| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第一章 人血清白蛋白的研究概况 | 第15-35页 |
| ·人血清白蛋白概述 | 第15-16页 |
| ·人血清白蛋白基因 | 第16-17页 |
| ·人血清白蛋白转录本 | 第17-18页 |
| ·人血清白蛋白的结构 | 第18-19页 |
| ·人血清白蛋白的新陈代谢 | 第19-21页 |
| ·人血清白蛋白的功能 | 第21-23页 |
| ·对胶体渗透压的作用 | 第21页 |
| ·结合和运输作用 | 第21-22页 |
| ·抗氧化剂作用 | 第22页 |
| ·循环作用 | 第22页 |
| ·毛细血管膜通透性 | 第22页 |
| ·神经保护作用 | 第22-23页 |
| ·人血清白蛋白功能存在着性别差异 | 第23页 |
| ·人血清白蛋白与疾病 | 第23-27页 |
| ·血清白蛋白缺乏症 | 第23-24页 |
| ·家族性白蛋白异常高甲状腺素血症和家族性白蛋白异常高三碘甲状腺氨酸血症综合征 | 第24页 |
| ·家族性的高血锌症 | 第24页 |
| ·白蛋白氧化和人类的健康 | 第24-25页 |
| ·人血清白蛋白作为疾病的生物标记 | 第25-27页 |
| ·人血清白蛋白的应用 | 第27-32页 |
| ·人血清白蛋白在生物医学中的应用 | 第27-29页 |
| ·人血清白蛋白在生物技术中的应用 | 第29-32页 |
| ·重组人血清白蛋白 | 第32-34页 |
| ·重组人血清白蛋白的商业化概况 | 第32页 |
| ·重组人血清白蛋白生产研究概况 | 第32-34页 |
| ·总结和展望 | 第34-35页 |
| 第二章 动物乳腺生物反应器研究概况 | 第35-46页 |
| ·乳腺生物反应器研究现状 | 第35-36页 |
| ·解决的方法 | 第36-45页 |
| ·启动子的优化 | 第36-37页 |
| ·绝缘子的应用 | 第37-39页 |
| ·基因打靶技术 | 第39-45页 |
| ·总结和展望 | 第45-46页 |
| 第三章 HSA 基因的扩增和功能验证 | 第46-57页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·组织和细胞 | 第46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46页 |
| ·主要的实验试剂 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·人血清白蛋白微基因的扩增和功能验证 | 第47-49页 |
| ·结果 | 第49-55页 |
| ·HSA 基因的扩增 | 第49-51页 |
| ·HSA 基因的功能验证 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 调控元件的基因扩增和功能验证 | 第57-72页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·血液和细胞 | 第57页 |
| ·菌株和质粒 | 第57页 |
| ·主要的实验试剂 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-64页 |
| ·牛β-酪蛋白启动子基因的扩增和功能验证 | 第58-59页 |
| ·绝缘子基因的扩增及功能验证 | 第59-61页 |
| ·LoxP 功能验证 | 第61-62页 |
| ·AttB 位点序列功能验证 | 第62-64页 |
| ·牛生长激素 polyA (BGHpolyA) 序列的扩增和功能验证 | 第64页 |
| ·数据统计分析 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-69页 |
| ·牛β-酪蛋白启动子的基因扩增和功能验证 | 第64-66页 |
| ·绝缘子基因的扩增及功能验证 | 第66页 |
| ·LoxP 序列功能验证 | 第66-67页 |
| ·attB 序列功能验证 | 第67-68页 |
| ·BGHpolyA 基因扩增与功能验证 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 人血清白蛋白牛乳腺特异性表达载体的构建和优化 | 第72-92页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·菌株和质粒 | 第72页 |
| ·主要的实验试剂 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-77页 |
| ·牛乳腺特异性表达载体的构建 | 第73页 |
| ·HSA 牛乳腺特异性表达载体的构建 | 第73页 |
| ·细胞的培养 | 第73-75页 |
| ·细胞转染和阳性单克隆细胞的筛选 | 第75页 |
| ·阳性克隆细胞中 HSA 基因的 PCR 检测 | 第75页 |
| ·基因整合位点的检测 | 第75-76页 |
| ·HSA 的表达检测 | 第76-77页 |
| ·数据统计分析 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-89页 |
| ·牛乳腺特异性表达载体的构建 | 第77-79页 |
| ·HSA 牛乳腺特异性表达载体的构建 | 第79-80页 |
| ·BMEC 特性检测结果 | 第80-81页 |
| ·BMECs 的 G418 筛选浓度 | 第81-82页 |
| ·单克隆细胞的鉴定 | 第82-86页 |
| ·HSA 基因表达检测 | 第86-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第六章 phiC31 整合酶介导 HSA 在小鼠乳腺中的表达 | 第92-106页 |
| ·材料和试剂 | 第92-93页 |
| ·细胞和动物 | 第92页 |
| ·质粒 | 第92页 |
| ·仪器和试剂 | 第92-93页 |
| ·方法 | 第93-96页 |
| ·质粒的准备 | 第93页 |
| ·细胞的培养和转染 | 第93页 |
| ·转染的 HC11 细胞中基因整合位点“mpsL1”的检测 | 第93-94页 |
| ·小鼠的准备 | 第94页 |
| ·小鼠乳腺注射和电转 | 第94页 |
| ·实时定量 PCR | 第94-95页 |
| ·HSA 蛋白表达的 western-blotting 和酶联免疫吸附实验检测 | 第95页 |
| ·外源基因在小鼠乳腺中的整合分析 | 第95页 |
| ·数据统计分析 | 第95-96页 |
| ·结果 | 第96-103页 |
| ·外源基因于 HC11 细胞基因组中 mpsL1 位点的整合检测结果 | 第96-97页 |
| ·HC11 细胞中检测 phiC31 整合酶对 HSA 表达水平的影响 | 第97-98页 |
| ·电转参数对小鼠乳腺中 HSA 表达水平的影响 | 第98-100页 |
| ·phiC31 整合酶对 HSA 在小鼠乳腺中表达水平的影响 | 第100页 |
| ·小鼠乳腺中质粒拷贝数的检测结果 | 第100-102页 |
| ·外源基因在小鼠乳腺基因组中 mpsL1 位点整合的检测 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-105页 |
| ·小结 | 第105-106页 |
| 第七章 人血清白蛋白转基因牛的制备与检测 | 第106-121页 |
| ·材料和试剂 | 第106页 |
| ·材料 | 第106页 |
| ·试剂 | 第106页 |
| ·方法 | 第106-110页 |
| ·转 HSA 基因的阳性克隆细胞的构建和鉴定 | 第106-107页 |
| ·转 HSA 基因克隆胚的构建 | 第107-108页 |
| ·转 HSA 基因克隆牛的制备 | 第108页 |
| ·转 HSA 基因牛的检测 | 第108-110页 |
| ·结果 | 第110-119页 |
| ·细胞基因组中外源基因的检测 | 第110-113页 |
| ·供核细胞染色体数分析 | 第113-114页 |
| ·转基因重构胚的鉴定 | 第114-115页 |
| ·转基因克隆牛的鉴定 | 第115-119页 |
| ·讨论 | 第119-120页 |
| ·小结 | 第120-121页 |
| 全文结论 | 第121-122页 |
| 创新之处和进一步的研究课题 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-138页 |
| 附录 | 第138-143页 |
| 缩略词 | 第143-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 作者简介 | 第146页 |
