| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·我国乳业现状 | 第11页 |
| ·奶牛乳腺发育的研究进展 | 第11-12页 |
| ·乳腺发育与泌乳功能研究 | 第12-13页 |
| ·乳腺脂类代谢的研究 | 第13-16页 |
| ·影响脂肪酸合成的关键酶 | 第14-15页 |
| ·甘油三酯合成的分子生物学 | 第15-16页 |
| ·添加乳脂肪前体物对泌乳机制的影响 | 第16-17页 |
| ·脂肪酸合成相关基因的表达调控 | 第17-19页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞培养及鉴定 | 第20-22页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·获取细胞培养的乳腺组织 | 第21页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞原代培养 | 第21-22页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的传代及纯化 | 第22页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞鉴定 | 第22页 |
| ·奶牛乳腺腺泡模型的建立 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23页 |
| ·添加乙酸钠和丁酸钠 | 第23-24页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·荧光定量PCR | 第24-26页 |
| ·甘油三酯的测定 | 第26页 |
| ·Srebp基因的沉默 | 第26-28页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·siRNA转染及高沉默效率siRNA筛选 | 第27-28页 |
| ·转染效率检测 | 第28页 |
| ·数据处理及统计分析 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-41页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第29-31页 |
| ·乳腺上皮细胞的分离培养 | 第29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| ·腺泡细胞的形态学特征 | 第30-31页 |
| ·添加乳脂肪前体物后对乳脂肪相关基因和乳脂肪合成的影响 | 第31-38页 |
| ·基因和内参的溶解曲线和扩增曲线 | 第31-34页 |
| ·添加乳脂肪前体物对乳腺上皮细胞基因表达以及TG合成的影响 | 第34-36页 |
| ·添加乳脂肪前体物对乳腺腺泡基因表达以及TG合成的影响 | 第36-38页 |
| ·Srebp基因沉默检测结果 | 第38-41页 |
| ·转染效率检测结果 | 第38-39页 |
| ·高效抑制序列及最佳干扰时间筛选结果 | 第39-40页 |
| ·Srebp基因沉默后相关基因mRNA的表达 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞模型的建立 | 第41页 |
| ·奶牛乳腺腺泡的构建和培养 | 第41-42页 |
| ·乳脂肪前体物添加对奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响 | 第42页 |
| ·脂肪酸摄入、活化、合成、去饱和 | 第42-43页 |
| ·转录调节乳脂肪合成相关基因 | 第43页 |
| ·转染方法的选择 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
