济宁青山羊性早熟候选基因研究
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 一、文献综述 | 第12-17页 |
| ·我国山羊业发展状况 | 第12页 |
| ·初情期 | 第12-13页 |
| ·性早熟 | 第13-14页 |
| ·UBA52基因研究进展 | 第14-15页 |
| ·泛素研究概况 | 第14-15页 |
| ·UBA52研究概况 | 第15页 |
| ·谷氨酸脱氢酶1基因 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 二、性早熟候选基因UBA52的多态性研究 | 第17-29页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·实验动物与样品采集 | 第17页 |
| ·克隆载体与菌株 | 第17页 |
| ·重要仪器与设备 | 第17页 |
| ·主要酶和试剂 | 第17-18页 |
| ·主要数据库和生物软件 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·主要试剂配制的方法 | 第18页 |
| ·血液基因组的提取 | 第18-19页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·目的片段的扩增及检测 | 第19-20页 |
| ·克隆 | 第20-21页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第21页 |
| ·序列的生物信息学分析 | 第21页 |
| ·RFLP分析及基因分型 | 第21-22页 |
| ·统计分析 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-27页 |
| ·PCR扩增及序列分析 | 第22-23页 |
| ·核苷酸突变分析 | 第23页 |
| ·引物U3和U4扩增片段RFLP分析 | 第23-24页 |
| ·UBA52基因在不同山羊品种中的遗传多态性 | 第24-25页 |
| ·不同山羊群体中UBA52基因基因型分布检测 | 第25-26页 |
| ·UBA52基因对济宁青山羊产羔数的影响 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 三、性早熟候选基因GDH1的研究 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·实验动物与样品采集 | 第29页 |
| ·克隆载体与菌株 | 第29页 |
| ·重要仪器与设备 | 第29页 |
| ·主要酶和试剂 | 第29页 |
| ·主要数据库和生物软件 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·主要试剂配制的方法 | 第29页 |
| ·血液基因组的提取 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·目的片段的扩增及检测 | 第30-31页 |
| ·克隆 | 第31页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第31页 |
| ·序列的生物信息学分析 | 第31页 |
| ·RFLP分析及基因分型 | 第31页 |
| ·统计分析 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·PCR扩增及序列分析 | 第31-32页 |
| ·核苷酸突变分析 | 第32页 |
| ·引物P8扩增片段RFLP分析 | 第32-33页 |
| ·GDH1基因在不同山羊品种中的遗传多态性 | 第33页 |
| ·不同山羊群体中GDH1基因基因型分布检测 | 第33-34页 |
| ·GDH1基因对济宁青山羊产羔数的影响 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35页 |
| ·山羊GDH1基因和性早熟的关系 | 第35页 |
| ·山羊GDH1基因和产羔数的关系 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 四、UBA52与GDH1基因表达的研究 | 第36-50页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验动物和样品采集 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·分析工具软件 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·主要试剂配制 | 第37页 |
| ·总RNA提取及纯化 | 第37-38页 |
| ·RNA质量和浓度检测 | 第38页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第38页 |
| ·消化、反转录 | 第38-39页 |
| ·目的基因和内参基因的PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·扩增片段的回收和克隆测序 | 第40页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·RNA的提取结果 | 第41页 |
| ·基因扩增与克隆测序 | 第41页 |
| ·Real-time PCR检测结果 | 第41-44页 |
| ·山羊UBA52和GDH1基因在各组织的表达水平 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第47-48页 |
| ·实验材料的选择 | 第48页 |
| ·UBA52基因mRNA的表达量变化 | 第48页 |
| ·GDH1基因mRNA的表达量变化 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 硕士期间发表学术论文目录 | 第56-57页 |
