基因Ⅶ型新城疫病毒F基因在家蚕杆状病毒表达系统的表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-7页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1 新城疫病毒研究现状 | 第8-12页 |
| ·NDV 的分类、形态结构及理化特性 | 第8-9页 |
| ·NDV 的生物学活性 | 第9页 |
| ·NDV 的复制机理 | 第9页 |
| ·毒力与致病性 | 第9-10页 |
| ·基因型的划分 | 第10页 |
| ·NDV 的蛋白结构和功能 | 第10-12页 |
| ·F 蛋白 | 第10-11页 |
| ·HN 蛋白 | 第11页 |
| ·M 蛋白 | 第11-12页 |
| ·NP 蛋白、P 蛋白、L 蛋白的结构与功能 | 第12页 |
| 2 新城疫疫苗研究进展 | 第12-14页 |
| ·常规疫苗 | 第12-13页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第12-13页 |
| ·灭活疫苗 | 第13页 |
| ·基因工程疫苗 | 第13-14页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第13页 |
| ·DNA 疫苗 | 第13-14页 |
| 3 家蚕杆状病毒表达系统 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒的生物学特性 | 第14页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的原理 | 第14-15页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统对外源基因的表达 | 第15页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 5 研究内容和方法 | 第16-17页 |
| ·NDV-F 基因检测抗体的制备 | 第16页 |
| ·NDV-F 基因在家蚕中的表达 | 第16-17页 |
| 第二章 新城疫病毒 F 基因的原核表达 | 第17-25页 |
| 1 材料与方法 | 第17-21页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器和设备 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-21页 |
| ·目的基因的合成 | 第17-18页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第18-20页 |
| ·表达产物存在形式检测 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第20页 |
| ·蛋白的质谱鉴定 | 第20页 |
| ·融合蛋白的大量诱导表达 | 第20页 |
| ·镍柱亲和层析纯化重组蛋白 | 第20页 |
| ·鼠源多克隆抗体的制备及分析 | 第20-21页 |
| ·酶联免疫法检测抗体效价 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-23页 |
| ·目的基因的扩增 | 第21页 |
| ·pMD-18T-NDV-F 的酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·重组质粒 pET-NDV-F 的鉴定 | 第22页 |
| ·重组蛋白的原核表达和纯化 | 第22页 |
| ·重组蛋白的质谱分析 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白的免疫原性分析 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 鸡新城疫病毒 F 基因的真核表达 | 第25-32页 |
| 1 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·目的基因的合成 | 第25-26页 |
| ·重组杆状病毒转移载体的构建 | 第26-27页 |
| ·构建、筛选携带 NDV-F 基因的重组杆状病毒 | 第27-28页 |
| ·共转染重组病毒在家蚕中的表达 | 第28页 |
| ·表达时相的测定 | 第28页 |
| ·重组蛋白的 Western 杂交检测 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| ·目的基因的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pVL-F 的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·重组杆状病毒的致病情况 | 第29页 |
| ·表达时相的测定 | 第29-30页 |
| ·蚕体表达蛋白的 Western blot 分析 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 全文结论 | 第32-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-39页 |
| 作者简介 | 第39-40页 |
| 导师简介 | 第40-41页 |
