| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号与缩略语说明 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一节 氨基甲酸酯类农药概述 | 第12-17页 |
| 1 氨基甲酸酯类农药的化学结构及制毒机理 | 第12-14页 |
| 2 西维因的性质及危害 | 第14-15页 |
| 3 氨基甲酸酯类农药的降解 | 第15-17页 |
| ·物理降解 | 第15-16页 |
| ·化学降解 | 第16页 |
| ·生物降解 | 第16-17页 |
| 第二节 微生物降解氨基甲酸酯类农药的研究进展 | 第17-22页 |
| 1 降解氨基甲酸酯类农药的微生物 | 第17-19页 |
| 2 西维因的微生物降解途径 | 第19-20页 |
| 3 氨基甲酸酯类水解酶及相关基因的克隆表达研究 | 第20-21页 |
| 4 微生物降解氨基甲酸酯类农药展望 | 第21-22页 |
| 第二章 西维因降解菌的分离和生物学特性研究 | 第22-38页 |
| 1 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·培养基与菌株 | 第22页 |
| ·供试农药及化学试剂 | 第22-23页 |
| ·分析方法 | 第23页 |
| ·西维因降解菌的分离 | 第23页 |
| ·西维因降解菌株的鉴定 | 第23-25页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-36页 |
| ·西维因降解菌的分离 | 第25-26页 |
| ·降解菌株的形态 | 第26-27页 |
| ·降解菌株的生理生化特征 | 第27-28页 |
| ·降解菌株的16S rRNA基因扩增 | 第28页 |
| ·降解菌株的系统发育树分析 | 第28-31页 |
| ·环境条件对降解菌株生长的影响 | 第31-36页 |
| 3 小结 | 第36-38页 |
| 第三章 西维因降解菌株的降解特性研究 | 第38-48页 |
| 第一节 西维因降解菌FX-1、X9对西维因的降解 | 第38-43页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| ·培养基与菌株 | 第38页 |
| ·供试农药及化学试剂 | 第38页 |
| ·分析方法 | 第38页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第38-39页 |
| ·种子液培养 | 第39页 |
| 2 结果与讨论 | 第39-43页 |
| ·菌株FX-1和X9以西维因为唯一碳源的生长和降解 | 第39-40页 |
| ·温度对菌株FX-1和X9降解西维因的影响 | 第40页 |
| ·初始pH值对菌株FX-1和X9降解西维因的影响 | 第40-41页 |
| ·通气量对菌株FX-1和X9降解西维因的影响 | 第41-42页 |
| ·不同接种量对菌株FX-1和X9降解西维因的影响 | 第42-43页 |
| 第二节 西维因降解菌X9对1-萘酚的降解特性研究 | 第43-47页 |
| 1 材料与方法 | 第43页 |
| ·培养基与菌株 | 第43页 |
| ·供试农药及化学试剂 | 第43页 |
| ·分析方法 | 第43页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第43页 |
| ·种子液的培养 | 第43页 |
| 2 结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·X9对1-萘酚的降解 | 第43-44页 |
| ·不同接种量对菌株X9降解1-萘酚的影响 | 第44页 |
| ·温度对菌株X9降解1-萘酚的影响 | 第44-45页 |
| ·初始pH值对菌株X9降解1-萘酚的影响 | 第45-46页 |
| ·通气量对菌株X9降解1-萘酚的影响 | 第46-47页 |
| ·菌株X9对不同浓度的1-萘酚的降解情况 | 第47页 |
| 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 西维因水解酶基因的克隆与表达 | 第48-58页 |
| 1 材料与方法 | 第48-54页 |
| ·培养基与试剂 | 第48页 |
| ·菌株与质粒 | 第48-49页 |
| ·菌体基因组DNA和质粒DNA的提取 | 第49页 |
| ·E.coliDH5α感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·西维因水解酶基因的引物设计与PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·PCR产物的T/A克隆 | 第51页 |
| ·西维因水解酶基因的测定与序列分析 | 第51页 |
| ·PCR产物的纯化及酶切 | 第51页 |
| ·表达载体pET32a的制备 | 第51-52页 |
| ·酶连及酶连产物的转化 | 第52页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第52-53页 |
| ·重组子西维因水解酶的酶活检测 | 第53-54页 |
| 2 结果与讨论 | 第54-57页 |
| ·PCR法克隆西维因水解酶基因cehA | 第54页 |
| ·西维因水解酶基因cehA核苷酸序列的分析 | 第54-55页 |
| ·cehA基因在E.coli Rosetta-gami(DE3)中的表达 | 第55-57页 |
| 3 小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录一 培养基及试剂配方 | 第66-68页 |
| 附录二 相关序列 | 第68-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表或已接收的论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |