| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| ·课题来源及研究的目的和意义 | 第9页 |
| ·课题来源及研究目的 | 第9页 |
| ·课题意义 | 第9页 |
| ·胚胎微环境用于肿瘤治疗 | 第9-11页 |
| ·肿瘤治疗的现状 | 第9-10页 |
| ·胚胎发育的微环境对肿瘤细胞表型的逆转作用 | 第10-11页 |
| ·胚胎发育过程中逆转肿瘤的信号系统 | 第11-13页 |
| ·Nodal 信号的抑制因子lefty | 第12-13页 |
| ·lefty 用于肿瘤治疗的主要问题 | 第13页 |
| ·海藻酸钠微囊缓释系统 | 第13-16页 |
| ·细胞微囊化技术 | 第13-15页 |
| ·细胞微囊化与肿瘤治疗 | 第15-16页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-30页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·质粒载体 | 第17页 |
| ·实验中相关引物及序列 | 第17页 |
| ·细胞系、菌种及实验动物 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第19页 |
| ·主要分析软件 | 第19-20页 |
| ·培养基及其配制 | 第20页 |
| ·缓冲液及其他溶液的配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·Lefty1 重组体的构建 | 第20-22页 |
| ·Lefty2 重组体的构建 | 第22-24页 |
| ·细胞培养及转染 | 第24-26页 |
| ·蛋白获取及Lowry 法测蛋白浓度 | 第26-27页 |
| ·细胞蛋白Western Blotting 鉴定 | 第27-28页 |
| ·高压静电法制备海藻酸钠微囊 | 第28-29页 |
| ·ELISA 酶联免疫吸附试验 | 第29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 分泌LEFTY 的HEK293 工程化细胞的构建 | 第30-41页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·稳定表达lefty-1 的HEK293 细胞株的构建 | 第30-35页 |
| ·Lefty1 重组体的构建 | 第30-34页 |
| ·pCDNA3.1-LEFTY1 质粒的稳定转染和lefty-1 蛋白表达验证 | 第34-35页 |
| ·稳定表达lefty-2 的HEK293 细胞株的构建 | 第35-39页 |
| ·Lefty2 重组体的构建 | 第35-38页 |
| ·pIRES-GFP-LEFTY2 重组体的细胞稳定转染 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第4章 海藻酸钠微球的制备和用于包覆HEK293 细胞的研究 | 第41-47页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·高压静电法制备海藻酸钠微囊 | 第41-44页 |
| ·高压静电设备原理与制备 | 第41-43页 |
| ·电压对海藻酸盐微囊体直径影响 | 第43页 |
| ·明胶对海藻酸盐微囊体改性的研究 | 第43-44页 |
| ·海藻酸钠微囊包覆HEK293 细胞的研究 | 第44-45页 |
| ·微囊内HEK293 细胞活性研究 | 第44-45页 |
| ·微囊培养HEK293 细胞分泌lefty 的研究 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第5章 海藻酸钠微球包覆HEK293 细胞用于肿瘤影响的初步研究 | 第47-51页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·微囊体外缓释lefty 的检测 | 第47页 |
| ·微囊系统体内缓释的初步研究 | 第47-49页 |
| ·微囊化细胞分泌lefty 对细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
