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海南山栏稻HKT2基因的克隆与功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 文献综述第9-23页
   ·盐胁迫对作物的影响第9-10页
     ·盐胁迫对作物生长及形态结构的影响第9-10页
     ·盐胁迫对作物生理生化及代谢的影响第10页
   ·作物的耐盐机理第10-15页
     ·离子区域化第11-12页
     ·渗透调节第12-13页
     ·拒盐与离子的选择吸收第13页
     ·抗氧化防御体系第13-14页
     ·渗调蛋白第14-15页
   ·植物HKT的概述第15-20页
     ·植物HKT的发现第15页
     ·植物HKT转运蛋白分类第15-16页
     ·植物HKT转运蛋白的结构与功能第16-18页
     ·植物HKT基因的定位与时空表达第18-20页
   ·实验采用的技术手段第20-21页
     ·基因克隆技术第20页
     ·过量表达技术第20-21页
     ·亚细胞定位技术第21页
   ·实验研究目的第21-22页
   ·技术路线第22-23页
2 实验材料与方法第23-44页
   ·实验材料与试剂第23-25页
     ·植物材料第23页
     ·微藻材料第23页
     ·实验仪器第23页
     ·大肠杆菌菌株和实验载体第23页
     ·实验试剂和实验所用培养基第23-25页
   ·试验方法与步骤第25-44页
     ·山栏稻HKT2基因的克隆第25-30页
     ·山栏稻HKT2基因的生物信息学分析第30页
     ·山栏稻HKT2基因过量表达载体的构建第30-34页
     ·山栏稻HKT2基因亚细胞定位载体的构建第34页
     ·莱茵衣藻玻璃珠转化法及转化子的筛选第34-36页
     ·莱茵衣藻CC124转化子的检测第36-38页
     ·野生型莱茵衣藻CC124酶活测定第38-43页
     ·野生型莱茵衣藻CC124以及转化株耐盐性测定第43页
     ·HKT2基因表达产物在莱茵衣藻中的亚细胞定位第43-44页
3 实验结果与分析第44-62页
   ·山栏稻HKT2基因全长的克隆第44-47页
     ·总RNA的提取与检测第44页
     ·RT—PCR扩增第44-45页
     ·PCR产物的鉴定第45页
     ·测序结果与序列分析第45-47页
   ·HKT2基因的生物信息学分析第47-52页
     ·ShuHKT2基因编码蛋白的理化性质第47页
     ·ShuHKT2的跨膜结构分析第47-49页
     ·ShuHKT2的亲/疏水性分析第49页
     ·ShuHKT2二级结构分析第49-50页
     ·ShuHKT2结构功能域的分析第50页
     ·HKT2基因多序列比对及进化分析第50-52页
   ·山栏稻ShuHKT2基因过量表达载体和细胞定位载体的构建第52-54页
   ·ShuHKT2基因过量表达载体转化于莱茵衣藻CC124第54-56页
     ·莱茵衣藻CC124转化子的筛选第54-55页
     ·莱茵衣藻CC124转化子的检测第55页
     ·Realtime PCR检测RNA表达量第55-56页
   ·野生型莱茵衣藻CC124酶活测定第56-59页
     ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 SOD活性测定第56-57页
     ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 POD活性测定第57页
     ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 MDA含量测定第57-58页
     ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124可溶性蛋白含量的测定第58页
     ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124脯氨酸含量的测定第58-59页
   ·野生型莱茵衣藻CC124耐盐性测定第59-60页
     ·野生型莱茵衣藻CC124藻液OD490与细胞密度的相关性第59页
     ·野生型莱茵衣藻CC124耐盐性测定第59-60页
   ·莱茵衣藻CC124转化株耐盐性测定第60-61页
   ·ShuHKT2基因在莱茵衣藻中的亚细胞定位第61-62页
4 讨论第62-66页
   ·ShuHKT2基因的克隆与生物信息学分析第62-63页
   ·ShuHKT2基因在莱茵衣藻CC124中的过量表达第63页
   ·莱茵衣藻CC124酶活的测定第63-64页
   ·莱茵衣藻CC124以及转化株耐盐性鉴定第64-65页
   ·ShuHKT2基因表达产物的亚细胞定位第65-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-72页
致谢第72页

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