犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法和胶体金免疫层析试纸条的研究
| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1. 引言 | 第16-28页 |
| ·病原学 | 第16-18页 |
| ·形态特征 | 第16页 |
| ·理化性质 | 第16-17页 |
| ·培养特性 | 第17页 |
| ·CDV 宿主和病毒毒株 | 第17-18页 |
| ·基因组结构和功能 | 第18-21页 |
| ·基因组 RNA | 第18页 |
| ·核衣壳蛋白 | 第18-19页 |
| ·磷蛋白 | 第19页 |
| ·基质膜蛋白 | 第19-20页 |
| ·融合蛋白 | 第20页 |
| ·附着蛋白 | 第20页 |
| ·大分子蛋白质 | 第20-21页 |
| ·流行病学 | 第21-22页 |
| ·致病机理 | 第21页 |
| ·临床症状和病理学研究 | 第21-22页 |
| ·诊断技术 | 第22-25页 |
| ·包涵体检查 | 第22页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第22-23页 |
| ·免疫学检测方法 | 第23-24页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第24-25页 |
| ·防控与治疗 | 第25-27页 |
| ·CD 防控 | 第25-26页 |
| ·治疗 | 第26-27页 |
| ·本研究的意义 | 第27-28页 |
| 2. 材料 | 第28-30页 |
| ·主要试剂和溶液配制 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·溶液配制 | 第28-29页 |
| ·病毒、细胞和动物 | 第29-30页 |
| 3 方法 | 第30-41页 |
| ·犬瘟热单克隆抗体制备 | 第30-35页 |
| ·CDV 抗原制备 | 第30页 |
| ·动物免疫 | 第30页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞的制备 | 第30页 |
| ·饲养细胞制备 | 第30-31页 |
| ·细胞融合 | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞株筛选 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞克隆化 | 第32页 |
| ·MAb 的特异性鉴定 | 第32-33页 |
| ·腹水制备 | 第33页 |
| ·MAb 效价与亚类测定 | 第33-34页 |
| ·腹水纯化 | 第34页 |
| ·中和试验 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数 | 第34-35页 |
| ·单抗夹心 ELISA 检测方法建立 | 第35-37页 |
| ·MAb 抗原表位分析 | 第35页 |
| ·MAb 的标记 | 第35页 |
| ·捕获抗体和酶标抗体的确定 | 第35-36页 |
| ·单抗夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第36-37页 |
| ·ELISA 方法特异性试验 | 第37页 |
| ·ELISA 方法敏感性试验 | 第37页 |
| ·ELISA 方法重复性试验 | 第37页 |
| ·临床样品检测 | 第37页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的研制 | 第37-41页 |
| ·器材处理 | 第37-38页 |
| ·柠檬三钠还原法制备胶体金 | 第38页 |
| ·胶体金标记抗体的制备 | 第38-39页 |
| ·金标抗体玻璃纤维素膜的制备 | 第39页 |
| ·硝酸纤维素膜的制备 | 第39页 |
| ·样品垫预处理 | 第39页 |
| ·胶体金试纸条的组装 | 第39-40页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条特异性试验 | 第40页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条敏感性试验 | 第40页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条重复性试验 | 第40-41页 |
| 4. 结果 | 第41-51页 |
| ·犬瘟热单克隆抗体制备 | 第41-44页 |
| ·CDV 抗原纯化 | 第41页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第41页 |
| ·单克隆抗体效价测定与亚类鉴定 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体特异性 | 第42-43页 |
| ·腹水纯化 | 第43页 |
| ·中和试验 | 第43页 |
| ·细胞染色体计数 | 第43-44页 |
| ·单抗夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第44-48页 |
| ·单克隆抗体抗原表位分析 | 第44页 |
| ·捕获抗体和酶标抗体的确定 | 第44-45页 |
| ·单抗夹心 ELISA 检测方法建立 | 第45-47页 |
| ·特异性试验 | 第47页 |
| ·敏感性试验 | 第47页 |
| ·重复性试验 | 第47-48页 |
| ·临床样品的检测 | 第48页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的研制 | 第48-51页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第48页 |
| ·胶体金标记抗体的最佳 PH | 第48-49页 |
| ·胶体金标记抗体最适蛋白浓度 | 第49页 |
| ·胶体金免疫层析检测方法的建立 | 第49页 |
| ·胶体金试纸条特异性 | 第49-50页 |
| ·胶体金试纸条敏感性 | 第50-51页 |
| ·胶体金试纸条重复性 | 第51页 |
| 5. 讨论 | 第51-55页 |
| ·犬瘟热 MAb 的体制备 | 第51-52页 |
| ·单抗夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第52-53页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的研制 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 个人简介 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第66页 |
