| 致谢 | 第1-4页 |
| 前言 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文中所用的英文缩略词 | 第10-15页 |
| (一) 大鼠脑撖血管内皮细胞的分离培养和鉴定 | 第15-20页 |
| ·材料与试剂 | 第15-17页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要试剂的配制 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-18页 |
| ·脑微血管段分离 | 第17页 |
| ·RCMECS培养 | 第17页 |
| ·鼠尾胶包被 | 第17页 |
| ·RCMECS接种培养 | 第17页 |
| ·RCMECS传代培养 | 第17页 |
| ·细胞形态观察 | 第17页 |
| ·参考文献进行内皮细胞CD31免疫荧光鉴定 | 第17-18页 |
| ·细胞生长曲线 | 第18页 |
| ·结果 | 第18-20页 |
| ·RCMECS形态特征 | 第18-19页 |
| ·RCMECS CD31免疫荧光鉴定 | 第19页 |
| ·细胞生长曲线 | 第19-20页 |
| ·小结 | 第20页 |
| (二) TNF-a对RCMECS H/R模型VEGF，MMP-2蛋白表达影响 | 第20-32页 |
| ·材料和试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要试剂配制 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·TNF-α对RCMECS活性影响 | 第21-22页 |
| ·分组 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22页 |
| ·统计学处理 | 第22页 |
| ·建立RCMECS H/R模型 | 第22页 |
| ·自制缺氧小室 | 第22-23页 |
| ·ELISA检测TNF-α对H/R RCMECS VEGF表达影响 | 第23-25页 |
| ·分组 | 第23页 |
| ·方法 | 第23页 |
| ·VEGF ELISA标准曲线的制作及各组蛋白含量测定 | 第23-25页 |
| ·应用ELISA法检测TNF-α对H/R后RCMECS分泌MMP-2蛋白表达 | 第25页 |
| ·分组 | 第25页 |
| ·方法 | 第25页 |
| ·ELISA | 第25页 |
| ·测定自分泌TNF-α对H/R RCMECS上清中VEGF、MMP-2表达影响 | 第25页 |
| ·分组 | 第25页 |
| ·方法 | 第25页 |
| ·细胞自分泌VEGF、MMP-2 ELISA | 第25页 |
| ·统计学处理数据 | 第25页 |
| ·qRT-PCR检测TNF-α对H/R RCMECS VEGF、MMP-2mRNA表达影响 | 第25-28页 |
| ·实验分组 | 第26页 |
| ·方法 | 第26页 |
| ·qRT-PCR | 第26-28页 |
| ·统计学分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·MTT测定TNF-α对RCMECS活性的影响 | 第28页 |
| ·RCMECS在H/R模型中VEGF蛋白表达受TNF-α影响情况 | 第28-29页 |
| ·RCMECS在H/R模型中MMP-2蛋白表达受TNF-α影响情况 | 第29-30页 |
| ·RCMECS自分泌TNF-α对H/R RCMECS上清液中VEGF、MMP-2蛋白水平影响 | 第30-31页 |
| ·TNF-α对RCMECSH/R模型VEGF、MMP-2 mRNA表达影响 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| (三) TNF-(x促进大鼠脑中动脉缺血再灌注模型血管生成 | 第32-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第32-33页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-36页 |
| ·溶液配制 | 第33页 |
| ·实验分组 | 第33页 |
| ·大脑皮质注射TNF-α | 第33-34页 |
| ·大鼠MCAO再灌注模型 | 第34页 |
| ·神经功能评分 | 第34页 |
| ·2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色 | 第34页 |
| ·异硫氰酸标记的葡聚糖微血管密度评价 | 第34-35页 |
| ·冰冻切片制作及免疫组化 | 第35-36页 |
| ·冰冻切片 | 第35页 |
| ·免疫组织化学测定大鼠缺血灶及周围组织VEGF、MMP-2蛋白水平 | 第35-36页 |
| ·方法和步骤 | 第35-36页 |
| ·lmage-pro-plus(IPP)软件统计分析图 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-42页 |
| ·TTC显色 | 第36页 |
| ·TNF-α对MCAO再灌注术后血管新生影响 | 第36-38页 |
| ·免疫组化表达 | 第38-42页 |
| ·免疫组化分析皮质区梗死灶周围VEGF,MMP-2蛋白表达,检测位置 | 第38页 |
| ·免疫组化测VEGF、MMP-2表达 | 第38-42页 |
| (四) 讨论 | 第42-48页 |
| ·RCMECS培养与建立大鼠缺氧复氧模型 | 第42-44页 |
| ·MMT测TNF-α对RCMECS活性影响 | 第44页 |
| ·TNF-α对H/R模型RCMECS VEGF mRNA、蛋白的影响 | 第44-45页 |
| ·TNF-α对H/R模型RCMECS MMP-2 mRNA、蛋白的影响 | 第45-46页 |
| ·实验动物模型的特点 | 第46-47页 |
| ·TNF-α与梗死后血管的增生 | 第47-48页 |
| (五) 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 综述 | 第54-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读硕士期间主要科研成果 | 第61页 |
