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携带E1A-雄激素受体(AR)的膀胱肿瘤特异性溶瘤腺病毒的抗膀胱肿瘤研究

英文缩写索引第1-5页
中文摘要第5-7页
ABSTRACT第7-13页
前言第13-23页
第一部分 重组腺病毒的扩增及鉴定第23-35页
   ·实验材料第23-24页
     ·载体及细胞株第23页
     ·主要溶液的配制第23-24页
     ·主要仪器第24页
   ·实验方法第24-28页
     ·细胞的复苏、培养及冻存第24-25页
     ·重组腺病毒的扩增和纯化第25页
     ·重组腺病毒滴度的测定第25-26页
     ·重组腺病毒的鉴定第26-28页
   ·实验结果第28-32页
     ·细胞病变效应(CPE)第28页
     ·重组腺病毒的纯化第28-29页
     ·TCID50测定腺病毒滴度第29页
     ·重组腺病毒的鉴定第29-32页
   ·讨论第32-33页
     ·腺病毒载体系统第32-33页
     ·重组腺病毒的扩增和纯化第33页
     ·重组腺病毒的鉴定第33页
   ·结论第33-35页
第二部分 重组腺病毒的体外实验第35-55页
   ·实验材料第35-37页
     ·主要试剂和细胞株第35-36页
     ·主要溶液配制第36-37页
     ·主要仪器设备第37页
   ·实验方法第37-43页
     ·重组腺病毒对肿瘤细胞感染效率的测定第37页
     ·重组腺病毒抗膀胱肿瘤细胞增殖效应第37页
     ·R1881、氟他胺对重组腺病毒抗膀胱肿瘤细胞增殖效应的影响.第37-38页
     ·透射电镜观察第38页
     ·重组腺病毒对细胞生长周期的影响第38页
     ·Real-time PCR检测重组腺病毒目的基因的表达第38-40页
     ·免疫荧光染色观察CAR及AR的表达第40页
     ·Western blot检测重组腺病毒目的蛋白的表达第40-41页
     ·TUNEL检测细胞凋亡第41-42页
     ·Caspase3酶活性检测第42-43页
     ·统计学处理第43页
   ·实验结果第43-52页
     ·重组腺病毒对膀胱肿瘤细胞感染效率的测定第43-44页
     ·重组腺病毒抗增殖效应观察第44-45页
     ·R1881、氟他胺对重组腺病毒抗增殖效应的影响第45-46页
     ·免疫荧光染色观察CAR及AR的表达第46页
     ·透射电镜观察第46页
     ·重组腺病毒对细胞周期的影响第46-48页
     ·Caspase3酶活性检测第48-49页
     ·Real-time PCR检测目的基因的表达情况第49-50页
     ·Western blot检测目的蛋白的表达第50-52页
     ·TUNEL检测细胞凋亡第52页
   ·讨论第52-53页
     ·融合蛋白E1A-AR第52-53页
     ·重组腺病毒的体外杀伤效应第53页
     ·重组腺病毒体外诱导肿瘤细胞凋亡及肿瘤治疗策略第53页
   ·结论第53-55页
第三部分 重组腺病毒的体内实验研究第55-65页
   ·实验材料第55页
     ·实验动物第55页
     ·细胞准备及重组腺病毒第55页
     ·主要仪器设备第55页
     ·主要试剂第55页
   ·实验方法第55-58页
     ·重组腺病毒的扩增和EJ细胞的培养第56页
     ·裸鼠膀胱癌动物模型的建立第56页
     ·重组腺病毒体内抑制肿瘤实验第56页
     ·肿瘤细胞及主要脏器形态学观察第56页
     ·电镜观察肿瘤组织内病毒的分布第56-57页
     ·重组腺病毒目的基因在体内的表达情况第57-58页
     ·重组腺病毒目的蛋白E1A在体内的表达情况第58页
     ·透射电镜观察肿瘤组织中病毒颗粒第58页
     ·统计学处理第58页
   ·实验结果第58-62页
     ·荷瘤鼠肿瘤生长情况第58-60页
     ·肿瘤组织及重要组织脏器的病理学检查第60-61页
     ·肿瘤组织中E1A基因的表达第61页
     ·透射电镜结果第61-62页
   ·讨论第62-64页
     ·膀胱癌动物模型的建立第62-63页
     ·携带E1A-AR的重组腺病毒对膀胱移植瘤的作用第63-64页
   ·结论第64-65页
参考文献第65-81页
附件第81-82页
攻读学位期间成果第82-83页
致谢第83页

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