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低剂量力达霉素通过下调Oct4抑制小鼠胚胎癌细胞P19生长机制的研究

前言第1-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-14页
英文缩略语第14-15页
第1章 绪论第15-17页
第2章 综述第17-22页
   ·Oct4 基因第17-18页
   ·P53 基因第18-22页
     ·P53 基因的结构第18-19页
     ·P53 与细胞周期第19-20页
     ·P53 与细胞凋亡第20-21页
     ·P53、细胞周期与细胞凋亡的关系第21-22页
第3章 材料与方法第22-40页
   ·实验材料第22-28页
     ·细胞株第22页
     ·实验主要试剂第22-25页
     ·主要药品的配制第25-26页
     ·主要仪器第26-27页
     ·主要引物列表第27-28页
   ·实验方法第28-39页
     ·细胞培养第28页
     ·流式细胞分析检测细胞周期第28-29页
     ·蛋白质浓度的测定第29页
     ·Western blot 检测第29-30页
     ·总 RNA 提取第30-31页
     ·反转录成 cDNA第31页
     ·PCR 反应第31-33页
     ·细胞免疫荧光染色第33-34页
     ·染色质免疫共沉淀(ChIP)第34-36页
     ·荧光素酶活性分析(Luciferase activity assay)第36-38页
     ·Annexin V/PI 双染色法检测细胞凋亡第38-39页
   ·统计学处理第39-40页
第4章 结果第40-49页
   ·低剂量力达霉素处理 P19 细胞中细胞周期阻滞的发生第40-43页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第40页
     ·用 Western blot 方法检测经低剂量力达霉素处理 P19 细胞后 Oct4、P53 和 P21 的变化第40-41页
     ·用免疫荧光染色方法检测经低剂量力达霉素处理 P19 细胞后 Oct4、P53 和 P21 蛋白的变化第41-43页
     ·用 RT-qPCR 方法检测经低剂量力达霉素处理 P19 细胞后Oct4、P53 和 P21 的变化第43页
   ·Oct4 对 P53 的调控作用第43-46页
     ·染色质免疫共沉淀实验(ChIP)第43-44页
     ·荧光素酶活性分析(Luciferase activity assay)第44-46页
   ·低剂量力达霉素处理 P19 细胞中细胞凋亡的发生第46-49页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第46-47页
     ·Western blot 方法检测经低剂量力达霉素处理 P19 细胞后 caspase3、caspase9、Bax 的变化第47页
     ·RT-qPCR 方法检测经低剂量力达霉素处理 P19 细胞后PUMA、Noxa 的变化第47-49页
第5章 讨论第49-52页
第6章 结论第52-53页
参考文献第53-58页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第58-59页
致谢第59页

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