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甘草药材中甘草酸含量变异的分子标记研究-rbcL、trnL内含子、IGS和matK

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
前言第11-12页
1 研究现状及立题依据第12-28页
   ·立题意义与立题背景第12-25页
     ·DNA 分子标记在作物遗传育种研究中的应用第12-15页
     ·分子标记的研究方法第15-18页
     ·DNA 分子标记在药用植物研究中的应用概况第18-21页
     ·基因序列的变异与活性成分含量差异的相关性研究现状第21-22页
     ·甘草中甘草酸含量变异的研究现状第22-24页
     ·甘草的基因多态性研究现状第24页
     ·甘草的基因与活性成分含量的相关性研究现状第24-25页
   ·研究内容、研究目标、技术路线和拟解决的关键问题第25-28页
     ·研究内容第25-26页
     ·研究目标和拟解决的关键问题第26页
     ·技术路线第26-28页
2 栽培甘草群体中甘草酸极端含量的个体筛选第28-37页
   ·材料和方法第28页
     ·实验材料、试剂和仪器第28页
   ·实验方法第28-32页
     ·色谱条件第28-29页
     ·供试液的制备第29页
     ·含量测定第29-32页
   ·实验结果第32-36页
   ·分析与讨论第36-37页
3 甘草基因组DNA 提取方法的建立第37-45页
   ·材料、试剂和仪器第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·试剂及耗材第37-38页
     ·仪器第38页
   ·实验方法第38-41页
     ·高盐低pH 值法提取基因组DNA第38-39页
     ·SDS 法提取基因组DNA第39页
     ·2×CTAB 法提取基因组DNA第39-40页
     ·尿素法提取DNA第40页
     ·试剂盒提取基因组DNA第40页
     ·DNA 的检测第40-41页
   ·实验结果第41-42页
   ·分析与讨论第42-44页
     ·不同DNA 提取方法的比较第42-43页
     ·DNA 提取过程中的条件优化第43-44页
   ·小结第44-45页
4 rbcL 基因与甘草酸含量的相关性研究第45-58页
   ·材料、试剂和仪器第45-46页
     ·实验材料第45-46页
     ·试剂及耗材第46页
     ·DNA 提取、检测相关试剂第46页
   ·实验方法第46-49页
     ·基因组DNA 的提取和纯化第46-47页
     ·DNA 的检测第47页
     ·引物设计第47页
     ·PCR 扩增反应体系及其程序的优化第47-48页
     ·PCR 产物的回收、纯化第48页
     ·序列测定第48页
     ·序列排列和分析第48-49页
   ·实验结果第49-55页
     ·总DNA 的质量第49页
     ·优化PCR 反应条件第49-50页
     ·PCR 扩增程序的优化第50-51页
     ·PCR 扩增结果第51-52页
     ·PCR 产物的纯化第52页
     ·不同甘草个体的rbcL 序列片段第52-55页
   ·分析与讨论第55-56页
     ·rbcL 序列特征第55页
     ·rbcL 基因和甘草酸含量的关系第55-56页
   ·小结第56-58页
     ·基因组DNA 的提取和纯化第56页
     ·引物的选择第56页
     ·rbcL 序列特征第56-58页
5 trnL 内含子与甘草酸含量的相关性研究第58-72页
   ·材料、试剂和仪器第58-59页
     ·实验材料第58页
     ·试剂及耗材第58页
     ·DNA 提取、检测、trnL 内含子序列扩增相关试剂第58-59页
   ·实验方法第59-61页
     ·基因组DNA 的提取和纯化第59页
     ·DNA 的检测第59页
     ·PCR 扩增反应体系及其程序的优化第59-60页
     ·引物设计第60页
     ·PCR 产物的回收、纯化第60页
     ·序列测定第60-61页
     ·序列排列和分析第61页
   ·实验结果第61-70页
     ·总DNA 的质量第61页
     ·优化的PCR 反应条件第61-62页
     ·PCR 扩增程序的优化第62-63页
     ·PCR 扩增结果第63-64页
     ·不同甘草个体的trnL 内含子序列第64-70页
   ·分析与讨论第70页
     ·trnL 内含子序列特征第70页
     ·trnL 内含子和甘草酸含量的关系第70页
   ·小结第70-72页
     ·DNA 提取及PCR 条件的优化第70-71页
     ·trnL 内含子序列特征第71-72页
6 IGS (trnL-F 基因间隔区)序列与甘草酸含量的相关性研究第72-81页
   ·材料、试剂和仪器第72-73页
     ·实验材料第72页
     ·试剂及耗材第72页
     ·DNA 提取、检测、IGS 序列扩增相关试剂第72-73页
   ·实验方法第73-74页
     ·基因组DNA 的提取和纯化第73页
     ·DNA 的检测第73页
     ·PCR 扩增反应体系及其程序的优化第73页
     ·引物设计第73页
     ·PCR 产物的回收、纯化第73-74页
     ·序列测定第74页
     ·序列排列和分析第74页
   ·实验结果第74-80页
     ·总DNA 的质量第74页
     ·优化的PCR 反应条件第74页
     ·PCR 扩增程序的优化第74-75页
     ·PCR 扩增结果第75页
     ·不同甘草个体的IGS(trnL-F 基因间隔区)序列第75-80页
   ·分析与讨论第80页
     ·IGS 序列特征第80页
     ·IGS 和甘草酸含量的关系第80页
   ·小结第80-81页
     ·DNA 提取及PCR 条件的优化第80页
     ·IGS 序列特征第80-81页
7 matK 基因与甘草酸含量的相关性研究第81-94页
   ·材料、试剂和仪器第81-82页
     ·实验材料第81页
     ·试剂及耗材第81页
     ·DNA 提取、检测、matK 序列扩增相关试剂第81-82页
   ·实验方法第82-84页
     ·基因组DNA 的提取和纯化第82页
     ·DNA 的检测第82-83页
     ·PCR 扩增反应体系及其程序的优化第83页
     ·引物设计第83页
     ·PCR 产物的回收、纯化第83-84页
     ·序列测定第84页
     ·序列排列和分析第84页
   ·实验结果第84-93页
     ·总DNA 的质量第84-85页
     ·优化的PCR 反应条件第85页
     ·PCR 扩增程序的优化第85页
     ·PCR 扩增结果第85-86页
     ·不同甘草个体的matK 序列第86-93页
   ·分析与讨论第93页
     ·matK 序列特征第93页
     ·matK 基因和甘草酸含量的关系第93页
   ·小结第93-94页
     ·DNA 提取及PCR 条件的优化第93页
     ·matK 序列特征第93-94页
8 结论与讨论第94-101页
   ·栽培甘草群体中甘草酸极端含量的个体筛选第94页
   ·甘草中 DNA 的提取方法考察第94-96页
     ·不同DNA 提取方法的比较第94-95页
     ·DNA 提取的影响因素第95-96页
   ·PCR 扩增反应体系及其程序的优化第96-98页
     ·PCR 扩增反应体系的优化第96页
     ·PCR 扩增程序的优化第96-98页
   ·基因和甘草酸含量的关系第98-99页
     ·rbcL 基因和甘草酸含量的相关性第98页
     ·trnL 内含子和甘草酸含量的相关性第98-99页
     ·IGS 与甘草酸含量的相关性第99页
     ·matK 基因和甘草酸含量的相关性第99页
   ·创新与展望第99-101页
参考文献第101-106页
致谢第106-107页
个人简历第107页

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