摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-39页 |
一、 对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第12-14页 |
二、 对虾白斑综合症病毒的大小和形态结构 | 第14-15页 |
三、 WSSV 的主要宿主和主要的替代感染动物模型 | 第15-17页 |
四、 WSSV 可能的侵染过程及其易感组织 | 第17-19页 |
五、 WSSV 的分离纯化方法和检测技术 | 第19-21页 |
六、 WSSV 的基因组学研究 | 第21-27页 |
七、 WSSV 的蛋白质组学研究 | 第27-37页 |
·WSSV 的主要结构蛋白 | 第27-35页 |
·对虾白斑综合症病毒的非结构蛋白 | 第35-37页 |
八、本研究的选题依据及意义 | 第37-39页 |
第二章 对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus)的一些基本性质的研究 | 第39-54页 |
一、 材料与方法 | 第39-43页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·病毒的感染和增殖 | 第40页 |
·完整病毒的纯化 | 第40-41页 |
·病毒膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第41页 |
·电镜观察 WSSV 粒子以及核衣壳 | 第41页 |
·WSSV 中膜蛋白和核衣壳比例的研究 | 第41-42页 |
·WSSV 基因组 DNA 的提取 | 第42页 |
·WSSV 基因组 DNA 占其干重的比例研究 | 第42-43页 |
·病毒溶液的 OD600与其浓度的换算关系研究 | 第43页 |
·完整 WSSV 粒子和核衣壳不同比例下 OD 值的变化 | 第43页 |
二、 计算过程和结果 | 第43-49页 |
·基因组 DNA 占 WSSV 干重的比例及 WSSV 干重 | 第43-44页 |
·病毒溶液的 OD600与其浓度的换算关系 | 第44-45页 |
·WSSV 中膜和核衣壳所占的比例 | 第45-46页 |
·膜蛋白中四种主要膜蛋白(VP28、VP26、VP24、VP19)的含量比例 | 第46-47页 |
·四种主要膜蛋白(VP28、VP26、VP24、VP19)的相对比例 | 第47-48页 |
·提取的 WSSV 和核衣壳的电子显微镜照片 | 第48页 |
·一个 WSSV 病毒粒子中四种主要膜蛋白的数量 | 第48-49页 |
·WSSV 粒子和核衣壳比例的变化对 OD 值的影响 | 第49页 |
三、 讨论 | 第49-54页 |
第三章 细菌在克氏原螯虾感染 WSSV 后死亡过程中的作用 | 第54-74页 |
1、前言 | 第54-57页 |
2.材料与方法 | 第57-60页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·16SrDNA PCR 产物的克隆和测序及种属的鉴定 | 第58页 |
·WSSV 的感染和纯化 | 第58页 |
·注射双抗 | 第58页 |
·虾血淋巴中 DNA 提取方法 | 第58-59页 |
·实时荧光定量 PCR | 第59页 |
·螯虾血细胞的抽取与观察 | 第59页 |
·虾血淋巴中菌落种群变化的检测 | 第59-60页 |
3.结果与分析 | 第60-70页 |
·螯虾在注射 WSSV 后不同阶段血细胞观察 | 第60-61页 |
·感染 WSSV 后螯虾血细胞数量变化 | 第61-62页 |
·感染 WSSV 的螯虾注射抗生素对其死亡率的影响 | 第62-64页 |
·抗生素对于螯虾体内 WSSV 增殖的影响 | 第64页 |
·感染 WSSV 后的螯虾体内细菌种群及其数量变化研究 | 第64-66页 |
·细菌的 16SrDNA 扩增结果 | 第66-70页 |
4.讨论 | 第70-74页 |
第四章 对虾白斑综合症病毒(WSSV)囊膜表面蛋白的研究 | 第74-81页 |
一、 材料与方法 | 第75-77页 |
·材料 | 第75页 |
·方法 | 第75-77页 |
·WSSV 病毒粒子的感染和提取 | 第75页 |
·凡纳滨对虾鳃细胞膜蛋白组分的提取 | 第75-76页 |
·Sulfo-SBED 生物素标记程序 | 第76页 |
·生物素标记转移和检测 | 第76-77页 |
二、 结果和分析 | 第77-79页 |
三、 讨论 | 第79-81页 |
第五章 WSSV 的 wsv083 基因的研究 | 第81-94页 |
一、 材料与方法 | 第82-85页 |
·材料 | 第82页 |
·方法 | 第82-85页 |
·共转化程序 | 第82页 |
·虾腹足肌肉中 DNA 提取程序 | 第82-83页 |
·螯虾血淋巴 DNA 提取程序 | 第83页 |
·CIAP 对 wsv083 蛋白进行去除磷酸化处理 | 第83-84页 |
·激酶活性研究 | 第84页 |
·Sulfo-SBED 生物素标记程序 | 第84页 |
·生物素标记转移和检测 | 第84-85页 |
二、 结果 | 第85-91页 |
·wsv083 的扩增和重组质粒的双酶切鉴定 | 第85-86页 |
·wsv083 基因的表达与 Western blotting 检测 | 第86-87页 |
·wsv083 的激酶活性研究 | 第87-91页 |
三、 讨论 | 第91-94页 |
第六章 本研究的主要结论、创新点及研究展望 | 第94-97页 |
1、主要结论 | 第94-95页 |
2、本研究的主要创新点 | 第95页 |
3、进一步研究展望 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |
附录 | 第110-125页 |
1、缩略词 | 第110-111页 |
2、常用溶液及培养基的配制 | 第111-115页 |
3、常规实验方法 | 第115-119页 |
4、细菌的 16SrDNA 测序结果 | 第119-122页 |
5、主要仪器设备 | 第122-125页 |
致谢 | 第125页 |