摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-32页 |
1 核酸适体研究进展 | 第13-21页 |
·核酸适体的定义 | 第13页 |
·核酸适体的来源及体外筛选 | 第13-14页 |
·核酸适体的特点 | 第14-15页 |
·靶物质的广泛性 | 第14-15页 |
·高亲和性和高特异性 | 第15页 |
·分子量小 | 第15页 |
·稳定性好,可重复性 | 第15页 |
·体外筛选、化学合成 | 第15页 |
·核酸适体的信号转换方式及应用 | 第15-21页 |
·基于电化学方法的信号转换原理 | 第16-17页 |
·基于荧光法的信号转换原理 | 第17-21页 |
·一般荧光法信号转换 | 第17-18页 |
·工具酶荧光法信号转换 | 第18-21页 |
2 信号放大技术研究进展 | 第21-31页 |
·荧光定量PCR 信号放大技术 | 第22-25页 |
·荧光定量PCR 技术 | 第22页 |
·荧光定量PCR 技术的特点 | 第22-23页 |
·荧光定量PCR 技术的检测方法 | 第23-24页 |
·SYBR Green Ⅰ检测 | 第23-24页 |
·TaqMan 探针检测 | 第24页 |
·荧光定量PCR 技术的应用 | 第24-25页 |
·滚环复制信号放大技术 | 第25-31页 |
·滚环复制技术的原理 | 第25页 |
·滚环复制技术的特点 | 第25-26页 |
·滚环复制的检测方法 | 第26-27页 |
·滚环复制技术的应用 | 第27-31页 |
·在单核苷酸多态性(SNPs)检测分析中的应用 | 第27-28页 |
·在细胞原位检测分析中的应用 | 第28-29页 |
·在蛋白质芯片中的应用 | 第29页 |
·在纳米材料中的应用 | 第29-31页 |
3 本课题的意义及研究内容 | 第31-32页 |
第二章 基于核酸适体和荧光定量 PCR 技术检测可卡因新 方法的研究 | 第32-51页 |
1 前言 | 第32-33页 |
2 实验部分 | 第33-38页 |
·试剂 | 第33-34页 |
·仪器 | 第34页 |
·B 链的设计 | 第34页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第34-37页 |
·基本原理 | 第34-35页 |
·凝胶浓度选择原则 | 第35页 |
·15%聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第35-37页 |
·安装电泳装置 | 第35页 |
·灌制凝胶 | 第35-36页 |
·上样与电泳 | 第36页 |
·检测PCR 产物 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-38页 |
·金电极处理 | 第37页 |
·核酸适体的固定和杂交 | 第37页 |
·荧光定量PCR 技术检测可卡因 | 第37-38页 |
3 结果与讨论 | 第38-50页 |
·实验原理 | 第38-39页 |
·检测方法的表征 | 第39-44页 |
·裸金电极与A 链的结合 | 第40-41页 |
·巯基封闭金电极结合位点 | 第41-42页 |
·A 链与B 链的杂交 | 第42-43页 |
·可卡因作用 | 第43-44页 |
·不同浓度B 链标准曲线的绘制 | 第44-47页 |
·B 链的紫外标准曲线 | 第44-45页 |
·B 链的荧光定量PCR 标准曲线 | 第45-47页 |
·可卡因的线性相关性及灵敏度的研究 | 第47-49页 |
·检测方法特异性的研究 | 第49-50页 |
4 小结 | 第50-51页 |
第三章 基于核酸适体和滚环复制技术检测可卡因新方法的研究 | 第51-65页 |
1 前言 | 第51-52页 |
2 实验部分 | 第52-57页 |
·试剂 | 第52-53页 |
·仪器 | 第53页 |
·DNA 链的设计 | 第53-54页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-57页 |
·Au 纳米粒子的制备 | 第54-55页 |
·Au 纳米粒子在磁珠上的修饰 | 第55-56页 |
·DNA 的固定和杂交 | 第56页 |
·可卡因作用 | 第56页 |
·信号放大及荧光检测 | 第56-57页 |
3 结果与讨论 | 第57-64页 |
·实验原理 | 第57-58页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58-59页 |
·实验条件优化 | 第59-61页 |
·滚环复制作用时间优化 | 第59页 |
·分子信标杂交时间优化 | 第59-60页 |
·滚环复制反应条件的优化 | 第60-61页 |
·检测方法线性相关性及灵敏度的研究 | 第61-63页 |
·检测方法可重复性的研究 | 第63-64页 |
4 小结 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |