| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 目次 | 第12-15页 |
| 图清单 | 第15-17页 |
| 表清单 | 第17-18页 |
| 1 前言 | 第18-32页 |
| ·本课题研究的背景、内容和意义 | 第18页 |
| ·bursicon 基因的研究进展 | 第18-29页 |
| ·bursicon 的分子鉴定 | 第19-21页 |
| ·半胱氨酸节蛋白家族：Bursicon | 第21-22页 |
| ·节肢动物体内 BURS 和 PBURS 的保守性及其功能 | 第22-23页 |
| ·bursiocn 基因结构 | 第23-24页 |
| ·Bursicon 的受体 | 第24-25页 |
| ·Bursicon 对翅膀的扩展和成熟的调控作用 | 第25-26页 |
| ·Bursicon 对骨化和黑化的调控作用 | 第26-28页 |
| ·Bursicon 的表达定位 | 第28-29页 |
| ·展望 | 第29页 |
| ·RNAi 技术在昆虫中的应用 | 第29-32页 |
| ·RNAi 的分子机制 | 第29-30页 |
| ·昆虫 RNAi 的策略 | 第30-31页 |
| ·胚胎 RNAi | 第30页 |
| ·亲本 RNAi | 第30页 |
| ·幼虫或若虫 RNAi | 第30-31页 |
| ·成虫 RNAi | 第31页 |
| ·可遗传的 RNAi | 第31页 |
| ·RNAi 技术在昆虫害虫防治中的应用 | 第31-32页 |
| 2 灰飞虱和褐飞虱 bursicon 基因的克隆以及生物信息分析 | 第32-52页 |
| ·材料与方法 | 第32-34页 |
| ·供试昆虫 | 第32页 |
| ·试剂与仪器 | 第32-33页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·引物列表 | 第33-34页 |
| ·灰飞虱和褐飞虱 bursicon 片段的克隆 | 第34-38页 |
| ·灰飞虱和褐飞虱总 RNA 的提取 | 第34页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第34页 |
| ·简并引物的设计和合成 | 第34-36页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第36-37页 |
| ·割胶回收 | 第37页 |
| ·DNA 连接 | 第37页 |
| ·质粒转化 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆的筛选和测序 | 第38页 |
| ·灰飞虱和褐飞虱 bursicon 全长的克隆 | 第38-41页 |
| ·褐飞虱 bursicon 3' RACE 的合成 | 第38-39页 |
| ·灰飞虱 bursicon 3' RACE 的合成 | 第39-40页 |
| ·灰飞虱和褐飞虱 bursicon 5'端片段的克隆 | 第40页 |
| ·灰飞虱和褐飞虱 bursicon 基因组序列的确定及分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-52页 |
| ·灰飞虱 bursicon 基因全长扩增与分析 | 第41-46页 |
| ·灰飞虱 bursicon 基因全长 cDNA 的扩增与序列分析 | 第41-44页 |
| ·灰飞虱 Bursicon 理化性质分析 | 第44-45页 |
| ·灰飞虱 Bursicon 的进化关系分析 | 第45-46页 |
| ·褐飞虱 bursicon 基因全长扩增与分析 | 第46-52页 |
| ·褐飞虱 bursicon 基因全长 cDNA 的扩增与序列分析 | 第46-49页 |
| ·褐飞虱 Bursicon 理化性质分析 | 第49-50页 |
| ·褐飞虱 Bursicon 的进化关系分析 | 第50-52页 |
| 3 bursicon 基因的时相表达以及功能验证 | 第52-62页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·供试昆虫 | 第52页 |
| ·试剂与仪器 | 第52-53页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52-53页 |
| ·引物 | 第53页 |
| ·灰飞虱 qRT-PCR 模板 DNA 的合成 | 第53-54页 |
| ·灰飞虱各龄期以及蜕皮前后的总 RNA 的提取 | 第53页 |
| ·qRT-PCR 所用模板 DNA 的合成 | 第53-54页 |
| ·荧光实时定量 PCR 检测灰飞虱 bursicon mRNA 水平 | 第54-55页 |
| ·实验材料的取样 | 第54页 |
| ·特异性引物设计 | 第54页 |
| ·Lsburs、Lspburs 以及内参基因引物扩增效率的确定 | 第54-55页 |
| ·qRT-PCR | 第55页 |
| ·RNAi 验证褐飞虱 burs 的功能 | 第55-57页 |
| ·实验材料的取样 | 第55页 |
| ·特异性引物设计 | 第55-56页 |
| ·dsRNA 的合成 | 第56页 |
| ·dsRNA 的纯化 | 第56页 |
| ·显微注射 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-62页 |
| ·灰飞虱 qRT-PCR 引物扩增效率的确定 | 第57页 |
| ·bursicon 在灰飞虱不同发育阶段中的相对转录水平 | 第57-59页 |
| ·褐飞虱 RNAi 后累计死亡率统计 | 第59页 |
| ·RNA 干扰对 Nlburs 基因的影响 | 第59-62页 |
| 4 总结与展望 | 第62-64页 |
| ·全文总结 | 第62-63页 |
| ·展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
