| 序言 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-21页 |
| 第1章 绪论 | 第21-41页 |
| ·miRNA的形成过程和特征 | 第22-25页 |
| ·miRNA预测和鉴定方法 | 第25-29页 |
| ·cDNA 文库法 | 第26页 |
| ·生物信息学分析 | 第26-29页 |
| ·miRNA与肿瘤发生的关系 | 第29-31页 |
| ·发挥癌基因作用的miRNA | 第29-30页 |
| ·发挥抑癌作用的miRNA | 第30-31页 |
| ·miRNA在大肠癌中研究 | 第31-38页 |
| ·miRNA参与大肠癌发生的机制 | 第31-33页 |
| ·miRNA在大肠癌组织和细胞中的表达情况 | 第33-35页 |
| ·miRNA在大肠癌诊断中的作用 | 第35-36页 |
| ·miRNA在大肠癌治疗中的作用 | 第36-38页 |
| ·结语与展望 | 第38-41页 |
| 第2章 miR-31在人新鲜结肠癌组织及人结肠癌细胞系HT29和SW480中的表达情况 | 第41-61页 |
| ·实验材料 | 第41-44页 |
| ·主要试剂 | 第41-43页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-53页 |
| ·实验组织取材 | 第44页 |
| ·细胞的培养 | 第44-46页 |
| ·实时荧光定量PCR检测新鲜组织及人结肠癌细胞中miR-31的表达 | 第46-49页 |
| ·原位杂交方法观察miR-31在结肠癌组织中的表达 | 第49-52页 |
| ·数据处理与分析 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53-55页 |
| ·miR-31在结肠癌组织和细胞系的表达 | 第53-55页 |
| ·原位杂交方法检测在结肠癌组织中miR-31的表达 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 第3章 miR-31对人结肠癌细胞HT29生物学行为的影响 | 第61-69页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂 | 第61-62页 |
| ·主要的耗材和仪器 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-64页 |
| ·细胞培养和转染 | 第62-63页 |
| ·细胞计数法 | 第63页 |
| ·MTT实验 | 第63-64页 |
| ·琼脂细胞克隆形成实验 | 第64页 |
| ·数据处理与分析 | 第64页 |
| ·实验结果 | 第64-67页 |
| ·成功抑制miR-31在HT29细胞中的表达 | 第64-65页 |
| ·抑制miR-31的表达对HT29细胞生物学行为的影响 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第4章 miR-31下游靶基因的预测及确认 | 第69-75页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70页 |
| ·荧光素酶报告基因载体的构建 | 第70页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验（Reporter Assay） | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-72页 |
| ·miR-31靶基因的预测 | 第70-71页 |
| ·双荧光素酶基因报告分析 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第5章 miR-31对靶蛋白RhoBTB1的调节作用的研究及RhoBTB1在结肠癌组织中表达情况的检测 | 第75-93页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·主要试剂 | 第75-76页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-86页 |
| ·细胞的培养和转染 | 第76-77页 |
| ·实时荧光定量PCR检测RhoBTB1的表达 | 第77-79页 |
| ·Western-blot检测RhoBTB1的表达 | 第79-85页 |
| ·免疫组化法检测结肠癌组织RhoBTB1的表达 | 第85-86页 |
| ·数据分析与处理 | 第86页 |
| ·实验结果 | 第86-89页 |
| ·转染后HT29细胞的RhoBTB1 mRNA检测结果 | 第86页 |
| ·转染后HT29细胞的RhoBTB1的蛋白含量检测结果 | 第86-88页 |
| ·免疫组化检测结果 | 第88页 |
| ·Western-blot检测结肠癌组织中RhoBTB1表达的结果 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-90页 |
| ·小结 | 第90-93页 |
| 第6章 miR-31下游靶点RhoBTB1对人结肠癌细胞HT29的生物学行为的影响 | 第93-99页 |
| ·实验材料 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-95页 |
| ·细胞培养 | 第93页 |
| ·MTT实验 | 第93页 |
| ·软琼脂细胞克隆实验 | 第93页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第93页 |
| ·RhoBTB1干扰质粒的构建 | 第93-94页 |
| ·细胞转染 | 第94页 |
| ·数据处理与分析 | 第94-95页 |
| ·实验结果 | 第95-96页 |
| ·成功抑制RhoBTB1在HT29细胞中的表达 | 第95页 |
| ·抑制RhoBTB1的表达对HT29细胞生物学行为的影响 | 第95-96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| ·小结 | 第98-99页 |
| 第7章 全文结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-119页 |
| 攻读博士期间所取得的科研成果 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
