| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·植物抗寒性研究 | 第11-15页 |
| ·冷胁迫对植物膜系统的影响 | 第11页 |
| ·冷胁迫对植物保护酶的影响 | 第11-12页 |
| ·冷胁迫对植物细胞内物质的影响 | 第12-13页 |
| ·糖的积累 | 第12页 |
| ·氨基酸的变化 | 第12页 |
| ·蛋白质的变化 | 第12页 |
| ·激素的变化 | 第12-13页 |
| ·低温胁迫对植物分子机理的影响 | 第13-15页 |
| ·调控基因 | 第13页 |
| ·保护基因 | 第13-15页 |
| ·SCoT 分子标记技术 | 第15-16页 |
| ·铁皮石斛 DNA 分子标记与辅助育种 | 第16页 |
| ·铁皮石斛抗寒性研究现状 | 第16-17页 |
| ·论文研究要解决的主要问题与研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 冷胁迫对铁皮石斛生理指标的影响 | 第18-23页 |
| ·材料和方法 | 第18-19页 |
| ·试验材料 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-19页 |
| ·低温处理 | 第18页 |
| ·相对电导率的测定 | 第18页 |
| ·半致死温度的测定 | 第18页 |
| ·生理指标的测定 | 第18-19页 |
| ·结果与分析 | 第19-22页 |
| ·不同低温胁迫下相对电导率的变化 | 第19页 |
| ·铁皮石斛各家系冷胁迫下的半致死温度 | 第19-20页 |
| ·冷胁迫时间对 SOD 活性的影响 | 第20页 |
| ·冷胁迫时间对 POD 活性的影响 | 第20-21页 |
| ·冷胁迫时间对 CAT 活性的影响 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 铁皮石斛总 RNA 提取方法比较研究 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·总 RNA 提取方法 | 第23-25页 |
| ·RNAiso Plus 法 | 第23-24页 |
| ·RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue 法 | 第24页 |
| ·RNAiso Plus+RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue 法 | 第24页 |
| ·CTAB+LiCl 法 | 第24-25页 |
| ·CTAB+LiCl+RNAiso Plus 法 | 第25页 |
| ·总 RNA 质量检测 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-27页 |
| ·铁皮石斛 RNA OD 值检测 | 第25-26页 |
| ·铁皮石斛 RNA 电泳分析 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| 第四章 冷胁迫下铁皮石斛抗寒相关基因 SCoT 差异表达分析 | 第28-34页 |
| ·材料与方法 | 第28-29页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·材料制备 | 第28页 |
| ·铁皮石斛总 RNA 的提取与 RNA 混合池的构建 | 第28-29页 |
| ·RNA 提取 | 第28页 |
| ·RNA 混合池的构建 | 第28-29页 |
| ·第一链 cDNA 的合成及 SCoT PCR 扩增 | 第29页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第29页 |
| ·第一链 cDNA 的 SCOT PCR 扩增 | 第29页 |
| ·差异片段的回收、克隆、测序与分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·RNA 提取和逆转录 | 第29-30页 |
| ·铁皮石斛抗寒相关基因的 SCOT 差异显示 | 第30页 |
| ·差异片段的序列分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| ·SCoT 分子标记在基因差异表达分析中应用的可行性 | 第31页 |
| ·铁皮石斛抗寒相关表达基因和蛋白 | 第31-34页 |
| 第五章 铁皮石斛 Actin 基因的克隆与序列分析 | 第34-43页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·植物材料及主要试剂 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·铁皮石斛 RNA 的提取及反转录 | 第34-35页 |
| ·铁皮石斛 Actin 基因目标片段克隆 | 第35页 |
| ·铁皮石斛 Actin 基因 3' RACE 及 5' RACE | 第35页 |
| ·铁皮石斛 Actin 基因全长拼接与 PCR 验证 | 第35-36页 |
| ·铁皮石斛 Actin 基因的生物信息学分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·铁皮石斛 Actin 全长基因的克隆及序列分析 | 第36-38页 |
| ·铁皮石斛 Actin 的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| ·同源性分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第六章 铁皮石斛 HSP70 基因的克隆及冷胁迫表达分析 | 第43-51页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·植物材料及主要试剂 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·铁皮石斛 RNA 的提取及反转录 | 第43-44页 |
| ·铁皮石斛 HSP70 基因全长克隆 | 第44页 |
| ·铁皮石斛 HSP70 基因全长拼接与 PCR 验证 | 第44页 |
| ·铁皮石斛 HSP70 基因的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·冷胁迫下铁皮石斛 HSP70 基因的表达分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-50页 |
| ·铁皮石斛 HSP70 全长基因的克隆及序列分析 | 第45-46页 |
| ·铁皮石斛 HSP70 的生物信息学分析 | 第46-47页 |
| ·同源性分析 | 第47-49页 |
| ·冷胁迫对铁皮石斛 HSP70 基因表达影响 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第七章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
| 发表的论文 | 第59页 |
| 社会实践及学术交流 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
