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PCR技术在对典型有害藻类检测中的应用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 绪论第9-20页
   ·典型有害藻类第9-12页
     ·蓝藻第9-10页
     ·甲藻第10-12页
   ·毒素的合成及产毒基因的调控第12-15页
     ·蓝藻毒素第12-14页
     ·甲藻毒素第14-15页
   ·分子生物学技术在有害藻类检测中的应用第15-19页
     ·PCR 检测技术第16-17页
       ·常规 PCR第16页
       ·多重 PCR第16-17页
       ·定量 PCR第17页
     ·探针技术第17-18页
     ·基因芯片第18页
     ·酶联免疫吸附检测(ELISA)技术第18-19页
   ·研究目的和意义第19页
   ·参与课题第19-20页
第二章 双重 TaqMan 探针实时荧光 PCR 技术在对利玛原甲藻快速检测中的初步应用第20-30页
   ·材料与方法第21-24页
     ·实验材料来源及培养第21页
     ·DNA 提取及序列扩增第21-22页
     ·克隆及测序第22页
     ·序列分析第22页
     ·实时荧光定量 PCR第22-24页
       ·引物和探针的设计第22-23页
       ·TaqMan 探针实时荧光定量 PCR 检测方法建立第23-24页
       ·背景水样干扰实验第24页
   ·结果及分析第24-28页
     ·序列分析第24-25页
     ·引物分析第25-26页
     ·TaqMan 探针实时荧光定量 PCR 检测方法的建立第26-28页
       ·单重实时荧光定量 PCR 检测方法第26-27页
       ·双重实时荧光定量 PCR 检测方法第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 综合利用 PCR 技术对微囊藻的快速检测第30-52页
 第一节 运用多重 PCR 技术检测微囊藻第30-40页
     ·实验材料与方法第30-33页
       ·藻株第30-31页
       ·基因组 DNA 的提取和全细胞多重 PCR 反应的前处理第31页
       ·引物设计及分析第31-32页
       ·多重 PCR 检测方法的建立第32页
       ·多重 PCR 方法的检测范围测试第32页
       ·多重 PCR 方法的特异性测试第32-33页
     ·结果与分析第33-40页
       ·引物分析第33页
       ·多重 PCR 检测方法的建立第33-40页
 第二节 运用实时荧光定量 PCR 技术检测微囊藻第40-45页
     ·实验材料与方法第40-41页
       ·藻株第40页
       ·DNA 提取第40页
       ·引物设计及特异性验证第40页
       ·实时荧光定量 PCR 检测方法的建立第40-41页
       ·背景水样干扰实验第41页
     ·结果与分析第41-45页
       ·引物设计及特异性验证第41页
       ·实时荧光定量 PCR 检测方法建立第41-45页
 第三节 综合利用 PCR 技术对我国部分湖泊中微囊藻的检测第45-52页
     ·材料与方法第45-47页
       ·野外采样第45-47页
       ·水样中总基因组 DNA 的提取及全细胞 PCR 方法的前处理第47页
       ·综合利用 PCR 技术对我国部分湖泊中微囊藻的检测第47页
     ·结果与分析第47-51页
       ·水质分析第47页
       ·浮游植物及叶绿素 a 分析第47-50页
       ·多重 PCR 和实时荧光定量 PCR 检测第50-51页
     ·讨论第51-52页
第四章 基于 SSU rDNA 和线粒体 cox 1 序列初步分析甲藻中不同生态类群的演化规律第52-64页
   ·材料与方法第52-56页
     ·实验材料的来源及培养第52-53页
     ·DNA 提取及 PCR 扩增第53页
     ·序列及分子系统学分析第53-56页
   ·结果分析第56-59页
     ·序列分析第56页
     ·进化分析第56-58页
     ·系统进化树拓扑结构评估第58-59页
   ·讨论第59-64页
总结第64-65页
参考文献第65-76页
附录第76-78页
攻读硕士学位期间科研及工作情况第78-79页
致谢第79页

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