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足细胞内质网应激对钙神经蛋白表达的调控研究

英文缩略词第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
前言第12-14页
研究对象及方法第14-24页
 一、研究对象第14页
 二、实验仪器及耗材第14-15页
 三、主要试剂第15-16页
 四、实验溶液配制第16-18页
  1 0.01 M PBS第16页
  2 0.01 M胶原盐酸溶液第16页
  3 完全培养基第16页
  4 5mM棕榈酸盐第16-17页
  5 5mM UDCA第17页
  6 病理固定液(4%多聚甲醛溶液)第17页
  7 Western Blotting试剂的配制第17-18页
   ·10%过硫酸铵第17页
   ·四甲基乙二胺(TEMED)原液第17页
   ·SDS电泳缓冲液(5×)第17页
   ·转膜缓冲液第17页
   ·TBS缓冲液(10×)第17页
   ·TBST(1×)第17-18页
  8 Real-Time PCR试剂的配制第18页
   ·DEPC处理水第18页
   ·75%DEPC酒精第18页
 五、研究方法第18-23页
  1 激光共聚焦法小鼠肾脏冰冻切片钙神经蛋白及synatopodin表达测定第18-19页
  2 细胞培养和分组第19页
   ·细胞培养第19页
   ·细胞刺激第19页
  3 不同浓度棕榈酸盐刺激下足细胞钙神经蛋白的表达第19-21页
   ·细胞RNA提取第19页
   ·RNA鉴定第19-20页
   ·cDNA合成第20页
   ·引物设计第20页
   ·Real-Time PCR(SYBR Green染料法)第20页
   ·反应条件第20-21页
  4 激光共聚焦法测定钙神经蛋白的表达第21页
  5 Western Blotting检测足细胞钙神经蛋白、synaptopodin的表达第21-23页
   ·制胶第21-22页
   ·细胞裂解(细胞分组同免疫荧光部分)第22页
   ·BCA法测蛋白浓度第22页
   ·SDS-PAGE胶电泳第22页
   ·湿法电转膜第22-23页
   ·抗原检测第23页
 六、统计学处理第23-24页
研究结果第24-31页
 一、激光共聚焦观察糖尿病小鼠模型中足细胞钙神经蛋白的表达第24-25页
 二、足细胞鉴定第25-26页
 三、体外足细胞在棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下钙神经蛋白的表达第26-31页
  1 不同浓度棕榈酸盐作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达第26-27页
   ·细胞RNA提取第26页
   ·反应条件第26页
   ·解离曲线分析第26页
   ·明确目标条带第26-27页
   ·不同浓度棕榈酸盐作用下体外足细胞钙神经蛋白表达的定量第27页
  2 棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达第27-31页
   ·激光共聚焦测定棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达第27-29页
   ·Western Blotting检测棕榈酸盐及熊去氧胆酸作用下体外足细胞钙神经蛋白的表达第29-31页
讨论第31-36页
 一、体外足细胞中棕榈酸盐刺激对钙神经蛋白表达的调控第31-33页
 二、体外足细胞中熊去氧胆酸刺激对钙神经蛋白表达的下调作用第33-34页
 三、钙神经蛋白与synaptopodin的表达关系第34-36页
结论第36-37页
论文综述第37-47页
 参考文献第42-47页
致谢第47-48页

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