| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-21页 |
| ·青海湖裸鲤研究概述 | 第10-12页 |
| ·青海湖裸鲤人工繁殖的研究 | 第10页 |
| ·青海湖裸鲤生理学研究 | 第10-11页 |
| ·青海湖裸鲤分子生物学和细胞生物学研究 | 第11页 |
| ·青海湖裸鲤营养学研究 | 第11-12页 |
| ·钙调蛋白磷酸酶（Calcineurin）概述 | 第12-21页 |
| ·CN 的结构、分布和功能 | 第12-15页 |
| ·CN 的分子结构 | 第12-14页 |
| ·CN 的分布 | 第14-15页 |
| ·CN 的功能 | 第15页 |
| ·CN 参与信号途径 | 第15-21页 |
| ·CN/NFAT 信号转导通路的组成 | 第15-19页 |
| ·CN 介导的非经典途径—NF-κB 信号通路 | 第19-21页 |
| 第2章 青海湖裸鲤 GAPDH 克隆和表达特性研究 | 第21-33页 |
| ·前言 | 第21-22页 |
| ·材料与方法 | 第22-25页 |
| ·总 RNA 的提取和 GAPDH 基因末端模板制备 | 第22页 |
| ·Gp-GAPDH 基因特异性片段的扩增 | 第22-23页 |
| ·Gp-GAPDHα基因全长扩增 | 第23页 |
| ·Gp-GAPDHβ基因全长扩增 | 第23-24页 |
| ·Gp-GAPDH 基因序列分析 | 第24页 |
| ·GAPDH 基因在青海湖裸鲤不同组织中的表达水平检测 | 第24页 |
| ·GAPDH 基因在青海湖裸鲤受精卵不同发育阶段的表达水平检测 | 第24-25页 |
| ·统计分析与绘图 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-31页 |
| ·Gp-GAPDHα与 Gp-GAPDHβ的克隆与序列分析 | 第25-27页 |
| ·序列分析 | 第27-29页 |
| ·GAPDH 表达模式的研究 | 第29-31页 |
| ·GAPDH 在青海湖裸鲤不同组织中表达量分析 | 第29-30页 |
| ·青海湖裸鲤受精卵发育过程 GAPDH 表达量的分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 钙调蛋白磷酸酶(CN)的克隆、鉴定和功能分析 | 第33-63页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-47页 |
| ·实验动物与材料 | 第34页 |
| ·青海湖裸鲤各组织总 RNA 的提取及第一链 cDNA 合成 | 第34-36页 |
| ·利用 RNAiso Plus(TaKaRa)试剂提取青海湖裸鲤组织总 RNA | 第34页 |
| ·第一链 cDNA 合成 | 第34-36页 |
| ·CN 大小亚基基因片段的克隆 | 第36-38页 |
| ·简并引物设计 | 第36-38页 |
| ·快速扩增（RACE）cDNAs 末端模板制备 | 第38-41页 |
| ·5’端非编码区(5’-UTR )逆转录 cDNA 链的获得 | 第38-41页 |
| ·3’端非编码区(3’-UTR )逆转录 cDNA 的获得 | 第41页 |
| ·CN 大小亚基末端片段的扩增 | 第41-43页 |
| ·引物设计 | 第41-42页 |
| ·CN 大小亚基末端 PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·CN 大小亚基基因全长验证 | 第43页 |
| ·Real time PCR 测定 CN 大小亚基在胚胎不同发育阶段及盐度胁迫过程中表达模式 | 第43-44页 |
| ·CN 大小亚基表达载体的构建和原核表达 | 第44-45页 |
| ·引物设计与表达载体构建 | 第44页 |
| ·表达载体的构建 | 第44页 |
| ·融合蛋白原核诱导表达 | 第44-45页 |
| ·CN 大小亚基融合蛋白纯化与多克隆抗体制备 | 第45-47页 |
| ·CN 大小亚基融合蛋白纯化 | 第45页 |
| ·CN 大小亚基多克隆抗体制备 | 第45-46页 |
| ·CN 大小亚基多克隆抗体纯化 | 第46-47页 |
| ·免疫组化方法对 CN 大亚基不同组织中表达进行定位分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-59页 |
| ·不同组织总 RNA 的制备 | 第47-48页 |
| ·CN 大小亚基基因的克隆 | 第48-52页 |
| ·CN 大亚基 GpCAα克隆 | 第48-49页 |
| ·CN 大亚基 GpCAγ克隆 | 第49-50页 |
| ·CN 小亚基 GpCB 的克隆 | 第50-52页 |
| ·CN 大小亚基基因的序列分析 | 第52-56页 |
| ·CN 大亚基 GpCAα序列分析 | 第54页 |
| ·CN 大亚基 GpCAγ序列分析 | 第54页 |
| ·CN 小亚基 GpCB 序列分析 | 第54-56页 |
| ·CN 大小亚基在胚胎发育不同阶段表达模式 | 第56页 |
| ·CN 大小亚基在不同盐度胁迫条件下的表达模式 | 第56-57页 |
| ·CN 大小亚基的原核表达 | 第57-59页 |
| ·CN 大亚基在不同组织中的定位 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-63页 |
| ·CN 大小亚基基因克隆 | 第59-60页 |
| ·CN 大小亚基表达模式的研究 | 第60-61页 |
| ·CN 大小亚基不同组织中定位的研究 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 简历 | 第76页 |
