| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-29页 |
| 一、植物对低温的适应机理 | 第10-23页 |
| 1、低温对植物的伤害机理 | 第10-13页 |
| ·冷害机理 | 第10-12页 |
| ·冻害机理 | 第12-13页 |
| 2、植物的抗冷机理 | 第13-14页 |
| 3、植物冷驯化机理 | 第14-23页 |
| ·植物冷驯化中的生理变化 | 第15-16页 |
| ·抗冻基因及其在抗冻中的作用 | 第16-20页 |
| (1) 相关基因的克隆 | 第16-17页 |
| (2) COR基因功能 | 第17-20页 |
| ·低温信号传导与调控途径研究进展 | 第20-23页 |
| 二、BL提高植物抗逆性研究进展 | 第23-28页 |
| 1、温度逆境 | 第23-25页 |
| ·低温逆境 | 第23-24页 |
| ·高温逆境 | 第24-25页 |
| 2、盐份逆境 | 第25-26页 |
| 3、水分逆境 | 第26-27页 |
| 4、病原物侵染 | 第27-28页 |
| 三、学位论文的立题依据和意义 | 第28-29页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第29-39页 |
| 一、实验材料 | 第29页 |
| 1、植物材料 | 第29页 |
| 2、引物、测序 | 第29页 |
| 二、实验仪器和设备 | 第29-30页 |
| 三、实验试剂 | 第30-31页 |
| 1、常用的分子生物学试剂 | 第30页 |
| 2、常用培养基 | 第30-31页 |
| ·1/2MS培养基配方 | 第30-31页 |
| ·B5营养液配方 | 第31页 |
| 四、实验方法 | 第31-39页 |
| 1、材料培养方法 | 第31-32页 |
| ·无菌培养 | 第31-32页 |
| ·土培法: | 第32页 |
| 2、冷胁迫处理方法 | 第32页 |
| ·冷驯化方法 | 第32页 |
| ·逐渐降温表型实验 | 第32页 |
| ·急速降温表型实验 | 第32页 |
| 3、生理指标测定方法 | 第32-36页 |
| ·电导率测定 | 第32-33页 |
| ·含水量测定 | 第33页 |
| ·叶绿素测定 | 第33-34页 |
| ·游离脯氨酸测定 | 第34-35页 |
| ·可溶性糖含量测定(蒽酮乙酸乙酯法) | 第35-36页 |
| 4、基因的RT-PCR分析 | 第36-39页 |
| ·总RNA提取(Trizol法) | 第36-37页 |
| ·RNA的紫外分光分析 | 第37页 |
| ·RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第37页 |
| ·RT-PCR扩增目的片断 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR扩增检测基因表达差异 | 第38-39页 |
| 第三部分 实验结果与讨论 | 第39-58页 |
| 一、bril-5的抗低温能力分析 | 第39-44页 |
| 1、非冷驯化条件下bril-5有较强的抗冷胁迫能力 | 第39-40页 |
| 2、冷驯化过程提高了bril-5的抗冷胁迫能力 | 第40-41页 |
| 3、bril-5具有一定程度抵御极低温度的能力 | 第41-42页 |
| 4、外源EBR可以提高bril-5抵御低温的能力 | 第42-44页 |
| ·外源EBR可以提高拟南芥抵御-30℃超低温 | 第42-43页 |
| ·外施EBR可以提高冷驯化材料抵御低温的能力 | 第43-44页 |
| 二、bril-5的生理指标检测分析 | 第44-49页 |
| 1、bril-5低温情况下细胞膜的电渗透率低于ws-2 | 第44-45页 |
| 2、bril-5与ws-2含水量没有明显区别 | 第45-46页 |
| 3、bril-5叶绿素含量比ws-2略低 | 第46-47页 |
| 4、bril-5中游离脯氨酸含量高于ws-2 | 第47-48页 |
| 5、bril-5中可溶性糖含量高于ws-2 | 第48-49页 |
| 三、bril-5的冷相关基因检测分析 | 第49-52页 |
| 1、冷驯化相关基因CBF的RT-PCR分析 | 第49-50页 |
| 2、冷驯化下游基因RD29A、COR15A、COR47的RT-PCR分析 | 第50-52页 |
| 四、讨论 | 第52-58页 |
| 第四部分 小结与展望 | 第58-60页 |
| 一、小结 | 第58-59页 |
| 二、展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
