| 中文摘要 | 第1-18页 |
| 英文摘要 | 第18-27页 |
| 符号说明 | 第27-28页 |
| 第一部分 抑癌基因DBC2在非家族性乳腺癌中的表达状况及其临床意义 | 第28-43页 |
| 前言 | 第28-31页 |
| 一.DBC2的来源、结构与功能 | 第29-30页 |
| 二.DBC2与肿瘤的关系 | 第30-31页 |
| 三.存在问题与研究目的 | 第31页 |
| 实验材料 | 第31-34页 |
| 一.病例资料 | 第31-32页 |
| 二.细胞系及组织标本 | 第32页 |
| 三.细胞培养试剂 | 第32页 |
| 四.RT-PCR试剂 | 第32-33页 |
| 五.电泳试剂 | 第33页 |
| 六.免疫组化用试剂 | 第33页 |
| 七.主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 实验方法 | 第34-37页 |
| 一.细胞的培养及组织保存 | 第34页 |
| 二.RT-PCR实验 | 第34-36页 |
| 三.免疫组织化学 | 第36-37页 |
| 四.统计学处理方法 | 第37页 |
| 结果 | 第37-39页 |
| 一.DBC2在胚胎组织、细胞及不同肿瘤细胞系中的表达 | 第37页 |
| 二.DBC2在正常乳腺及乳腺癌组织中的表达 | 第37-38页 |
| 三.DBC2的表达缺失与患者临床病理的相关性分析 | 第38页 |
| 四.DBC2在乳腺癌中的表达状态与病人预后的关系 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 第二部分 外源性DBC2在乳腺癌细胞系中的稳定表达及对肿瘤细胞恶性行为的影响 | 第43-62页 |
| 前言 | 第43-46页 |
| 实验材料 | 第46-49页 |
| 一.细胞系及载体构建 | 第46页 |
| 二.质粒的转染及筛选 | 第46页 |
| 三.RNA提取及RT-PCR实验试剂 | 第46-47页 |
| 四.Western Blot检测 | 第47-48页 |
| 五.细胞功能实验主要试剂 | 第48-49页 |
| 六.主要仪器设备 | 第49页 |
| 实验方法 | 第49-54页 |
| 一.DBC2阳性克隆的筛选及鉴定 | 第49-50页 |
| 二.阳性克隆细胞的总RNA提取及RT-PCR鉴定 | 第50页 |
| 三.阳性克隆细胞的蛋白提取及Western Blot鉴定 | 第50-51页 |
| 四.MTT法细胞增殖抑制的检测 | 第51页 |
| 五.克隆形成实验 | 第51-52页 |
| 六.流式细胞术检测细胞周期 | 第52页 |
| 七.细胞形态学HE染色法(苏木素-伊红染色)检测细胞凋亡 | 第52页 |
| 八.流式细胞术Annexin V-APC/PI法检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
| 九.细胞侵袭能力的检测 | 第53页 |
| 十.细胞迁移能力的检测 | 第53-54页 |
| 十一.统计学处理方法 | 第54页 |
| 结果 | 第54-57页 |
| 一.DBC2阳性克隆的筛选及鉴定 | 第54-55页 |
| 二.DBC2表达对乳腺癌细胞形态的影响 | 第55页 |
| 三.DBC2对乳腺癌细胞的生长抑制作用 | 第55页 |
| 四.DBC2对乳腺癌细胞克隆形成的影响 | 第55页 |
| 五.DBC2对乳腺癌细胞周期的影响 | 第55-56页 |
| 六.DBC2对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第56页 |
| 七.DBC2对乳腺癌细胞侵袭能力和迁移能力的影响 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 附图表 | 第62-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读博士期间发表论文及获得奖励 | 第88-90页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第90-91页 |
| 附件1 英文文章1 | 第91-99页 |
| 附件2 英文文章2 | 第99-108页 |
| 附件3 英文文章3 | 第108-127页 |
