几种农杆菌的耐酚性能比较与驯化研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| ·植物转基因技术进展 | 第12-16页 |
| ·直接基因转化系统 | 第12-14页 |
| ·基因枪介导基因转化法 | 第12-13页 |
| ·脂质体介导基因转化法 | 第13页 |
| ·PEG介导基因转化法 | 第13页 |
| ·显微注射介导基因转化法 | 第13页 |
| ·电激介导基因转化法 | 第13-14页 |
| ·离子束介导基因转化法 | 第14页 |
| ·激光微束介导基因转化法 | 第14页 |
| ·种质转化系统 | 第14页 |
| ·花粉管通道介导基因转化法 | 第14页 |
| ·生殖细胞浸泡介导基因转化法 | 第14页 |
| ·农杆菌转化系统 | 第14-16页 |
| ·根癌农杆菌 | 第15页 |
| ·发根农杆菌 | 第15-16页 |
| ·茶树遗传转化研究进展 | 第16-18页 |
| ·茶树农杆菌介导基因转化法 | 第16-17页 |
| ·茶树基因枪遗传转化研究 | 第17-18页 |
| ·茶树遗传转化中存在的问题与对策 | 第18-19页 |
| ·缺乏高频的植株再生体系 | 第18页 |
| ·缺乏有效的转化方法和筛选体系 | 第18-19页 |
| ·影响农杆菌对植物遗传转化效率的因素 | 第19-21页 |
| ·不同农杆菌菌株属性对转化的影响 | 第19页 |
| ·植物基因型及外植体对转化的影响 | 第19页 |
| ·多酚类物质对转化的影响 | 第19-20页 |
| ·化学因子对转化的影响 | 第20页 |
| ·物理因子对转化的影响 | 第20-21页 |
| ·国内外茶叶相关研究进展 | 第21-22页 |
| ·儿茶素的研究进展 | 第21页 |
| ·农杆菌对茶树遗传转化研究 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的意义与主要研究内容 | 第22页 |
| ·目的意义 | 第22页 |
| ·主要研究内容 | 第22页 |
| ·农杆菌菌株特性及对茶多酚的耐受性研究 | 第22页 |
| ·耐酚菌株的筛选及其驯化研究 | 第22页 |
| ·农杆菌介导茶树的转化条件的优化 | 第22页 |
| ·驯化菌株转化能力的鉴定 | 第22页 |
| ·创新之处 | 第22-24页 |
| 第二章 农杆菌菌株特性及对茶多酚的耐受性研究 | 第24-29页 |
| ·材料和试剂 | 第24-25页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-26页 |
| ·菌液生长曲线的制作方法 | 第25页 |
| ·冷冻干燥菌种的恢复培养 | 第25页 |
| ·四种菌株生长曲线的制作 | 第25页 |
| ·茶多酚成分的测定 | 第25-26页 |
| ·流动相配制 | 第25-26页 |
| ·茶多酚柱前衍生反应 | 第26页 |
| ·色谱条件 | 第26页 |
| ·农杆菌对茶多酚的耐受性比较 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·四种菌株生长活力的测定结果 | 第26-27页 |
| ·茶多酚成分的测定 | 第27-28页 |
| ·不同农杆菌对茶多酚的耐受性比较 | 第28-29页 |
| 第三章 农杆菌耐酚菌株的筛选与驯化研究 | 第29-35页 |
| ·材料和试剂 | 第29页 |
| ·菌株和载体 | 第29页 |
| ·AB培养基 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·农杆菌的茶多酚耐受性驯化实验 | 第29-30页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株的生长活力比较 | 第30页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株的耐酚性比较 | 第30页 |
| ·数据分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·针对茶多酚耐受性的农杆菌驯化培养 | 第30-32页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株的生长活力比较 | 第32-33页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株的耐酚性比较 | 第33-35页 |
| 第四章 转化条件的优化 | 第35-41页 |
| ·材料和试剂 | 第35-37页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·酶及主要试剂 | 第35-37页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37页 |
| ·卡那霉素的抗性筛选 | 第37页 |
| ·共培养时间对GUS瞬时表达的影响 | 第37页 |
| ·农杆菌菌液浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第37页 |
| ·侵染时间对GUS瞬时表达的影响 | 第37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·卡那霉素的抗性筛选 | 第37-38页 |
| ·共培养时间对外植体GUS瞬时表达的影响 | 第38-39页 |
| ·农杆菌菌液浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第39-40页 |
| ·侵染时间对GUS瞬时表达的影响 | 第40-41页 |
| 第五章 驯化菌株转化能力的验证 | 第41-52页 |
| ·材料和试剂 | 第41-45页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·细菌菌株及转化质粒 | 第41页 |
| ·酶及主要试剂 | 第41-44页 |
| ·仪器设备 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·质粒载体pCAMBIA1301的图谱 | 第45页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第45-47页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| ·转化 | 第46页 |
| ·碱法小批量抽提质粒DNA | 第46页 |
| ·表达载体的单酶切验证 | 第46-47页 |
| ·核酸电泳 | 第47页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株转化率的比较 | 第47页 |
| ·CTAB法提取植株基因组DNA | 第47-48页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第48-49页 |
| ·引物的设计与合成 | 第48-49页 |
| ·琼脂糖凝胶检测 | 第49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第49-50页 |
| ·抗酚菌株与原始菌株转化率的比较 | 第50-51页 |
| ·PCR产物验证 | 第51-52页 |
| 第六章 总结 | 第52-54页 |
| ·总结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
