生物果蝇第8页
     ·果蝇中的RNA干涉技术——UAS/Gal4系统第8页
     ·果蝇中的P因子技术第8-9页
   ·果蝇的天然免疫第9-14页
     ·果蝇的体液免疫第10-12页
     ·果蝇的细胞免疫第12-13页
     ·果蝇的黑化反应第13页
     ·果蝇体内其它免疫方式第13-14页
   ·Rgn蛋白介绍第14-15页
   ·本研究的目的和意义第15-16页
2 材料和方法第16-21页
   ·实验材料第16页
     ·果蝇品系第16页
     ·实验菌种及载体第16页
     ·实验试剂第16页
     ·实验仪器第16页
   ·实验方法第16-21页
     ·制作果蝇培养基第16-17页
     ·果蝇成虫RNA提取第17页
     ·构建重组表达质粒第17-18页
     ·融合蛋白的原核诱导及纯化第18页
     ·Western blot法检测Rgn蛋白的表达第18页
     ·Rgn蛋白多克隆抗体制备第18页
     ·细胞转染第18页
     ·免疫组织化学染色检测Rgn蛋白在果蝇血细胞中定位第18-19页
     ·果蝇三龄幼虫血细胞计数第19页
     ·果蝇三龄幼虫噬菌实验第19页
     ·果蝇病原体注射实验第19页
     ·果蝇三龄幼虫创伤实验第19页
     ·果蝇三龄幼虫血细胞细胞膜延展实验第19-20页
     ·图像采集第20-21页
3 结果与分析第21-30页
   ·抗Rgn多克隆抗体的制备第21-24页
     ·pRSETA-rgn表达载体的构建第21页
     ·原核表达及蛋白纯化第21-22页
     ·抗Rgn多克隆抗体特异性检测第22-24页
   ·Rgn蛋白在果蝇天然免疫中的作用第24-30页
     ·检测rgn缺陷型果蝇体内Rgn含量第24页
     ·Rgn对果蝇生长发育的影响第24-25页
     ·rgn缺陷型果蝇血细胞数量分析第25-26页
     ·rgn缺陷型果蝇侵染病原体生存率分析第26-27页
     ·rgn缺陷型果蝇血细胞对TRITC-bead的吞噬实验第27-28页
     ·rgn缺陷型果蝇血细胞细胞膜肌动蛋白形态检测第28页
     ·rgn缺陷型果蝇淋巴腺中PPO1含量变化第28-29页
     ·rgn缺陷型果蝇创伤修复实验第29-30页
4 讨论第30-34页
   ·抗Rgn多克隆抗体第30页
   ·实验中所用果蝇的杂交策略第30-31页
   ·Rgn蛋白对于果蝇细胞免疫及造血功能的影响第31页
   ·Rgn蛋白在抵御病原微生物入侵时的作用第31-32页
   ·Rgn蛋白对果蝇血细胞非病原体吞噬及摄取机制第32页
   ·Rgn蛋白对果蝇黑化反应及创伤修复的影响第32-34页
结论第34-35页
参考文献第35-40页
攻读学位期间发表的学术论文第40-41页
致谢第41-42页

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