| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 英文缩写说明 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1 热应激对奶牛的影响 | 第15-17页 |
| ·热应激对采食量的影响 | 第15页 |
| ·应激对生产性能的影响 | 第15-16页 |
| ·热应激对繁殖性能的影响 | 第16页 |
| ·热应激对对血液生化指标的影响 | 第16-17页 |
| 2 趋化因子配体3(CCL3)研究进展 | 第17-20页 |
| ·CCL3基因与蛋白的结构特点 | 第17页 |
| ·CCL3的生物学功能 | 第17-19页 |
| ·CCL3基因多态性研究 | 第19-20页 |
| ·CCL3基因与奶牛热应激的关系 | 第20页 |
| ·小结 | 第20页 |
| 3 SNP | 第20-22页 |
| ·SNP的概述 | 第20-21页 |
| ·SNP在奶牛育种中的应用 | 第21-22页 |
| 4 研究目的意义与主要研究内容 | 第22-23页 |
| ·研究目的意义 | 第22页 |
| ·主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 热应激对中国荷斯坦牛直肠温度、血常规和血清生化指标的影响 | 第23-33页 |
| 1 试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验材料及采样方法 | 第23页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第23-24页 |
| 2.直肠温度的测定方法 | 第24页 |
| 3.血常规的测定方法 | 第24-25页 |
| 4.血清生化指标测定方法 | 第25-27页 |
| ·MDA含量的测定 | 第25-26页 |
| ·AKP含量的测定 | 第26-27页 |
| ·T-AOC含量的测定 | 第27页 |
| 5 结果 | 第27-29页 |
| ·热应激对中国荷斯坦牛直肠温度及血常规的影响 | 第27-28页 |
| ·热应激对中国荷斯坦牛血常规的影响 | 第28-29页 |
| ·热应激对中国荷斯坦牛血清抗氧化指标的影响 | 第29页 |
| 6 讨论 | 第29-33页 |
| ·热应激对中国荷斯坦牛直肠温度和血常规的影响 | 第29-30页 |
| ·热应激对中国荷斯坦牛生化指标的影响 | 第30-33页 |
| 第三章 中国荷斯坦牛CCL3基因克隆及序列分析 | 第33-43页 |
| 1.试验材料 | 第33-34页 |
| ·试验材料及采样方法 | 第33页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第33-34页 |
| 2.DNA 提取 | 第34-35页 |
| ·DNA提取所用试剂 | 第34-35页 |
| ·中国荷斯坦牛血液DNA提取和检测 | 第35页 |
| 3.PCR 扩增及检测 | 第35-36页 |
| ·PCR引物 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR扩增产物的检测 | 第36页 |
| 4.DNA克隆及测序 | 第36-38页 |
| ·菌株和载体 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
| ·目的片段回收及连接转化 | 第37-38页 |
| ·序列测定和分析 | 第38页 |
| 5 结果 | 第38-40页 |
| ·中国荷斯坦牛血液DNA提取的检测 | 第38-39页 |
| ·CCL3基因PCR扩增 | 第39页 |
| ·含有目的片段菌落的PCR检测 | 第39-40页 |
| ·CCL3基因全序列和Spidey分析结果 | 第40页 |
| ·CCL3基因的多物种比对 | 第40页 |
| 6.讨论 | 第40-43页 |
| 第四章 中国荷斯坦牛CCL3基因SNPs及其与直肠温度、血常规、泌乳性状和生化指标的关联分析 | 第43-59页 |
| 1.试验材料 | 第43-44页 |
| ·试验材料及采样方法 | 第43页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第43-44页 |
| 2.DNA提取 | 第44页 |
| 3.PCR扩增及检测 | 第44页 |
| ·PCR引物 | 第44页 |
| ·PCR扩增及扩增产物的检测 | 第44页 |
| 4.PCR-SSCP | 第44-46页 |
| ·15%聚丙烯酰胺凝胶制备 | 第45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶银染(硝酸银染色) | 第45页 |
| ·带型判定 | 第45-46页 |
| 5.序列测定和分析 | 第46页 |
| 6.统计分析 | 第46-47页 |
| ·基因频率和基因型频率 | 第46页 |
| ·多态信息含量的计算 | 第46-47页 |
| ·Hardy-Weinberg平衡检测 | 第47页 |
| 7.结果 | 第47-53页 |
| ·CCL3基因的PCR扩增结果 | 第47-48页 |
| ·CCL3基因的PCR-SSCP检测与突变区域的测序 | 第48-50页 |
| ·CCL3 SNPs连锁不平衡程度分析及标签SNP(Haplotype tag SNP,htSNP)的选择 | 第50-51页 |
| ·CCL3 htSNPs的群体遗传学分析 | 第51页 |
| ·CCL3基因htSNPs与直肠温度、血常规、泌乳性状和生化指标的关联分析 | 第51-53页 |
| 8 讨论 | 第53-59页 |
| ·中国荷斯坦牛CCL3基因突变及其多态性分析 | 第53页 |
| ·中国荷斯坦牛CCL3基因htSNPs的群体遗传结构分析 | 第53-55页 |
| ·CCL3基因多态性与中国荷斯坦牛直肠温度、血常规、泌乳性状和生化指标的关联分析 | 第55-59页 |
| 全文结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-75页 |
| 附录一 CCL3 htSNP512与血常规、血清生化指标和泌乳性状关联分析 | 第67-69页 |
| 附录二 CCL3 htSNP 1512与血常规、血清生化指标和泌乳性状关联分析 | 第69-71页 |
| 附录三 CCL3基因的多物种比对 | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 在读学位期间发表论文 | 第77页 |
