| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| ·禽流感病毒的历史 | 第12-13页 |
| ·禽流感的亚型分类和命名 | 第13页 |
| ·国外禽流感流行情况 | 第13-15页 |
| ·国内禽流感情况 | 第15页 |
| ·禽流感病毒的病原学特征 | 第15-17页 |
| ·禽流感病毒的形态和结构 | 第15-16页 |
| ·禽流感病毒的理化特征 | 第16页 |
| ·禽流感病毒培养条件 | 第16-17页 |
| ·禽流感病毒的分子生物学特征 | 第17-20页 |
| ·禽流感病毒基因组蛋白的功能 | 第17-18页 |
| ·禽流感病毒的抗原变异 | 第18-19页 |
| ·禽流感病毒毒力的分子基础 | 第19-20页 |
| ·禽流感病毒的流行特点 | 第20-23页 |
| ·宿主多样化 | 第20-21页 |
| ·水禽和鸟类可能是AIV 的主要传染源 | 第21-22页 |
| ·AIV 的跨物种传播 | 第22-23页 |
| ·禽流感的检测方法 | 第23-29页 |
| ·病毒的分离 | 第24页 |
| ·血清学检测 | 第24-29页 |
| 第二章 重组H5 亚型禽流感病毒HA1 抗原的制备 | 第29-36页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·质粒、菌株和血清 | 第30页 |
| ·酶与生化试剂 | 第30页 |
| ·常用缓冲液 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·pET-28a H5/HA1 的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 电泳检测 | 第31页 |
| ·重组HA1 蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·Western-blot 鉴定表达蛋白反应性 | 第32页 |
| ·纯化重组HA1 蛋白的特异性试验 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·重组HA1 蛋白的表达 | 第33页 |
| ·重组HA1 蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·Western-blot 鉴定HA1 蛋白的反应性 | 第34页 |
| ·重组HA1 蛋白的特异性 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 兔抗鹅IGG-HRP 酶标抗体的制备与检测 | 第36-41页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·试剂和实验动物 | 第37页 |
| ·常用缓冲液 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·鹅IgG 的提纯及检测 | 第37-38页 |
| ·兔抗鹅IgG 的制备 | 第38页 |
| ·辣根过氧化物酶标记兔抗鹅IgG | 第38页 |
| ·酶标抗体的质量检测 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·鹅IgG 的制备 | 第39页 |
| ·兔抗鹅IgG 的制备 | 第39页 |
| ·兔抗鹅IgG 的HRP 标记试验 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 鹅H5 亚型禽流感抗体HA1-IELISA 检测方法的建立 | 第41-58页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·ELISA 抗原 | 第42页 |
| ·HRP 标记兔抗鹅IgG | 第42-43页 |
| ·血清 | 第43页 |
| ·试剂和仪器 | 第43页 |
| ·常用缓冲液 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·HA1-iELISA 操作程序 | 第43页 |
| ·HA1-iELISA 最佳工作条件的确定 | 第43-45页 |
| ·HA1-iELISA 判定标准的确定 | 第45页 |
| ·HA1-iELISA 特异性试验 | 第45页 |
| ·HA1-iELISA 稳定性和重复性试验 | 第45-46页 |
| ·HI、VN、全病毒ELISA 及HA1-iELISA 监测疫苗免疫鹅抗体水平变化规律 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-55页 |
| ·HA1-iELISA 最佳反应条件的确定 | 第47-50页 |
| ·HA1-iELISA 判断标准的确定 | 第50页 |
| ·HA1-iELISA 特异性试验 | 第50-51页 |
| ·HA1-iELISA 重复性试验 | 第51-52页 |
| ·HI、VN、全病毒ELISA 及HA1-iELISA 检测免疫鹅H5 亚型AIV 抗体 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第五章 水禽H5 亚型禽流感抗体检测试剂盒组装及保质期试验 | 第58-66页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·抗原、酶标抗体和血清 | 第58-59页 |
| ·试剂与仪器 | 第59页 |
| ·常用缓冲液 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| ·酶标板的制备及保存期试验 | 第59页 |
| ·标准阴性、阳性血清工作液的制备和保存期试验 | 第59-60页 |
| ·HRP 标记兔抗鹅IgG 工作液的制备和保存期试验 | 第60页 |
| ·底物的制备和保存期试验 | 第60页 |
| ·样品稀释液的制备和保存 | 第60页 |
| ·洗涤液的制备和保存 | 第60页 |
| ·终止液的配制 | 第60页 |
| ·试剂盒的组装 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| ·酶标板在不同保存条件下的保质时间 | 第60-62页 |
| ·标准阳性、阴性血清工作液保存期 | 第62-63页 |
| ·HRP 标记兔抗鹅IgG 工作液的保存期 | 第63页 |
| ·底物的保存期试验 | 第63页 |
| ·其它溶液的保存 | 第63-64页 |
| ·试剂盒的组装 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第六章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 常用缓冲液 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
