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济南市周边废水环境中耐药大肠埃希菌的分离、分布及其整合子在耐药机制中的相关性研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
縮略符号说明第13-15页
第一章 前言第15-34页
   ·细菌的耐药性第16-23页
     ·细菌耐药性现状第16-17页
     ·细菌常见的几种耐药性机制第17-21页
       ·细菌生物被膜的形成第18页
       ·细菌改变细胞通透性第18-19页
       ·细菌药物作用靶位改变第19页
       ·细菌产生灭活酶或钝化酶第19-20页
       ·细菌主动药物外排机制第20-21页
       ·细菌通过基因水平转移(HGT)获得耐药性第21页
     ·细菌耐药性的预防措施第21-23页
   ·整合子-基因盒系统第23-32页
     ·整合子定义第23-24页
     ·整合子的结构第24-25页
     ·整合子的分类第25-27页
     ·基因盒简介第27-30页
       ·基因盒定义第27页
       ·基因盒的结构第27-28页
       ·基因盒的种类第28-29页
       ·基因盒的排列方式第29-30页
       ·基因盒的来源第30页
     ·整合子对基因盒的捕获、剪切及表达第30-32页
   ·大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)亚群分类第32页
   ·立体依据与意义第32-34页
第二章 水环境中耐药大肠埃希菌的筛选及药敏实验第34-46页
   ·引言第34页
   ·实验材料与方法第34-41页
     ·实验材料第34-37页
       ·水样采集第34-35页
       ·培养液(broth)和培养基(Medium)第35-36页
       ·筛选耐药大肠埃希菌所用抗生素的配制及保存方法第36-37页
       ·实验对照菌种及主要试剂第37页
       ·主要仪器第37页
     ·实验方法第37-41页
       ·筛选耐药的大肠埃希菌第37-38页
       ·大肠埃希菌药物敏感试验——K-B纸片琼脂扩散法第38-41页
       ·耐药性大肠埃希菌对抗菌药物的抗性与采集地点的统计学分析第41页
   ·结果与讨论第41-45页
     ·医院和小清河中水样耐药大肠埃希菌的筛选第41-43页
     ·医院和小清河中耐药大肠埃希菌的抗性谱第43-45页
   ·本章小结第45-46页
第三章 对医院及小清河水环境中各分离出的209株耐药性大肠埃希菌生理型分析第46-58页
   ·引言第46页
   ·实验材料与方法第46-53页
     ·实验材料第46-48页
       ·实验菌株第46-47页
       ·实验溶液及其配制第47页
       ·实验试剂及仪器第47-48页
         ·实验试剂第47-48页
         ·实验仪器第48页
       ·实验方法第48-53页
       ·CTAB法提取大肠埃希菌基因组DNA第48-49页
       ·PCR对大肠埃希菌进行分型第49-51页
       ·琼脂糖凝胶电泳第51-52页
       ·不同种类的大肠埃希菌与它们的抗性谱结果统计学分析第52-53页
   ·实验结果与讨论第53-56页
     ·检测CTAB法提取的基因组DNA质量第53-54页
     ·PCR对大肠埃希菌进行分型第54-55页
     ·不同类型大肠埃希菌的抗性谱比较第55-56页
   ·本章小结第56-58页
第四章 耐药性大肠埃希菌分离株中1、2和3型整合子的检测与分析第58-65页
   ·引言第58-59页
   ·实验材料与方法第59-60页
     ·实验材料第59页
       ·实验样品第59页
       ·实验试剂与溶液第59页
     ·实验方法第59-60页
       ·PCR检测1型,2型及3型整合酶第59-60页
       ·琼脂糖凝胶电泳第60页
       ·耐药大肠埃希菌整合子检测结果的统计学分析第60页
   ·实验结果与讨论第60-63页
     ·PCR检测耐药大肠埃希菌中所携带的整合子类型第60-61页
     ·整合子在不同类型的耐药性大肠埃希菌中的分布情况第61-62页
     ·含整合子大肠埃希菌与不含整合子抗性谱结果的统计学分析第62-63页
   ·本章小结第63-65页
第五章 耐药性大肠埃希菌所有整合子的基因盒阵列检测-RFLP法第65-77页
   ·引言第65页
   ·实验材料与方法第65-73页
     ·实验材料第65-66页
       ·实验菌株、质粒及限制性内切酶第65-66页
       ·实验试剂第66页
     ·实验方法第66-73页
       ·PCR扩增1,2型整合子可变区所含基因盒阵列第66-67页
       ·琼脂糖凝胶电泳第67页
       ·限制性内切酶EcoRⅡ酶切1,2型整合子可变区PCR产物第67-68页
       ·基因克隆实验第68-71页
         ·构建载体第68页
         ·质粒转化实验第68-71页
       ·碱法小提质粒第71-72页
       ·重组质粒的筛选、鉴定及测序第72-73页
   ·实验结果与讨论第73-75页
     ·1型整合子大肠埃希菌所含的基因盒阵列第73-74页
     ·2型整合子大肠埃希菌所含的基因盒阵列第74-75页
   ·本章小结第75-77页
第六章 全文总结第77-79页
参考文献第79-88页
致谢第88-89页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第89-90页
学位论文评阅及答辩情况表第90页

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