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布鲁氏菌S2308的Asly缺失株构建及其生物学特性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
插图与附表清单第9-10页
主要符号表第10-11页
综述第11-22页
引言第22-23页
1 材料与方法第23-36页
   ·菌株、质粒及试验动物第23页
   ·主要试验试剂与仪器第23-24页
   ·主要试剂配制第24页
   ·Asly单克隆抗体的制备及鉴定第24-28页
   ·S2308ΔAsly缺失株的构建第28-31页
   ·RT-PCR检测MΦ中细胞因子转录水平第31-33页
   ·RT-PCR检测S2308及S2308ΔAsly毒力基因的转录水平第33-34页
   ·S2308和S2308ΔAsly的生长曲线及其致病性作用第34-36页
2 结果与分析第36-48页
   ·Asly单克隆抗体的制备及鉴定第36-39页
     ·pET28a-Asly重组载体的构建第36-37页
     ·目的基因的诱导表达及Westernblot分析第37页
     ·间接ELISA方法检测免疫小鼠效价第37页
     ·单克隆抗体的鉴定与分析第37-39页
   ·S2308ΔAsly缺失株的构建第39-41页
     ·S2308ΔAsly缺失株自杀性载体构建第39-40页
     ·S2308ΔAsly缺失株的构建第40-41页
   ·RT-PCR检测MΦ中细胞因子转录水平第41-44页
     ·MΦ中细胞因子基因片段的扩增与重组质粒的构建第41-42页
     ·MΦ中细胞因子引物特异性鉴定第42-43页
     ·标准曲线的建立第43-44页
     ·S2308和S2308ΔAsly侵染MΦ后CKsRT检测结果第44页
   ·RT-PCR检测S2308及S2308ΔAsly毒力基因的转录水平第44-45页
     ·毒力因子基因标准曲线的建立第44-45页
     ·不同菌株毒力基因的转录水平第45页
   ·S2308和S2308ΔAsly的生长曲线及其致病性作用第45-48页
     ·S2308和S2308ΔAsly的生长曲线第45-46页
     ·S2308和S2308ΔAsly的致病性分析第46-48页
3 讨论第48-51页
   ·Asly单克隆抗体的制备第48页
   ·S2308ΔAsly缺失株的构建第48-49页
   ·RT-PCR检测MΦ中细胞因子转录水平第49-50页
   ·S2308和S2308ΔAsly的生长曲线及其致病性作用第50-51页
4 结论第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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