中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-29页 |
·斜纹夜蛾的发生、危害及防治 | 第10-12页 |
·斜纹夜蛾的发生与危害 | 第10页 |
·斜纹夜蛾的综合防治 | 第10-12页 |
·灰飞虱的发生、危害及防治 | 第12-13页 |
·灰飞虱的发生与危害 | 第12-13页 |
·灰飞虱的综合防治 | 第13页 |
·双酰基肼类杀虫剂作用机制 | 第13-18页 |
·昆虫蜕皮激素的分子机理 | 第13-15页 |
·双酰基肼类杀虫剂毒理机制 | 第15-17页 |
·双酰基肼类杀虫剂抗性机制 | 第17-18页 |
·昆虫蜕皮激素受体和超气门蛋白研究进展 | 第18-24页 |
·昆虫蜕皮激素受体结构和功能 | 第18-20页 |
·超气门蛋白功能与空间结构 | 第20-21页 |
·蜕皮激素与 EcR、USP 作用方式 | 第21-24页 |
·研究昆虫蜕皮激素受体和超气门蛋白的意义 | 第24-26页 |
·实验方法介绍 | 第26-28页 |
·序列比对和系统进化分析 | 第26-27页 |
·蛋白的原核表达 | 第27-28页 |
·本研究的目的意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-45页 |
·供试试剂、菌株和主要仪器 | 第29-32页 |
·供试试剂 | 第29页 |
·供试菌株、培养基 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·供试虫源 | 第32-33页 |
·总 RNA 的提取 | 第33-35页 |
·实验预准备 | 第33-34页 |
·Trizol 法提取总 RNA | 第34页 |
·RNA 质量检测 | 第34-35页 |
·斜纹夜蛾目的基因片段克隆及表达载体构建 | 第35-39页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第35页 |
·EcR、USP 目的片段克隆 | 第35-37页 |
·重组质粒鉴定 | 第37-38页 |
·序列分析 | 第38页 |
·重组质粒、原核表达载体双酶切 | 第38-39页 |
·表达载体连接、转化 | 第39页 |
·灰飞虱 EcR cDNA 全长克隆及原核表达系统的建立 | 第39-42页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第39-40页 |
·EcR 中间目的片段克隆 | 第40页 |
·3'RACE | 第40-41页 |
·5'RACE | 第41页 |
·序列分析 | 第41页 |
·原核表达系统构建 | 第41-42页 |
·蛋白的表达和纯化 | 第42-44页 |
·表达重组载体转化 | 第42页 |
·目的基因的诱导表达 | 第42-43页 |
·融合蛋白的纯化 | 第43-44页 |
·不同药剂(或化合物)初筛选系统的建立 | 第44-45页 |
·标记配基[3H]-PonA 浓度的确定 | 第44页 |
·不同药剂(或化合物)初筛选系统的建立 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-61页 |
·总 RNA 提取质量检测 | 第45页 |
·紫外分光光度法检测 | 第45页 |
·琼脂糖凝胶电泳法检测 | 第45页 |
·斜纹夜蛾目的基因片段克隆及表达载体构建 | 第45-53页 |
·巢式 PCR 结果检测 | 第45-46页 |
·重组质粒 PMD18-T-EcRcde、PMD18-T-USPcdePCR 鉴定 | 第46页 |
·EcR、USP 目的片段克隆测序结果及分析 | 第46-52页 |
·表达重组质粒 pEHISEGFPTEV-EcRcde、pEHISEGFPTEV-USPcde鉴定 | 第52-53页 |
·灰飞虱目的基因片段克隆及表达载体构建 | 第53-58页 |
·编码灰飞虱 EcR 的 cDNA 全长序列及氨基酸序列 | 第53-55页 |
·灰飞虱 EcR 基因分析 | 第55-58页 |
·灰飞虱 EcR 原核表达载体构建 | 第58页 |
·蛋白的表达和纯化 | 第58-59页 |
·不同药剂(或化合物)初筛选系统的建立 | 第59-61页 |
·标记配基[3H]-PonA 浓度的确定 | 第59-60页 |
·不同药剂(或化合物)初筛选系统的建立 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
·RNA 提取及检测 | 第61-62页 |
·目的基因片段克隆及表达载体构建 | 第62-63页 |
·目的蛋白纯化 | 第63-64页 |
·药剂(或化合物)初筛选系统的建立 | 第64-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
硕士期间发表论文情况 | 第76页 |