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基于核酸适体识别和生物酶信号放大检测可卡因的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 前言第12-32页
 1 核酸适体研究进展第13-21页
   ·核酸适体的定义第13页
   ·核酸适体的来源及体外筛选第13-14页
   ·核酸适体的特点第14-15页
     ·靶物质的广泛性第14-15页
     ·高亲和性和高特异性第15页
     ·分子量小第15页
     ·稳定性好,可重复性第15页
     ·体外筛选、化学合成第15页
   ·核酸适体的信号转换方式及应用第15-21页
     ·基于电化学方法的信号转换原理第16-17页
     ·基于荧光法的信号转换原理第17-21页
       ·一般荧光法信号转换第17-18页
       ·工具酶荧光法信号转换第18-21页
 2 信号放大技术研究进展第21-31页
   ·荧光定量PCR 信号放大技术第22-25页
     ·荧光定量PCR 技术第22页
     ·荧光定量PCR 技术的特点第22-23页
     ·荧光定量PCR 技术的检测方法第23-24页
       ·SYBR Green Ⅰ检测第23-24页
       ·TaqMan 探针检测第24页
     ·荧光定量PCR 技术的应用第24-25页
   ·滚环复制信号放大技术第25-31页
     ·滚环复制技术的原理第25页
     ·滚环复制技术的特点第25-26页
     ·滚环复制的检测方法第26-27页
     ·滚环复制技术的应用第27-31页
       ·在单核苷酸多态性(SNPs)检测分析中的应用第27-28页
       ·在细胞原位检测分析中的应用第28-29页
       ·在蛋白质芯片中的应用第29页
       ·在纳米材料中的应用第29-31页
 3 本课题的意义及研究内容第31-32页
第二章 基于核酸适体和荧光定量 PCR 技术检测可卡因新 方法的研究第32-51页
 1 前言第32-33页
 2 实验部分第33-38页
   ·试剂第33-34页
   ·仪器第34页
   ·B 链的设计第34页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备第34-37页
     ·基本原理第34-35页
     ·凝胶浓度选择原则第35页
     ·15%聚丙烯酰胺凝胶的制备第35-37页
       ·安装电泳装置第35页
       ·灌制凝胶第35-36页
       ·上样与电泳第36页
       ·检测PCR 产物第36-37页
   ·实验方法第37-38页
     ·金电极处理第37页
     ·核酸适体的固定和杂交第37页
     ·荧光定量PCR 技术检测可卡因第37-38页
 3 结果与讨论第38-50页
   ·实验原理第38-39页
   ·检测方法的表征第39-44页
     ·裸金电极与A 链的结合第40-41页
     ·巯基封闭金电极结合位点第41-42页
     ·A 链与B 链的杂交第42-43页
     ·可卡因作用第43-44页
   ·不同浓度B 链标准曲线的绘制第44-47页
     ·B 链的紫外标准曲线第44-45页
     ·B 链的荧光定量PCR 标准曲线第45-47页
   ·可卡因的线性相关性及灵敏度的研究第47-49页
   ·检测方法特异性的研究第49-50页
 4 小结第50-51页
第三章 基于核酸适体和滚环复制技术检测可卡因新方法的研究第51-65页
 1 前言第51-52页
 2 实验部分第52-57页
   ·试剂第52-53页
   ·仪器第53页
   ·DNA 链的设计第53-54页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备第54页
   ·实验方法第54-57页
     ·Au 纳米粒子的制备第54-55页
     ·Au 纳米粒子在磁珠上的修饰第55-56页
     ·DNA 的固定和杂交第56页
     ·可卡因作用第56页
     ·信号放大及荧光检测第56-57页
 3 结果与讨论第57-64页
   ·实验原理第57-58页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第58-59页
   ·实验条件优化第59-61页
     ·滚环复制作用时间优化第59页
     ·分子信标杂交时间优化第59-60页
     ·滚环复制反应条件的优化第60-61页
   ·检测方法线性相关性及灵敏度的研究第61-63页
   ·检测方法可重复性的研究第63-64页
 4 小结第64-65页
结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表的学术论文目录第75-76页

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