| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩写说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·血红素加氧酶的研究进展 | 第11-13页 |
| ·HO生物功能参与血红素代谢 | 第11-12页 |
| ·HO-1基因表达的调节 | 第12-13页 |
| ·HO-1和信号转导 | 第13页 |
| ·胆绿素还原酶的研究进展 | 第13-18页 |
| ·研究历史及现状 | 第14-15页 |
| ·酶学特性 | 第15-16页 |
| ·BVR微多样性 | 第16-17页 |
| ·分布 | 第17页 |
| ·BVR的功能 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第18-23页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的基本原理 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR技术中荧光标记方法的分类 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的实验方法 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR技术存在的问题及应用前景 | 第21-23页 |
| 第二章 HO和BVR基因片段的克隆和测序 | 第23-41页 |
| ·材料与方法 | 第23-26页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·凝胶电泳检测提取的RNA产物 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR扩增BVA和HO基因片段 | 第26-27页 |
| ·反转录步骤 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·特异性引物的PCR反应 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增体系 | 第27页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第28页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第28-29页 |
| ·纯化PCR扩增产物的克隆及测序 | 第29-31页 |
| ·克隆用载体 | 第29页 |
| ·纯化PCR产物与载体连接 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第30页 |
| ·转化反应 | 第30-31页 |
| ·菌液PCR鉴定及测序 | 第31页 |
| ·序列选取及比对 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-39页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆菌液PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·测序与序列分析 | 第33-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·引物设计 | 第39-40页 |
| ·阳性克隆子的鉴定 | 第40页 |
| ·目的基因的扩增和测序 | 第40-41页 |
| 第三章 相对定量Real Time-PCR检测HO和BVR基因表达水平 | 第41-57页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·Real-time PCR条件的优化及标准曲线和溶解曲线的分析 | 第43-49页 |
| ·Real-time PCR条件的优化 | 第43页 |
| ·标准品的制备及标准曲线的建立 | 第43-47页 |
| ·熔解曲线分析 | 第47-49页 |
| ·利用Real Time-PCR检测HO基因和BVR基因的表达量 | 第49-55页 |
| ·方法 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·组织RNA提取 | 第55页 |
| ·相对定量Real Time-PCR体系的建立 | 第55页 |
| ·Real Time-PCR过程中问题的解决和注意事项 | 第55-57页 |
| 全文结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
