摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
目录 | 第10-12页 |
缩略词中英文对照 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1 肝脏病变的研究现状 | 第13-15页 |
·急性肝衰竭 | 第13-14页 |
·肝脏纤维化 | 第14-15页 |
2 钙离子结合蛋白 S100 家族研究进展 | 第15-17页 |
·S100A4 研究现状 | 第15-16页 |
·S100A6 研究现状 | 第16-17页 |
3 基因芯片在肝脏损伤模型上的应用 | 第17-20页 |
·四氯化碳诱导急性肝损伤模型基因芯片结果 | 第18-19页 |
·四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型基因芯片结果 | 第19-20页 |
4 立题依据和研究内容 | 第20-22页 |
·立题依据 | 第20-21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
第二章 重组人 S100A4 蛋白的表达与纯化 | 第22-55页 |
1 引言 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-43页 |
·仪器与设备 | 第23-25页 |
·实验材料和试剂 | 第25-26页 |
·常用溶液的配制 | 第26-29页 |
·实验方法 | 第29-36页 |
·重组 S100A4 的表达和纯化 | 第36-40页 |
·SDS-PAGE 和 Western blot 检测 | 第40-41页 |
·S100A4 内毒素含量测定 | 第41页 |
·Bradford 法测 S100A4 蛋白溶液浓度 | 第41-42页 |
·S100A4 蛋白活性的测定 | 第42-43页 |
3 实验结果 | 第43-52页 |
·重组人 S100A4 原核表达质粒的构建 | 第43-47页 |
·rhS100A4 重组蛋白的原核表达和纯化 | 第47-51页 |
·rhS100A4 重组蛋白的质量检测 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
第三章 S100A6 单克隆抗体的制备 | 第55-92页 |
1 引言 | 第55-57页 |
2 材料与方法 | 第57-77页 |
·仪器与设备 | 第57-58页 |
·实验材料和试剂 | 第58-59页 |
·主要溶液配制 | 第59-63页 |
·hS100A6 免疫 Balb/c 小鼠 | 第63-65页 |
·PEG 介导的小鼠脾脏和小鼠骨髓瘤细胞融合与杂交瘤筛选 | 第65-68页 |
·有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞 | 第68页 |
·Anti-hS100A6 单链抗体的构建 | 第68-74页 |
·杂交瘤细胞产生同种小鼠腹水的制备 | 第74-75页 |
·Hi Trap Protein G 预装柱纯化腹水中 S100A6 单抗 | 第75-77页 |
3 实验结果 | 第77-88页 |
·hS100A6 免疫 Balb/c 小鼠 | 第77-78页 |
·抗原最佳包被量的检测 | 第78-79页 |
·有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株 | 第79-82页 |
·抗体可变区的测序 | 第82-85页 |
·Anti-rhS100A6 抗体纯化以及检测 | 第85-88页 |
4 讨论 | 第88-92页 |
第四章 结论和展望 | 第92-94页 |
1. 结论 | 第92页 |
2. 展望 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-101页 |
附录 | 第101-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第106页 |