摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
中文详细摘要 | 第9-11页 |
英文详细摘要 | 第11-14页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
前言 | 第15-20页 |
参考文献 | 第17-20页 |
第一部分 TGF-β1 对细胞外基质分泌和 KLF15 表达的影响 | 第20-44页 |
一、 材料与方法 | 第20-34页 |
(一) 材料 | 第20-22页 |
1、 细胞系 | 第20-21页 |
2、 主要试剂 | 第21页 |
3、 主要耗材和仪器 | 第21-22页 |
(二) 方法 | 第22-34页 |
1、 大鼠肾脏间质成纤维细胞培养和干预 | 第22页 |
2、 实时定量 PCR | 第22-24页 |
3、 KLF15 质粒扩增 | 第24-25页 |
4、 小鼠 KLF15 基因腺病毒包装 | 第25-31页 |
5、 腺病毒感染 NRK-49F 细胞的最佳 MOI 值摸索 | 第31页 |
6、大鼠肾脏间质成纤维细胞(NRK-49F)腺病毒感染 | 第31-32页 |
7、 Western blot 检测 NRK-49F 细胞的 KLF15 和 CTGF 蛋白表达量 | 第32-33页 |
8、 ELSA 法检测细胞上清液纤维连接蛋白和Ⅲ型胶原的表达 | 第33-34页 |
9、 统计学处理 | 第34页 |
二、 结果 | 第34-40页 |
(一) TGF-β1 对大鼠肾脏间质成纤维细胞(NRK-49F)细胞外基质及 KLF15 的影响 | 第34-36页 |
(二) 过表达 KLF15 及过表达后给予 TGF-β1 干预对细胞外基质分泌的影响 | 第36-40页 |
三、 讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
第二部分 TGF-β1 调控 KLF15 的机制研究 | 第44-60页 |
一、 材料与方法 | 第45-50页 |
(一) 材料 | 第45-46页 |
1、 细胞系 | 第45页 |
2、 主要试剂 | 第45页 |
3、 主要耗材和仪器 | 第45-46页 |
(二) 方法 | 第46-50页 |
1、 大鼠间质成纤维细胞(NRK-49F)培养和干预 | 第46页 |
2、 实时定量 PCR | 第46-49页 |
3、 Western blot | 第49-50页 |
4、 统计学方法 | 第50页 |
二、 结果 | 第50-56页 |
(一) 给予 ERK/MAPK 特异性阻滞剂预处理后 TGF-β1 干预 NRK-49F后 ERK 磷酸化水平、细胞外基质分泌和 KLF15 变化 | 第50-52页 |
(二) 给予 JNK/MAPK 特异性阻滞剂预处理后 TGF-β1 干预 NRK-49F 44后 JNK 磷酸化水平、细胞外基质分泌和 KLF15 变化 | 第52-54页 |
(三) 给予 P38/MAPK 特异性阻滞剂预处理后 TGF-β1 干预 NRK-49F 46后 JNK 磷酸化水平、细胞外基质分泌和 KLF15 变化 | 第54-56页 |
三、 讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
全文总结 | 第60-61页 |
综述 | 第61-67页 |
参考文献 | 第64-67页 |
在读期间完成和发表的文章 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |