| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-38页 |
| ·大豆胞囊线虫及其危害 | 第17-18页 |
| ·大豆胞囊线虫的分类地位及生活史 | 第17页 |
| ·大豆胞囊线虫寄主范围及危害症状 | 第17-18页 |
| ·植物寄生线虫与寄主之间的分子互作 | 第18-23页 |
| ·大豆胞囊线虫致病相关基因 | 第18-23页 |
| ·植物寄主抗病基因 | 第23-31页 |
| ·基因对基因学说 | 第23-24页 |
| ·植物寄生线虫抗病基因 | 第24-27页 |
| ·植物寄主抗性机制 | 第27-31页 |
| ·植物抗病基因克隆方法 | 第31-38页 |
| ·转座子标签技术（Transposon tagging） | 第31页 |
| ·图位克隆技术（Map-based cloning） | 第31-32页 |
| ·抗病基因同源克隆技术（Resistance-gene analog，RGA） | 第32页 |
| ·植物基因差异表达分析及克隆方法 | 第32-38页 |
| 第二章 大豆胞囊线虫的鉴定及大豆根部接种观察 | 第38-49页 |
| ·大豆胞囊线虫的鉴定 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·大豆根部组织接种观察 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-45页 |
| ·接种 SCN 大豆根尖的分子生物学检测 | 第45-48页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 大豆胞囊线虫诱导小粒黑豆 SSH-cDNA 文库的构建 | 第49-68页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·线虫繁殖与孵化 | 第50页 |
| ·主要酶及生化试剂 | 第50-51页 |
| ·仪器设备 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-61页 |
| ·接种及取样 | 第52页 |
| ·大豆根尖总 RNA 的提取 | 第52页 |
| ·总 RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第52-53页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第53-54页 |
| ·LD-PCR cDNA 扩增 | 第54页 |
| ·柱层析双链 cDNA | 第54-55页 |
| ·双链 cDNA Rsa I 酶切 | 第55页 |
| ·Rsa I 酶切的 Tester cDNA 片段与接头连接 | 第55-56页 |
| ·第一次差减杂交 | 第56-57页 |
| ·第二次差减杂交 | 第57页 |
| ·第一次 PCR 扩增 | 第57-58页 |
| ·第二次 PCR 扩增 | 第58-59页 |
| ·第二次 PCR 产物的纯化 | 第59页 |
| ·差减文库的 TA 克隆、转化 | 第59-60页 |
| ·转化重组子的 PCR 检测 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·样品总 RNA 浓度与质量的检测 | 第61-62页 |
| ·双链 cDNA 合成检测 | 第62页 |
| ·cDNA 合成及 Rsa I 酶切双链 cDNA 效果分析 | 第62-63页 |
| ·抑制消减 PCR 电泳检测 | 第63-64页 |
| ·消减文库检测 | 第64页 |
| ·文库插入片段大小检测 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| ·获得高质量和高浓度的总 RNA 是构建文库的前提 | 第65-66页 |
| ·采用 SMART 技术TM合成 cDNA 的优越性 | 第66-67页 |
| ·构建大豆 EST 基因差异表达文库的必要性 | 第67-68页 |
| 第四章 SSH-cNDA 文库差异表达基因的筛选及功能分析 | 第68-83页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·主要化学试剂 | 第68页 |
| ·试验药品的配置 | 第68-69页 |
| ·杂交膜的制备 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| ·DIG-cDNA 标记 | 第69-70页 |
| ·杂交探针标记效率检测 | 第70页 |
| ·样品的点膜及固定 | 第70-71页 |
| ·预杂交及杂交 | 第71页 |
| ·洗膜及信号检测 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-78页 |
| ·杂交探针标记效率分析 | 第72页 |
| ·反向 Northern 斑点杂交分析 | 第72-73页 |
| ·测序与序列生物信息学分析 | 第73-76页 |
| ·ESTs 在 WEGO 中的功能聚类及分析 | 第76-77页 |
| ·SSH-cDNA 文库中高频率表达 ESTs 功能聚类及分析 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-83页 |
| ·防御相关反应基因 | 第78-79页 |
| ·代谢与生物合成途径 | 第79-80页 |
| ·蛋白合成基因 | 第80页 |
| ·能量代谢 | 第80页 |
| ·运输因子 | 第80-81页 |
| ·细胞周期活性及细胞结构 | 第81页 |
| ·转录调节与信号传导 | 第81-83页 |
| 第五章 实时荧光定量检测抗病相关基因的表达 | 第83-96页 |
| ·材料 | 第83-84页 |
| ·植物材料 | 第83页 |
| ·线虫繁殖 | 第83页 |
| ·主要生化试剂 | 第83-84页 |
| ·主要仪器设备 | 第84页 |
| ·引物设计软件 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-87页 |
| ·接种及取样方法 | 第84页 |
| ·大豆根尖组织总 RNA 的提取及 DNA 的去除 | 第84-85页 |
| ·cDNA 的反转录合成 | 第85页 |
| ·Real Time PCR 反应体系及反应程序设置 | 第85页 |
| ·Real Time PCR 引物设计 | 第85-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-91页 |
| ·生物合成和代谢 | 第87页 |
| ·糖代谢和能量相关 | 第87页 |
| ·运输因子 | 第87页 |
| ·植物与病原互作和植物防御基因 | 第87-88页 |
| ·信号传导 | 第88页 |
| ·转录因子 | 第88页 |
| ·细胞周期调节、细胞组成.和蛋白合成的基因 | 第88-91页 |
| ·讨论 | 第91-96页 |
| 第六章 大豆谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆及表达分析 | 第96-108页 |
| ·材料 | 第96-97页 |
| ·植物材料 | 第96页 |
| ·线虫繁殖与.接种 | 第96-97页 |
| ·主要酶及化学试剂 | 第97页 |
| ·菌种及载体 | 第97页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第97页 |
| ·方法 | 第97-100页 |
| ·GmGPX1 特异性引物及 Real Time PCR 引物的设计 | 第97页 |
| ·核酸的提取及 cDNA 合成 | 第97-98页 |
| ·GmGPX1 基因的克隆 | 第98-99页 |
| ·GmGPX1 实时荧光定量 RT-PCR 表达分析 | 第99-100页 |
| ·结果与分析 | 第100-105页 |
| ·GmGPX1 基因的克隆 | 第100页 |
| ·GmGPX1 生物信息学分析 | 第100-105页 |
| ·讨论 | 第105-108页 |
| 第七章 大豆 GmHs1pro-1的基因克隆及表达分析 | 第108-115页 |
| ·材料 | 第108-109页 |
| ·植物材料 | 第108页 |
| ·线虫繁殖与接种 | 第108-109页 |
| ·主要酶及化学试剂 | 第109页 |
| ·菌种及载体 | 第109页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第109页 |
| ·方法 | 第109-111页 |
| ·GmHslPro-1特异性引物及 Real Time PCR 引物的设计 | 第109页 |
| ·核酸的提取及 cDNA 合成 | 第109-110页 |
| ·GmHslPro-1基因的克隆 | 第110页 |
| ·GmHslPro-1实时荧光定量 RT-PCR 表达分析 | 第110-111页 |
| ·结果与分析 | 第111-113页 |
| ·GmHslPro-1基因的克隆 | 第111页 |
| ·GmHslPro-1生物信息学分析 | 第111-112页 |
| ·GmHslPro-1基因根尖组织诱导表达分析 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-115页 |
| 第八章 讨论、结论及展望 | 第115-120页 |
| 1 讨论与结论 | 第115-119页 |
| ·SSH-cDNA 文库的构建 | 第115页 |
| ·SSH-cDNA 文库中抗病相关基因的筛选及生物学功能分析 | 第115-116页 |
| ·Real Time PCR 检测抗病相关基因的表达谱分析 | 第116-118页 |
| ·大豆谷胱甘肽过氧化物酶及 GmHslPro-1的克隆、生物信息学及诱导表达分析 | 第118-119页 |
| 2 下一步研究展望 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-134页 |
| 附录 | 第134-139页 |
| 中英文缩写表 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第141-142页 |
| 论文图表统计 | 第142-143页 |
