摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 意蜂毒素研究概况 | 第11-25页 |
一、意蜂蜂毒的理化性质 | 第11-12页 |
二、意蜂蜂毒的成分 | 第12-23页 |
(一) 意蜂蜂毒中肽类成分及其药理作用 | 第12-22页 |
1. 蜂毒溶血肽(melittin)及其药理作用 | 第12-14页 |
2. Melittin F及其药理作用 | 第14页 |
3. 蜂毒明肽(Apamin)及其药理作用 | 第14-17页 |
4. MCD多肽(401肽;MCD peptide)及其药理作用 | 第17-19页 |
5. 蜂毒镇静肽(Secapin)及其药理活性 | 第19-20页 |
6. Tertiapin(TNP)及其药理作用 | 第20-21页 |
7. Adolapin及其药理作用 | 第21页 |
8. Procamine | 第21页 |
9. Api M6 | 第21-22页 |
10 蜂毒中其它肽类物质 | 第22页 |
(二) 蜂毒中的酶类成分简介 | 第22-23页 |
1. 磷脂酶A_2 | 第22-23页 |
2. 透明质酸酶(Hyaluronidase, Hya,) | 第23页 |
三、蜂毒疗法简介 | 第23-24页 |
四、总结 | 第24-25页 |
第二章 蜂毒多肽的分离、纯化、结构鉴定及LC-MS方法的建立 | 第25-71页 |
一、原料、主要仪器和试剂 | 第25-26页 |
二. 实验方法及原理 | 第26-30页 |
三、蜂毒多肽LC-LTQ-FT方法研究 | 第30-35页 |
·样品制备 | 第30页 |
·HPLC/FTICR-MS分析条件 | 第30页 |
·蜂毒多肽HPLC分析方法的确定 | 第30-33页 |
·蜂毒中多肽成分谱色谱峰的指认 | 第33-35页 |
四、蜂毒中多肽成分的分离纯化及结构鉴定 | 第35-71页 |
(一) 蜂毒中多肽成分的分离纯化 | 第35-41页 |
1 提取 | 第35页 |
2 分离纯化 | 第35-41页 |
·BV-2组分中多肽的HPLC分离纯化 | 第36-37页 |
·BV-5组分中多肽的HPLC分离纯化 | 第37-38页 |
·BV-7组分中多肽的HPLC分离纯化 | 第38-39页 |
·BV-8组分中多肽的HPLC分离纯化 | 第39-41页 |
(二) 蜂毒多肽的结构鉴定 | 第41-63页 |
1. BV-5-4-3(新多肽)的结构鉴定 | 第42-44页 |
2. BV-5-4-4(新多肽)的结构鉴定 | 第44-46页 |
3. BV-7-3(新多肽)的结构鉴定 | 第46-49页 |
4. BV-2-7(Apamin)的结构鉴定 | 第49-51页 |
5. BV-5-2(tertiapin)的结构鉴定 | 第51-52页 |
6. BV-5-1(tertiapin oxidized)的结构鉴定 | 第52-54页 |
7. BV-5-3-3(Api m6.01)的结构鉴定 | 第54-56页 |
8. BV-5-4-2(Secapin)的结构鉴定 | 第56-58页 |
9. BV-5-5(Api m6.03)的结构鉴定 | 第58-61页 |
10. BV-8-2(melittin)的结构鉴定 | 第61-63页 |
(三) BV-9组分的LC-ESI-Q-TOF分析 | 第63-71页 |
1 分析条件 | 第63页 |
2 分析结果 | 第63-71页 |
第三章 SECAPIN-1的固相合成研究 | 第71-79页 |
一、常用试剂及检测反应 | 第71页 |
1、试剂配制 | 第71页 |
2、氨基定性反应 | 第71页 |
二、合成实验 | 第71-73页 |
1、树脂的选择及活化处理 | 第71页 |
2、Fmoc-AA-OH与树脂的键合 | 第71-72页 |
3、微波辅助脱Fmoc保护基 | 第72页 |
4、树脂上多肽的裂解 | 第72-73页 |
三、SECAPIN-1二硫键的形成 | 第73-74页 |
四、SECAPIN-1的纯化 | 第74-78页 |
1、secapin-1 Protein Pak 60柱的纯化 | 第75-76页 |
2、组分Ⅰ的离子交换柱纯化 | 第76页 |
3、组分Ⅱ的离子交换柱纯化 | 第76-77页 |
4、组分Ⅲ的RP-HPLC纯化 | 第77-78页 |
五、结果及得率 | 第78-79页 |
第四章 部分蜂毒多肽的电生理活性测定 | 第79-83页 |
一、实验方法 | 第79页 |
二、实验结果 | 第79-82页 |
小结 | 第82-83页 |
第五章 结果与讨论 | 第83-85页 |
一、关于蜂毒毒素LC-LTQ-FT分析方法的建立 | 第83页 |
二、关于蜂毒毒素的结构及活性 | 第83-84页 |
三、关于固相合成SECAPIN-1 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
附图 | 第94-130页 |