中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-29页 |
·SIRNA 技术研究进展 | 第15-18页 |
·siRNA 的设计 | 第15-16页 |
·siRNA 的合成 | 第16页 |
·siRNA 导入细胞内的方法 | 第16-17页 |
·siRNA 技术的应用 | 第17-18页 |
·问题与展望 | 第18页 |
·SMADS 蛋白的研究进展 | 第18-22页 |
·Smads 蛋白家族的结构与功能 | 第18-19页 |
·Smads 与细胞增殖 | 第19页 |
·Smads 与心血管疾病 | 第19-20页 |
·Smads 与凋亡 | 第20-21页 |
·Smads 与血管平滑肌细胞 | 第21页 |
·Smads 与神经系统 | 第21-22页 |
·展望 | 第22页 |
·参考文献 | 第22-29页 |
第2章 PC12 细胞诱导的神经细胞 OGD 模型的制备和鉴定 | 第29-45页 |
·材料和方法 | 第29-34页 |
·实验细胞 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-34页 |
·结果 | 第34-41页 |
·形态学观察 | 第34-36页 |
·PC12 细胞转化为神经细胞的的鉴定 | 第36-38页 |
·神经细胞 OGD 模型的制备及鉴定结果 | 第38-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
·小结 | 第43页 |
·参考文献 | 第43-45页 |
第3章 靶向沉默 SMAD7 基因及沉默效果的检测 | 第45-61页 |
·材料和方法 | 第45-51页 |
·实验材料 | 第45-46页 |
·实验仪器 | 第46页 |
·主要溶液的配制 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-51页 |
·统计学处理 | 第51页 |
·结果 | 第51-56页 |
·转染效率检测结果 | 第51-52页 |
·MTT 法细胞存活率检测 | 第52-53页 |
·Real time-PCR 测定 Smad7 基因 mRNA 的表达 | 第53-55页 |
·Western blot 检测 Smad7 基因蛋白表达 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57页 |
·参考文献 | 第57-61页 |
第4章 SMAD7-SIRNA 对 ACTA/SMADS 信号转导通路的影响 | 第61-69页 |
·实验材料 | 第61-62页 |
·主要试剂 | 第61-62页 |
·主要仪器 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-65页 |
·细胞培养、细胞分化及 OGD 模型制备 | 第62页 |
·细胞转染 | 第62-63页 |
·Smad7、ActA、p300 mRNA 检测(Real time PCR) | 第63-64页 |
·免疫印迹检测 Smad7、ActA、p300 蛋白表达 | 第64-65页 |
·统计学处理 | 第65页 |
·结果 | 第65-66页 |
·Real time-PCR 检测 Smad7、ActA、p300 mRNA 表达 | 第65-66页 |
·免疫印迹检测 Smad7、ActA、p300 蛋白表达 | 第66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·小结 | 第67页 |
·参考文献 | 第67-69页 |
第5章 SMAD7-SIRNA 对神经细胞缺血损伤细胞凋亡的影响 | 第69-77页 |
·实验材料 | 第69-70页 |
·主要试剂 | 第69页 |
·主要仪器 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-71页 |
·细胞培养,细胞分化及 OGD 模型制备 | 第70页 |
·细胞转染 | 第70页 |
·凋亡小体的检测(DAPI 染色) | 第70页 |
·细胞凋亡检测(流式细胞仪检测) | 第70-71页 |
·Procaspase-3 蛋白检测(免疫印迹) | 第71页 |
·统计学处理 | 第71页 |
·结果 | 第71-73页 |
·凋亡小体检测 | 第71-72页 |
·FCM 检测细胞凋亡 | 第72-73页 |
·免疫印迹检测 Procaspase-3 蛋白表达 | 第73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·小结 | 第75页 |
·参考文献 | 第75-77页 |
结论 | 第77-79页 |
攻读博士期间获得的成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |