| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-15页 |
| 1 前言 | 第8-9页 |
| 2 动物克隆技术 | 第9-10页 |
| 3 动物转基因技术 | 第10-11页 |
| 4 转基因克隆技术在家畜育种中的研究与应用 | 第11-12页 |
| 5 BAC介导的转基因方法 | 第12-13页 |
| 6 高繁殖力基因FSH简介 | 第13-14页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 研究正文 | 第15-41页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-29页 |
| ·实验材料 | 第15-20页 |
| ·质粒及菌株 | 第15页 |
| ·大白猪胎儿 | 第15-16页 |
| ·猪卵巢 | 第16页 |
| ·主要试剂及其配制和主要试剂盒 | 第16-17页 |
| ·显微操作针的制备 | 第17-19页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第19页 |
| ·主要引物信息 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·BAC-DNA的提取 | 第21页 |
| ·FSH α-loxp-Neo-loxp-BAC的构建 | 第21-23页 |
| ·胎儿成纤维细胞系建立 | 第23-24页 |
| ·成纤维细胞系的性别鉴定 | 第24页 |
| ·用FSH α-loxp-neo-loxp-BAC DNA转染猪胎儿成纤维细胞 | 第24页 |
| ·转基因阳性细胞的筛选 | 第24页 |
| ·阳性细胞的检测 | 第24-25页 |
| ·转基因克隆胚胎的获得 | 第25-28页 |
| ·胚胎的移植 | 第28-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-35页 |
| ·FSH α-BAC基因信息的确定 | 第29-30页 |
| ·FSHα-BAC-SW102菌株的获得 | 第30-31页 |
| ·含有-loxp-Neo-loxp-基因打靶载体的获得 | 第31页 |
| ·FSH α-loxp-neo-loxp-BAC SW102菌株的获得 | 第31-32页 |
| ·用于转基因的FSH α-loxp-neo-loxp-BAC载体的提取与鉴定 | 第32-33页 |
| ·待转染细胞的性别鉴定 | 第33-34页 |
| ·转FSH α-loxp-Neo-loxp-BAC细胞系的建立 | 第34页 |
| ·孤雌胚的体外发育情况 | 第34-35页 |
| ·移植妊娠受孕情况 | 第35页 |
| 4 分析与讨论 | 第35-41页 |
| ·关于转FSHα基因生产高繁殖力克隆猪 | 第35-36页 |
| ·BAC载体混合转染 | 第36页 |
| ·运用Spindle view纺锤体示核法系统去核操作的高成功率 | 第36-37页 |
| ·细胞性别鉴定的选择 | 第37页 |
| ·关于载体的构建 | 第37-38页 |
| ·插入的FSH α基因完整性的问题 | 第38页 |
| ·激活/融合参数对孤雌胚的影响 | 第38-39页 |
| ·关于孤雌胚胎的培养 | 第39-40页 |
| ·转基因克隆猪的鉴别 | 第40-41页 |
| 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
