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低强度脉冲超声优化组织工程化软骨的构建及其修复关节软骨缺损的实验研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
英汉缩略语名词对照第12-13页
前言第13-15页
第一部分 兔膝关节软骨细胞的原代培养及鉴定第15-23页
 1 实验目的第15页
 2 实验材料第15-16页
   ·实验动物第15页
   ·主要实验器械第15页
   ·实验耗材与仪器第15页
   ·主要试剂及药物第15-16页
   ·主要试剂的配制第16页
 3 实验方法及步骤第16-18页
   ·软骨细胞的体外分离及培养第16-17页
   ·软骨细胞的传代培养第17页
   ·软骨细胞的冻存第17页
   ·软骨细胞形态学观察及功能学特性的鉴定第17-18页
     ·软骨细胞的镜下观察第17页
     ·细胞爬片的制备第17-18页
     ·甲苯胺蓝染色第18页
     ·Ⅱ型胶原免疫组化染色第18页
 4 结果第18-19页
   ·倒置显微镜下观察第18-19页
   ·软骨细胞功能学特性的鉴定第19页
     ·甲苯胺蓝染色第19页
     ·Ⅱ型胶原免疫组织化学第19页
 5 讨论第19-20页
   ·关节软骨缺损修复的种子细胞第19-20页
   ·软骨细胞的分离方法第20页
   ·软骨细胞的体外培养第20页
 6 结论第20-21页
 附图第21-23页
第二部分 软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物的配制及优化凝胶复合物的最佳超声参数筛选第23-33页
 1 实验目的第23页
 2 实验材料第23-24页
   ·种子细胞第23页
   ·主要实验器械第23页
   ·实验耗材与仪器第23页
   ·主要试剂及药物第23-24页
   ·主要试剂的配制第24页
 3 实验方法及步骤第24-25页
   ·制备藻酸钠/软骨细胞悬液第24页
   ·制备圆柱形软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物第24-25页
   ·筛选最佳超声参数改良软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物第25页
 4 主要检测指标第25页
   ·CCK-8检测软骨细胞数量第25页
   ·免疫组化检测软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达量第25页
 5 统计学处理第25-26页
 6 结果第26-28页
   ·CCK-8检测不同组别凝胶内软骨细胞数量第26页
   ·免疫组化检测不同组别凝胶中软骨细胞Ⅱ型胶原表达情况第26-28页
 7 讨论第28-30页
   ·三维培养的意义第28页
   ·三维培养的支架材料第28页
   ·构建组织工程化软骨的种子细胞浓度第28-29页
   ·超声优化软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物的构建第29-30页
 8 结论第30-31页
 附图第31-33页
第三部分 经超声优化的软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物修复兔膝关节软骨缺损第33-46页
 1 实验目的第33页
 2 实验材料第33-34页
   ·实验动物第33页
   ·主要实验器械第33页
   ·实验耗材与仪器第33页
   ·主要试剂及药物第33-34页
   ·主要试剂的配制第34页
 3 实验方法及步骤第34-35页
   ·软骨细胞/藻酸钙凝胶复合物的制备及超声干预第34页
   ·制造兔膝关节软骨缺损模型第34-35页
   ·实验分组第35页
 4 主要观察指标第35-37页
   ·一般情况观察第35页
   ·修复组织的大体观察第35页
   ·修复组织的组织学观察第35-36页
     ·标本的HE染色第35页
     ·番红O染色第35-36页
     ·Ⅱ型胶原免疫组织化学第36页
   ·组织学评分第36-37页
 5 统计学处理第37页
 6 结果第37-39页
   ·一般情况观察第37页
   ·修复组织大体观察第37-38页
   ·修复组织的组织学观察第38页
   ·组织学评分第38-39页
 7 讨论第39-41页
   ·实验动物麻醉剂的选择及模型的制备第39-40页
   ·软骨损伤的中医药治疗第40页
   ·LIPUS的类生长因子作用第40-41页
 8 结论第41-42页
 附图第42-46页
参考文献第46-50页
第四部分 结论与展望第50-51页
 1 结论第50页
 2 展望第50-51页
综述第51-57页
 参考文献第54-57页
攻读硕士期间获得的研究成果第57-58页
致谢第58页

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