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大豆异黄酮测定方法的优化及大豆F3H基因沉默表达载体的构建

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 绪论第10-31页
   ·大豆异黄酮概述第10-15页
     ·大豆异黄酮的来源及分布第10页
     ·大豆异黄酮的性质第10-12页
     ·大豆异黄酮的生理功能第12-15页
   ·大豆异黄酮提取测定方法概要第15-20页
     ·大豆异黄酮的提取第15-18页
     ·大豆异黄酮的含量测定第18-20页
   ·大豆异黄酮的合成途径及F3H的研究第20-23页
   ·反义RNA技术第23-26页
     ·反义RNA技术的作用机理第23-24页
     ·反义RNA技术的应用第24-26页
     ·反义表达载体的构建第26页
   ·RNA干扰技术第26-31页
     ·RNA干扰机制第27-28页
     ·植物RNA干扰载体第28-29页
     ·植物RNA干扰特点及应用第29-31页
第2章 大豆异黄酮提取-测定优化体系的建立第31-48页
   ·试剂与仪器第31-32页
     ·仪器第31-32页
     ·试剂与材料第32页
   ·试验内容与方法第32-35页
     ·原料液的制备第32页
     ·对照品溶液的制备第32-33页
     ·测定方法第33页
     ·单因素试验第33页
     ·正交试验第33页
     ·方法学考察第33-34页
     ·大豆异黄酮含量分析第34页
     ·高效液相法(HPLC)测定大豆异黄酮含量方法第34-35页
     ·高效液相法(HPLC)与三波长法测定大豆异黄酮含量比较第35页
   ·试验结果及讨论第35-46页
     ·单因素试验第35-40页
     ·试验各因素水平的确定第40-41页
     ·正交试验结果分析第41-42页
     ·方法学考察第42-44页
     ·不同大豆品种异黄酮含量测定第44-45页
     ·高效液相法(HPLC)标准曲线第45页
     ·两种方法测定的大豆异黄酮含量比较第45-46页
   ·本章小结第46-48页
第3章 反义和RNA干扰表达载体构建第48-56页
   ·材料第48-50页
     ·植物材料第48页
     ·质粒和菌种第48页
     ·试验试剂第48页
     ·试验仪器第48-49页
     ·培养基和溶液配方第49-50页
   ·方法第50-56页
     ·PCR扩增所用引物列表第50页
     ·植物总RNA的提取(TRIzol法)第50-51页
     ·cDNA的合成第51页
     ·PCR克隆目的片段第51-52页
     ·目的片段的电泳回收第52页
     ·pMD18-T载体与目的DNA的连接第52-53页
     ·大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备第53页
     ·大肠杆菌感受态细胞DH5α的转化(热激法)第53-54页
     ·质粒的少量提取与鉴定(碱法)第54-55页
     ·重组质粒的酶切鉴定第55-56页
第4章 F3H基因反义和RNA干扰表达载体构建结果第56-67页
   ·反义载体构建第56-60页
     ·大豆叶片总RNA提取第56页
     ·目的片段克隆第56-58页
     ·F3H反义表达载体的构建与鉴定第58-60页
   ·RNA干扰表达载体构建第60-65页
     ·克隆目的基因第60-61页
     ·RNA干扰表达元件分别连T载体测序第61-62页
     ·pMD18-T-F3H-RNAi载体的构建内含子第62-64页
     ·pBI121-F3H-RNAi表达载体的构建第64-65页
   ·讨论第65-67页
参考文献第67-78页
作者简介及在学期间所获得的科研成果第78-79页
致谢第79页

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