| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 本文所用主要缩略词 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 植物抗病分子机制研究进展 | 第11-21页 |
| 1 植物抗病反应的分子机制 | 第11-13页 |
| ·植物抗病反应的分子假说及其作用模式 | 第11-13页 |
| ·R基因介导的抗病信号传导 | 第13页 |
| 2 植物抗病基因的结构与分类 | 第13-16页 |
| 3 植物抗病基因克隆方法 | 第16-21页 |
| ·转座子标签法(Transposon tagging) | 第16页 |
| ·图位克隆法(Map-based cloning) | 第16-17页 |
| ·同源序列克隆法(Resistance gene analogs,RGAs) | 第17页 |
| ·通过研究mRNA差异表达筛选克隆基因 | 第17-18页 |
| ·通过mRNA差异显示技术 | 第17-18页 |
| ·cDNA代表性差式分析 | 第18页 |
| ·抑制性扣除杂交 | 第18页 |
| ·基于表达序列标签(EST)的基因克隆 | 第18-19页 |
| ·EST电子杂交基因克隆 | 第19页 |
| ·EST结合PCR技术基因克隆 | 第19页 |
| ·应用DNA芯片技术筛选新基因 | 第19-21页 |
| 第二章 棉花与黄萎病互作的分子机制 | 第21-27页 |
| 1 棉花黄萎病菌及其致病机制 | 第21-22页 |
| 2 棉花对黄萎病的抗病机制 | 第22-27页 |
| ·棉花与黄萎病菌的识别机制 | 第22-23页 |
| ·棉花对黄萎病的组织结构抗性 | 第23页 |
| ·棉花对黄萎病的生理生化抗性 | 第23-27页 |
| ·植保素与抗病性的关系 | 第23-24页 |
| ·单宁与抗病性的关系 | 第24页 |
| ·糖类物质与抗病性的关系 | 第24页 |
| ·酶与抗病性的关系 | 第24-27页 |
| 本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
| 第二部分 研究报告 | 第29-65页 |
| 第三章 棉花细胞色素C基因全长cDNA的克隆与表达分析 | 第29-49页 |
| 1 材料与方法 | 第30-39页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·接种方法 | 第30页 |
| ·取样 | 第30页 |
| ·RNA的提取 | 第30-32页 |
| ·准备工作 | 第30-31页 |
| ·试剂配制 | 第31-32页 |
| ·实验步骤 | 第32页 |
| ·RNA甲醛凝胶电泳 | 第32-34页 |
| ·试剂 | 第32-33页 |
| ·试剂配制 | 第33页 |
| ·实验步骤 | 第33-34页 |
| ·5’RACE与3’RACE | 第34-36页 |
| ·5’RACE步骤 | 第34-35页 |
| ·3’RACE步骤 | 第35-36页 |
| ·扩增产物回收、克隆及测序 | 第36-38页 |
| ·PCR扩增产物网收 | 第36页 |
| ·连接 | 第36-37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·测序 | 第38页 |
| ·生物信息学分析 | 第38-39页 |
| ·qPCR分析 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-46页 |
| ·RNA的提取与检测 | 第39-40页 |
| ·Ghcytc基因全长序列的获得 | 第40-41页 |
| ·Ghcytc基因的生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·棉花Ghcytc与其它物种中已克隆的细胞色素C的比较分析 | 第44-45页 |
| ·棉花Ghcytc基因的表达分析 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 一个TIR类抗病基因cDNA全长的克隆与特征分析 | 第49-65页 |
| 1 材料与方法 | 第49-56页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·总RNA的提取 | 第49-50页 |
| ·RNA反转录 | 第50-51页 |
| ·总RNA中DNA消化 | 第50-51页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第51页 |
| ·GbTIR基因cDNA全长的获得 | 第51-52页 |
| ·生物信息学分析 | 第52页 |
| ·qPCR(quantitative real time RT-PCR) | 第52页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第52-54页 |
| ·PAGE分析 | 第54-56页 |
| ·PAGE电泳的准备 | 第54页 |
| ·5%PAGE胶的制备 | 第54-55页 |
| ·预电泳 | 第55页 |
| ·上样 | 第55页 |
| ·银染 | 第55-56页 |
| ·基因定位 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-63页 |
| ·棉花TIR类抗病基因cDNA全长的克隆 | 第56-57页 |
| ·棉花GbTIR基因的生物信息学分析 | 第57-59页 |
| ·棉花GbTIR与其它植物抗病蛋白的TIR结构域比较分析 | 第59-61页 |
| ·棉花GbTIR基因的表达分析 | 第61-62页 |
| ·GbTIR基因的染色体定位 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 全文结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
