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纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)产纳他霉素高产菌株的选育

中文摘要第1-4页
Abstract第4-11页
第1章 前言第11-29页
   ·纳他霉素的概述第11-18页
     ·发现与命名第11页
     ·理化性质第11-13页
     ·纳他霉素的抑菌作用第13-15页
       ·抑菌机理第13页
       ·抑菌谱第13-14页
       ·纳他霉素作为防腐剂的特点第14-15页
     ·纳他霉素的应用第15-16页
       ·食品中的应用第15-16页
       ·医疗中的应用第16页
       ·在青贮饲料方面的应用第16页
     ·纳他霉素的检测方法第16-18页
       ·生物检测法第16-17页
       ·高效液相色谱(HPLC)法第17页
       ·紫外分光光度法第17页
       ·元素分析法第17页
       ·比色分析法第17-18页
   ·纳他霉素的生产概述第18-19页
     ·纳他霉素产生菌第18-19页
     ·纳他霉素的分离提取第19页
   ·抗生素产生菌的诱变育种的研究概况第19-25页
     ·诱变方法第20-22页
       ·诱变育种第20-21页
       ·遗传重组育种第21页
       ·基因工程育种第21-22页
     ·突变株的筛选第22-25页
       ·随机筛选第22-23页
       ·耐碳源分解代谢物阻遏突变株的筛选第23页
       ·耐前体及其结构类似物突变株的筛选第23-24页
       ·链霉素抗性突变株的筛选第24页
       ·琼脂块法初筛纯化出发菌株第24-25页
     ·诱变剂量的选择第25页
   ·本研究的目的和意义第25-29页
     ·本研究的目的第25页
     ·试验研究的意义:第25-27页
     ·试验的技术路线第27-29页
第2章 材料与方法第29-42页
   ·试验材料第29-33页
     ·菌株第29-30页
     ·主要药品第30-31页
     ·仪器设备第31页
     ·培养基第31-32页
     ·溶液配制第32-33页
   ·试验方法第33-42页
     ·菌株的活化和培养第33-34页
       ·菌种活化与保藏第33-34页
       ·孢子悬浮液的制备与孢子计数第34页
       ·斜面培养第34页
       ·单菌落分离平板培养第34页
       ·种子液培养第34页
       ·发酵培养及发酵液的提取第34页
     ·纳他霉素生物检测方法第34-36页
       ·敏感菌液制备第34页
       ·纳塔尔链霉菌发酵液的制备第34-35页
       ·双层检测平板的制备第35页
       ·敏感菌的筛选第35页
       ·敏感菌浓度的确定第35页
       ·一剂量管碟法绘制纳塔霉素标准曲线第35页
       ·发酵液中纳他霉素提取溶剂对提取效果的影响第35页
       ·琼脂块法筛选菌株第35-36页
       ·生产菌生物量(DCW)的测定第36页
     ·菌株培养方法的优化第36-39页
       ·斜面孢子培养基和培养时间的确定第36-37页
       ·种子培养液和培养时间的确定第37-38页
       ·最佳接种量的确定第38页
       ·摇床发酵转数的确定第38页
       ·摇床发酵温度的确定第38页
       ·溶解氧对那他霉素产量的影响第38页
       ·发酵培养基初始pH 值对发酵的影响第38-39页
       ·菌株生长曲线和纳他霉素积累曲线第39页
     ·诱变第39-42页
       ·筛选剂最小抑菌浓度(MIC)的确定第39-40页
       ·诱变致死率的测定第40页
       ·诱变正突变率的的计算第40页
       ·诱变贡献率计算第40页
       ·诱变方法第40-42页
第3章 结果与分析第42-67页
   ·纳他霉素检测方法的确定第42-45页
     ·敏感菌的筛选第42-43页
     ·敏感菌浓度的确定第43页
     ·发酵液中纳他霉素提取剂的确定第43-44页
     ·标准曲线的绘制第44-45页
   ·纳塔尔链霉菌产纳他霉素培养方式的确立第45-53页
     ·斜面孢子培养基和培养时间的确定第45-46页
     ·种子液培养基和培养时间的确第46-48页
     ·最佳接种量的确定第48页
     ·摇床发酵转数的确定第48-49页
     ·摇床发酵温度的确定第49-51页
     ·溶解氧对纳他霉素产量的影响第51页
     ·发酵培养基初始pH 值对发酵的影响第51-52页
     ·菌株生长曲线和纳他霉素积累曲线第52-53页
   ·纳他霉素产生菌的诱变育种第53-67页
     ·出发菌株的选择第53-55页
     ·最小抑菌浓度的确定第55页
     ·紫外线诱变选育纳他霉素生产菌第55-57页
       ·紫外线诱变剂量的选择第55-56页
       ·紫外线诱变菌株的筛选结果第56-57页
     ·硫酸二已酯(DES)诱变选育纳他霉素生产菌第57-59页
       ·DES 诱变剂量的选择第57-58页
       ·DES 诱变筛选结果第58-59页
     ·吖啶橙诱变选育纳他霉素生产菌第59-61页
       ·吖啶橙诱变剂量的选择第59-60页
       ·吖啶橙诱变筛选结果第60-61页
     ·紫外线+氯化锂诱变选育纳他霉素生产菌第61-63页
       ·紫外线+氯化锂诱变剂量的确定第61-62页
       ·紫外线+氯化锂诱变的筛选结果第62-63页
     ·高产突变株 F-99 的遗传稳定性及与原始菌株抑菌圈对比第63-64页
     ·各种诱变因子诱变后菌落形态的变异第64-65页
     ·抗性筛选剂的比较第65-67页
第4章 讨论第67-73页
   ·检测方法第67-68页
   ·培养方法第68-69页
   ·诱变育种第69-72页
     ·诱变结果第69-70页
     ·四种诱变方法效果的比较第70-72页
     ·诱变顺序和诱变方法的差异可能导致诱变结果的不同第72页
   ·展望第72-73页
结论第73-74页
参考文献第74-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间所发表的论文第80-81页

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