| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-23页 |
| ·盐胁迫对作物的影响 | 第9-10页 |
| ·盐胁迫对作物生长及形态结构的影响 | 第9-10页 |
| ·盐胁迫对作物生理生化及代谢的影响 | 第10页 |
| ·作物的耐盐机理 | 第10-15页 |
| ·离子区域化 | 第11-12页 |
| ·渗透调节 | 第12-13页 |
| ·拒盐与离子的选择吸收 | 第13页 |
| ·抗氧化防御体系 | 第13-14页 |
| ·渗调蛋白 | 第14-15页 |
| ·植物HKT的概述 | 第15-20页 |
| ·植物HKT的发现 | 第15页 |
| ·植物HKT转运蛋白分类 | 第15-16页 |
| ·植物HKT转运蛋白的结构与功能 | 第16-18页 |
| ·植物HKT基因的定位与时空表达 | 第18-20页 |
| ·实验采用的技术手段 | 第20-21页 |
| ·基因克隆技术 | 第20页 |
| ·过量表达技术 | 第20-21页 |
| ·亚细胞定位技术 | 第21页 |
| ·实验研究目的 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-44页 |
| ·实验材料与试剂 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·微藻材料 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·大肠杆菌菌株和实验载体 | 第23页 |
| ·实验试剂和实验所用培养基 | 第23-25页 |
| ·试验方法与步骤 | 第25-44页 |
| ·山栏稻HKT2基因的克隆 | 第25-30页 |
| ·山栏稻HKT2基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| ·山栏稻HKT2基因过量表达载体的构建 | 第30-34页 |
| ·山栏稻HKT2基因亚细胞定位载体的构建 | 第34页 |
| ·莱茵衣藻玻璃珠转化法及转化子的筛选 | 第34-36页 |
| ·莱茵衣藻CC124转化子的检测 | 第36-38页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124酶活测定 | 第38-43页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124以及转化株耐盐性测定 | 第43页 |
| ·HKT2基因表达产物在莱茵衣藻中的亚细胞定位 | 第43-44页 |
| 3 实验结果与分析 | 第44-62页 |
| ·山栏稻HKT2基因全长的克隆 | 第44-47页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第44页 |
| ·RT—PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第45页 |
| ·测序结果与序列分析 | 第45-47页 |
| ·HKT2基因的生物信息学分析 | 第47-52页 |
| ·ShuHKT2基因编码蛋白的理化性质 | 第47页 |
| ·ShuHKT2的跨膜结构分析 | 第47-49页 |
| ·ShuHKT2的亲/疏水性分析 | 第49页 |
| ·ShuHKT2二级结构分析 | 第49-50页 |
| ·ShuHKT2结构功能域的分析 | 第50页 |
| ·HKT2基因多序列比对及进化分析 | 第50-52页 |
| ·山栏稻ShuHKT2基因过量表达载体和细胞定位载体的构建 | 第52-54页 |
| ·ShuHKT2基因过量表达载体转化于莱茵衣藻CC124 | 第54-56页 |
| ·莱茵衣藻CC124转化子的筛选 | 第54-55页 |
| ·莱茵衣藻CC124转化子的检测 | 第55页 |
| ·Realtime PCR检测RNA表达量 | 第55-56页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124酶活测定 | 第56-59页 |
| ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 SOD活性测定 | 第56-57页 |
| ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 POD活性测定 | 第57页 |
| ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124 MDA含量测定 | 第57-58页 |
| ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124可溶性蛋白含量的测定 | 第58页 |
| ·盐胁迫对莱茵衣藻CC124脯氨酸含量的测定 | 第58-59页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124耐盐性测定 | 第59-60页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124藻液OD490与细胞密度的相关性 | 第59页 |
| ·野生型莱茵衣藻CC124耐盐性测定 | 第59-60页 |
| ·莱茵衣藻CC124转化株耐盐性测定 | 第60-61页 |
| ·ShuHKT2基因在莱茵衣藻中的亚细胞定位 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·ShuHKT2基因的克隆与生物信息学分析 | 第62-63页 |
| ·ShuHKT2基因在莱茵衣藻CC124中的过量表达 | 第63页 |
| ·莱茵衣藻CC124酶活的测定 | 第63-64页 |
| ·莱茵衣藻CC124以及转化株耐盐性鉴定 | 第64-65页 |
| ·ShuHKT2基因表达产物的亚细胞定位 | 第65-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72页 |