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LPS长期刺激巨噬细胞引起适应性免疫应答受损

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-13页
   ·研究背景第8-13页
     ·单核吞噬细胞系统(MPS)的分化第8页
     ·TLR-4信号通路第8-9页
     ·M1和M2型巨噬细胞第9-10页
     ·巨噬细胞的可塑性与T淋巴细胞第10-11页
     ·固有免疫与适应性免疫第11页
     ·抗原递呈第11-13页
第二章 技术路线第13-14页
第三章 材料与方法第14-25页
   ·主要材料第14-16页
     ·细胞和样本第14页
     ·主要试剂第14-15页
     ·主要仪器第15-16页
   ·实验方法第16-25页
     ·从人的外周血中分离单个核细胞第16页
     ·从单个核细胞中用磁珠分选monocyte(负选)第16-17页
     ·体外诱导单核细胞分化成巨噬细胞第17页
     ·体外诱导单核细胞分化成DC第17-18页
     ·CD3~+T细胞磁珠分选(正选)第18页
     ·CFSE染色第18页
     ·巨噬细胞与异体淋巴细胞共培养实验第18-19页
     ·AnnexinV-FITC细胞凋亡检测第19页
     ·ELISA检测细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10第19-20页
     ·ELISA检测细胞因子IL-6(减步法)第20-21页
     ·流式检测细胞表面抗体第21页
     ·微量总RNA的提取第21页
     ·总RNA逆转录第21-22页
     ·荧光定量PCR(SYBRGreenAssay)第22-24页
     ·统计学处理第24-25页
第四章 结果第25-34页
   ·从人外周血中分离得到纯度较高的单核细胞第25页
   ·LPS刺激巨噬细胞48小时后抗原递呈能力下降第25-27页
   ·LPS长时间刺激的巨噬细胞无凋亡发生第27页
   ·LPS刺激巨噬细胞的动态变化第27-30页
     ·不同刺激的时间点下LPS-M的HLA-DR和CCR7动态变化第27-28页
     ·不同刺激的时间点下LPS-M分泌的细胞因子的动态变化第28-29页
     ·排除IL-10自分泌引起HLA-DR的高表达第29-30页
   ·从人外周血分离得到纯度较高的CD~3S+T细胞第30-31页
   ·异体混合淋巴细胞共培养第31-32页
   ·TLR-4信号通路关键调控基因表达受损第32-34页
第五章 讨论与结论第34-36页
第六章 总结第36-37页
第七章 本文的创新之处第37-38页
第八章 展望第38-39页
参考文献第39-43页
附录第43-44页
在学期间发表文章第44-45页
致谢第45页

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