XPD相关蛋白在线粒体中的质谱分析
| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·背景及意义 | 第11-17页 |
| ·XPD在NER中的作用 | 第11-13页 |
| ·XPD与疾病 | 第13页 |
| ·XPD单核苷酸多态性与癌症 | 第13-15页 |
| ·XPD在染色体分离中的作用 | 第15页 |
| ·XPD可以定位于线粒体中 | 第15页 |
| ·XPD对线粒体功能的影响 | 第15-16页 |
| ·线粒体分离方法 | 第16-17页 |
| ·HSP70/HSP90 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17页 |
| ·研究方案 | 第17-20页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| ·研究路线 | 第18-19页 |
| ·研究方法 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·细胞株 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒载体 | 第20页 |
| ·抗体 | 第20页 |
| ·引物序列 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试剂配方 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·RNA提取 | 第24-25页 |
| ·逆转录 | 第25-26页 |
| ·基因扩增 | 第26-27页 |
| ·质粒构建 | 第27-29页 |
| ·细胞培养 | 第29-30页 |
| ·构建稳定细胞系 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第32-33页 |
| ·蛋白免疫共沉淀 | 第33-34页 |
| ·IP-LC/MS实验 | 第34页 |
| ·银染 | 第34-35页 |
| ·传统差速离心提取线粒体 | 第35-36页 |
| ·改进后差速离心提取线粒体 | 第36-37页 |
| ·Cytoscape软件的功能聚类分析 | 第37-38页 |
| 3 结果分析 | 第38-51页 |
| ·线粒体提取方法改进 | 第38-41页 |
| ·XPD稳定表达293F细胞系的构建 | 第41-42页 |
| ·免疫沉淀反应 | 第42-44页 |
| ·线粒体质谱蛋白质功能聚类分析 | 第44-45页 |
| ·线粒体质谱蛋白质筛选 | 第45-48页 |
| ·两次质谱结果比对 | 第45-47页 |
| ·线粒体蛋白质相关功能 | 第47页 |
| ·候选蛋白质的质谱结果 | 第47-48页 |
| ·HSP70,HSP90与XPD相互作用验证 | 第48-51页 |
| ·免疫共沉淀证明HSP70与XPD的相互作用 | 第48-49页 |
| ·免疫共沉淀证明XPD与HSP90的相互作用 | 第49-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 作者筒历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第55页 |
