英文缩略词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究对象及方法 | 第14-24页 |
一、研究对象 | 第14页 |
二、实验仪器及耗材 | 第14-15页 |
三、主要试剂 | 第15-16页 |
四、实验溶液配制 | 第16-18页 |
1 0.01 M PBS | 第16页 |
2 0.01 M胶原盐酸溶液 | 第16页 |
3 完全培养基 | 第16页 |
4 5mM棕榈酸盐 | 第16-17页 |
5 5mM UDCA | 第17页 |
6 病理固定液(4%多聚甲醛溶液) | 第17页 |
7 Western Blotting试剂的配制 | 第17-18页 |
·10%过硫酸铵 | 第17页 |
·四甲基乙二胺(TEMED)原液 | 第17页 |
·SDS电泳缓冲液(5×) | 第17页 |
·转膜缓冲液 | 第17页 |
·TBS缓冲液(10×) | 第17页 |
·TBST(1×) | 第17-18页 |
8 Real-Time PCR试剂的配制 | 第18页 |
·DEPC处理水 | 第18页 |
·75%DEPC酒精 | 第18页 |
五、研究方法 | 第18-23页 |
1 激光共聚焦法小鼠肾脏冰冻切片钙神经蛋白及synatopodin表达测定 | 第18-19页 |
2 细胞培养和分组 | 第19页 |
·细胞培养 | 第19页 |
·细胞刺激 | 第19页 |
3 不同浓度棕榈酸盐刺激下足细胞钙神经蛋白的表达 | 第19-21页 |
·细胞RNA提取 | 第19页 |
·RNA鉴定 | 第19-20页 |
·cDNA合成 | 第20页 |
·引物设计 | 第20页 |
·Real-Time PCR(SYBR Green染料法) | 第20页 |
·反应条件 | 第20-21页 |
4 激光共聚焦法测定钙神经蛋白的表达 | 第21页 |
5 Western Blotting检测足细胞钙神经蛋白、synaptopodin的表达 | 第21-23页 |
·制胶 | 第21-22页 |
·细胞裂解(细胞分组同免疫荧光部分) | 第22页 |
·BCA法测蛋白浓度 | 第22页 |
·SDS-PAGE胶电泳 | 第22页 |
·湿法电转膜 | 第22-23页 |
·抗原检测 | 第23页 |
六、统计学处理 | 第23-24页 |
研究结果 | 第24-31页 |
一、激光共聚焦观察糖尿病小鼠模型中足细胞钙神经蛋白的表达 | 第24-25页 |
二、足细胞鉴定 | 第25-26页 |
三、体外足细胞在棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下钙神经蛋白的表达 | 第26-31页 |
1 不同浓度棕榈酸盐作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达 | 第26-27页 |
·细胞RNA提取 | 第26页 |
·反应条件 | 第26页 |
·解离曲线分析 | 第26页 |
·明确目标条带 | 第26-27页 |
·不同浓度棕榈酸盐作用下体外足细胞钙神经蛋白表达的定量 | 第27页 |
2 棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达 | 第27-31页 |
·激光共聚焦测定棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达 | 第27-29页 |
·Western Blotting检测棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达 | 第29-31页 |
讨论 | 第31-36页 |
一、体外足细胞中棕榈酸盐刺激对钙神经蛋白表达的调控 | 第31-33页 |
二、体外足细胞中熊去氧胆酸刺激对钙神经蛋白表达的下调作用 | 第33-34页 |
三、钙神经蛋白与synaptopodin的表达关系 | 第34-36页 |
结论 | 第36-37页 |
论文综述 | 第37-47页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |